ISL1基因腺病毒过表达载体的构建及其诱导犬ADSCs向胰岛样细胞分化

发布时间：2021-03-13 12:59

　　构建腺病毒重组表达载体pADTrack-ISL1-AdEasy,经293A细胞的包装和扩增,获得具有感染性的重组腺病毒,将其按感染复数（MOI）=100感染犬脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）,观察感染后4,7,10,13,16 d绿色荧光蛋白表达情况、细胞形态变化和胰岛β细胞发育相关基因的mRNA表达情况。结果显示,含ISL1基因的重组腺病毒感染犬ADSCs 48 h后,绿色荧光蛋白开始表达;13 d后犬ADSCs出现细胞形态变化,由梭形变为神经细胞样;qRT-PCR分析表明在犬ADSCs中过表达ISL1基因提高了PDX1、NGN3、MNX1、MAFA和NKX6.1基因的内源性表达。结果表明,含ISL1基因的重组腺病毒成功感染犬ADSCs,并可促进其向胰岛样前体细胞分化,具有进一步诱导形成胰岛样细胞的可能。 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(08)北大核心

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

ISL1基因的PCR结果

图2 双酶切结果

pADTrack-ISL1-AdEasy转染293A细胞结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]犬糖尿病胰岛素疗法[J]. 杜宏超,庞海东,林德贵.  中国兽医杂志. 2017(03)
[2]神经前体细胞不是胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞分化的必经途径[J]. 周光纪,屈纪富,徐海伟,杨丽.  生物医学工程学杂志. 2007(06)



本文编号：3080261