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鸡Prox1蛋白核定位信号的预测与鉴定

发布时间:2021-03-16 02:37
  Prox1 (prospero-related homeobox protein 1)作为转录因子,在胚胎发育与癌症发生中具有重要作用。为预测和鉴定鸡(Gallus gallus) Prox1蛋白核定位信号(nuclear localization signal, NLS),首先对鸡Prox1蛋白进行截短表达,通过荧光观察和亚细胞定位分析确定其NLS所在区域。运用在线软件预测鸡Prox1蛋白截短体中假定的NLS (putative NLS, pNLS),构建鸡Prox1蛋白pNLS缺失体重组真核表达载体并转染细胞,通过观察缺失体重组蛋白的亚细胞定位确定NLS;进一步将鉴定的鸡Prox1蛋白NLS进行保守性分析,并检测其对外源蛋白的核输入能力;另外,利用NLS点突变鉴定鸡Prox1蛋白NLS中的关键碱性氨基酸位点。结果表明,鸡Prox1蛋白N端(1~220 aa)具有细胞核定位特征,NLS预测结果显示其N端存在2个pNLS,分别为pNLS1 (15KRRR18)和pNLS2 (163RAKRAR168... 

【文章来源】:农业生物技术学报. 2020,28(11)北大核心

【文章页数】:12 页

【部分图文】:

鸡Prox1蛋白核定位信号的预测与鉴定


鸡Prox1蛋白截短体片段扩增(A)及重组真核表达载体的酶切鉴定(B)

鸡Prox1蛋白核定位信号的预测与鉴定


鸡Prox1截短体重组蛋白的亚细胞定位

鸡Prox1蛋白核定位信号的预测与鉴定


鸡Prox1蛋白p NLS缺失体的overlap PCR扩增(A)及重组真核表达载体的酶切鉴定(B)


本文编号:3085256

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