宽谱沙门氏菌噬菌体STP4-a的发酵制备及其在蛋鸡体内的抑菌研究

发布时间：2021-03-09 09:32

　　沙门氏菌（Salmonella）是自然界普遍存在的人畜共患病致病菌，在全世界范围内，沙门氏菌引起的食物性中毒一直排在前三位。随着抗生素的大量和长期使用，越来越多的沙门氏菌产生了耐药性，如何解决这一全球普遍性问题一直是科学家们的研究热点。目前，噬菌体已被科学家广泛的应用在食品安全防护中，因此噬菌体作为取代抗生素的生物抑菌剂是有开发前景的。为了保证高效和安全的应用，对噬菌体进行安全性评估和生产应用研究是十分必要的。因此，本研究以沙门氏菌噬菌体STP4-a为研究对象，主要的研究内容与结论如下：1.噬菌体STP4-a的安全性分析：从分子水平上对噬菌体STP4-a全基因组的所有开放式阅读框进行BLAST比对，并将其与过敏原数据库继续进行比对，从而判断其安全性；然后，通过使用1010pfu/mL噬菌体STP4-a进行经口毒性实验以评价其安全性。结果表明：噬菌体STP4-a所有的开放式阅读框不含与已知的毒物、毒素或者是与宿主沙门氏菌或其他病原菌相关的蛋白或基因产物的同源基因，经过敏原比较分析也不具有产过敏原基因；噬菌体对小鼠体重、脏器重量、脏器发育等方面无显著性影响，通过大体解剖和组织切片观察未发现... 

【文章来源】：中国海洋大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：91 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
0 前言
    0.1 沙门氏菌及其噬菌体的简介
        0.1.1 沙门氏菌的传播及危害
        0.1.2 沙门氏菌的耐药性趋势
        0.1.3 噬菌体的生物学特性
    0.2 噬菌体的安全性研究现状
        0.2.1 噬菌体防控病原菌的优势
        0.2.2 噬菌体潜在危害概述
        0.2.3 噬菌体安全性研究现状
    0.3 噬菌体国内外应用研究现状
        0.3.1 噬菌体的生产制备研究
        0.3.2 噬菌体在食源性致病菌防控中的应用研究
        0.3.3 噬菌体在动物疾病治疗中的应用研究
        0.3.4 噬菌体在其他方面的应用研究
    0.4 研究目的及意义
1 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 的安全性分析
    1.1 引言
    1.2 实验材料
        1.2.1 菌种
        1.2.2 实验动物
        1.2.3 培养基
        1.2.4 主要仪器
        1.2.5 主要试剂、材料
        1.2.6 主要试剂配制
    1.3 实验方法
        1.3.1 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 分子水平上安全性评估
        1.3.2 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 的经口毒性实验
        1.3.3 数据分析方法
    1.4 结果与讨论
        1.4.1 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 分子水平上安全性分析结果
        1.4.2 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 的经口毒性实验结果
    1.5 小结
2 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 的生产制备探究
    2.1 引言
    2.2 实验材料
        2.2.1 菌种
        2.2.2 培养基
        2.2.3 主要仪器
        2.2.4 主要试剂
        2.2.5 主要试剂配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 最适液体增殖条件优化
        2.3.2 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 发酵罐试验
        2.3.3 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 的冻干贮藏
        2.3.4 数据分析方法
    2.4 结果与讨论
        2.4.1 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 最适液体增殖条件结果
        2.4.2 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 发酵罐验证结果
        2.4.3 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 的冻干活性结果
    2.5 小结
3 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 在蛋鸡体内抑菌的初步研究
    3.1 引言
    3.2 实验材料
        3.2.1 菌种
        3.2.2 培养基
        3.2.3 主要仪器
        3.2.4 主要试剂
        3.2.5 实验动物
    3.3 实验方法
        3.3.1 病鸡中沙门氏菌的分离及鉴定
        3.3.2 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 裂解谱的确定
        3.3.3 沙门氏菌噬菌体 STP4-a 在蛋鸡体内抑菌的实验方案
        3.3.4 数据分析方法
    3.4 结果与讨论
        3.4.1 沙门氏菌分离结果
        3.4.2 沙门氏菌 16S rDNA 鉴定结果
        3.4.3 噬菌体 STP4-a 的裂解谱测定结果
        3.4.4 沙门氏菌鸡体内治疗结果
    3.5 本章小结
4 论文总结
5 论文的创新性
参考文献
附表1
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]一株沙门氏菌烈性噬菌体的分离纯化与生理特性研究[J]. 李萌,韩峰,林洪,王静雪.  水产科学. 2013(09)
[2]肠出血性大肠埃希菌O157噬菌体的生物学特性[J]. 刘悦,李菁华,史红艳,温剑平,孙延波.  吉林大学学报(医学版). 2012(01)
[3]宽噬菌谱肠炎沙门氏菌噬菌体的生物学特性[J]. 包红朵,张辉,王冉.  江苏农业学报. 2011(05)
[4]噬菌体及其裂解酶在食源性致病菌检测和控制中的应用[J]. 江艳华,姚琳,王鹏,翟毓秀,王联珠.  微生物学通报. 2011(10)
[5]金黄色葡萄球菌烈性噬菌体的分离鉴定和最佳保存方法研究[J]. 李陇平,张智英.  中国畜牧兽医. 2011(06)
[6]噬菌体及其内溶素的应用研究进展[J]. 刘伟,王学琴,董世雷,朱立颖,王欣.  浙江农业学报. 2010(05)
[7]鲍曼不动杆菌烈性噬菌体的分离与纯化[J]. 梁莉,杨洪江,金鑫.  生物学杂志. 2010(04)
[8]深圳赤潮中霍乱弧菌噬菌体的分离筛选及生物学特性分析[J]. 蔡俊鹏,孙丽滢.  微生物学通报. 2010(01)
[9]pH对微生物的影响[J]. 陈燕飞.  太原师范学院学报(自然科学版). 2009(03)
[10]生物制品冻干保护剂及其保护机理的研究进展[J]. 朱敖兰,杨洁.  喀什师范学院学报. 2007(06)

博士论文
[1]罗非鱼片臭氧减菌化处理中自由基的产生及其对产品品质与安全性的影响[D]. 赵永强.中国海洋大学 2013

硕士论文
[1]噬菌体对食品加工过程沙门氏菌污染的防控研究[D]. 李萌.中国海洋大学 2011
[2]河南省部分地区鸡沙门氏菌的分离鉴定和耐药性研究[D]. 钱明珠.河南农业大学 2010



本文编号：3072652