精氨酸水平对体外培养奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白表达的影响

发布时间：2021-03-14 13:25

　　乳蛋白是构成牛奶营养品质的主要物质基础,既涉及乳品质量安全,又是奶业核心竞争力的标志。因此,立足我国乳品质的现实,建立改善乳蛋白的理论和方法已经成为奶业持续健康发展的需求。研究表明,乳腺中精氨酸的摄入量超过其乳中精氨酸分泌量的2-4倍,提示精氨酸除用于乳蛋白合成外,其乳腺冗余还可能有其他代谢途径或作为功能性氨基酸参与代谢调控。本课题则研究了不同精氨酸水平对体外培养乳腺上皮细胞酪蛋白表达的影响及其分子机制。该试验以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究培养基中不同水平的Arg对奶牛乳腺上皮细胞生长以及细胞增殖活性的影响。试验以无Arg的培养基即Arg0倍组（0.00mg/L）为对照,Arg0.25倍组（69.500mg/L）、0.5倍组（139.00mg/L）、1倍组（278.00mg/L）、2倍组（556.00mg/L）、4倍组（1112.00mg/L）、8倍组（2224.00mg/L）为试验处理组。研究结果表明：（1）添加精氨酸能显著促进乳腺上皮细胞的增殖（P<0.05）。（2）添加精氨酸能促进as-casein和β-casein等酪蛋白的表达,并以2倍组（556.00mg/L... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：53 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
Abstract
图表清单
缩写说明
第一章：绪论
    1 乳蛋白的合成
    2 乳腺细胞内蛋白质合成的调控
        2.1 乳蛋白合成调控的研究概况
        2.2 限制性氨基酸对乳蛋白合成调控的研究
        2.3 功能性氨基酸对乳蛋白合成的调控作用
    3 精氨酸的生理生化功能
        3.1 精氨酸—NO途径
        3.2 促进蛋白质合成
        3.3 精氨酸作为内分泌促分泌物
        3.4 体外精氨酸对细胞培育的影响
    4. 精氨酸的代谢途径
    5. 本研究的立题与主要内容
第二章：试验研究：精氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白表达的影响
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 试验设计
        2.2 奶牛乳腺上皮细胞（CMEC）的纯化培养
        2.3 噻唑蓝比色（MTT）法检测细胞增殖
        2.4 乳腺上皮细胞总蛋白的提取
        2.5 乳腺上皮细胞内αs-、β-酪蛋白合成量的测定
        2.6 RNA提取及质量鉴定
        2.7 反转录与RT-PCR
        2.8 数据处理与分析
    3. 结果与分析
        3.1 Arg对乳腺上皮细胞细胞增殖的影响
        3.2 Arg对乳腺上皮细胞细胞酪蛋白表达的影响
        3.3 Arg对乳腺上皮细胞细胞酪蛋白基因转录的影响
        3.4 Arg乳腺上皮细胞中信号转导基因转录的影响
        3.5 Arg对乳腺上皮细胞细胞精氨酸代谢酶的影响
    4. 讨论
        4.1 Arg对乳腺上皮细胞细胞酪蛋白表达的影响
        4.2 Arg对乳腺上皮细胞细胞增殖的的影响
        4.3 Arg对乳腺上皮细胞细胞酪蛋白基因转录的影响
        4.4 Arg对乳腺上皮细胞中信号转导基因转录的影响
        4.5 Arg对乳腺上皮细胞细胞精氨酸代谢酶的影响
第五章：结论
参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]精氨酸水平对奶牛乳腺上皮细胞体外生长及κ-酪蛋白基因表达的影响[J]. 徐柏林,王梦芝,张兴夫,哈斯,王春艳,敖长金,王洪荣.  动物营养学报. 2012(05)
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博士论文
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[2]王不留行、黄芪对奶牛乳腺上皮细胞体外增殖与分泌功能影响的研究[D]. 丁月云.南京农业大学 2008
[3]必需氨基酸及蛋氨酸二肽供给模式对奶牛乳腺组织αs-酷蛋白合成的影响[D]. 吴慧慧.浙江大学 2007
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硕士论文
[1]奶牛乳腺上皮细胞中赖氨酸蛋氨酸配比模式对酪蛋白合成的影响及机理研究[D]. 李喜艳.中国农业科学院 2011
[2]必需氨基酸浓度对奶牛乳腺酪蛋白αs1基因表达的影响[D]. 来金良.浙江大学 2006



本文编号：3082266