microRNA-128对牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的调控机制研究

发布时间：2021-03-13 04:23

　　已有研究证明microRNA（miRNAs）在肌肉细胞增殖和分化过程中发挥了重要作用,目前有关miRNAs对牛肌肉生长发育影响的相关研究还比较少,本研究通过建立牛骨骼肌卫星细胞体外成肌诱导分化模型,结合前期研究结果,对miR-128在牛骨骼肌卫星细胞增殖及成肌分化过程中所起到的调控作用进行了深入研究。1.本研究采用胶原酶联合胰酶的酶消化法,从牛胎儿中分离肌卫星细胞,利用差速贴壁法进行纯化,对纯化后的卫星细胞进行了诱导分化,并对标志性基因进行了RT-PCR及免疫荧光染色检测。结果表明,纯化后的肌卫星细胞标志性基因Pax7呈阳性表达,且通过阳性细胞所占比例计算分离出来的卫星细胞纯度在93%以上;肌管标志性基因肌球蛋白重链（MHC）呈阳性表达,表明分离出来的肌卫星细胞具有良好的体外分化能力。本研究建立了牛骨骼肌卫星细胞分离鉴定和体外成肌诱导的方法,可以为肌肉发育分化和后续研究提供良好的细胞模型。2.前期研究中,我们发现miR-128在牛骨骼肌卫星细胞成肌分化中表达水平显著上调,本研究中我们深入探讨了miR-128在牛骨骼肌卫星细胞的增殖分化过程中的生物学作用。通过双荧光素酶实验确定了miR-... 

【文章来源】：天津农学院天津市

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

牛肌卫星细胞标志基因Pax7反转录PCR分析

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3079566