乳杆菌联合壳聚糖季铵盐对奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的影响

发布时间：2021-03-17 17:58

　　本试验旨在探究魏斯氏乳杆菌（L. weissella）、唾液乳杆菌（L. salivarius）和约氏乳杆菌（L.johnsonii）联合壳聚糖季铵盐（CQN）对奶牛子宫内膜炎的影响。通过乳酸脱氢酶（LDH）释放检测法筛选致病性大肠杆菌（EPEC）最佳处理浓度和时间,建立奶牛子宫内膜上皮细胞炎症模型。诱导细胞炎症后,单独添加0.01 mg/mL CQN、108CFU/mL乳杆菌处理以及乳杆菌联合CQN处理,ELISA法和RT-qPCR法检测细胞因子IL-6、IL-8和IL-10的变化。结果表明:单独添加3株乳杆菌处理与单独添加CQN处理均降低了IL-6的蛋白和mRNA表达（P<0.05）,但对IL-8的表达无显著影响;相比单独添加处理,约氏乳杆菌与CQN混合处理降低了IL-6和IL-8的表达（P<0.05）,并恢复了IL-6/IL-10和IL8/IL-10的平衡;与CQN混合处理后,约氏乳杆菌对奶牛子宫内膜上皮细胞的黏附率提升（P<0.001）。结果提示,约氏乳杆菌联合CQN具有良好的抗炎潜力,可用于奶牛子宫内膜炎的治疗。 

【文章来源】：中国畜牧杂志. 2020,56(08)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

细菌黏附变化

不同处理对细胞因子的影响

本试验首先添加了不同浓度的大肠杆菌对奶牛子宫内膜上皮细胞进行长时间的处理，发现106 CFU/mL的大肠杆菌处理3 h后，细胞因子IL-6和IL-8的表达显著上升，且在24 h内持续上升，确定了奶牛子宫内膜上皮细胞炎症的持续发生。致炎处理后，单独添加乳杆菌和单独CQN处理细胞12 h后均显著降低了IL-6的释放，但是未降至正常水平，且对IL-8的释放无显著影响，这可能是由于持续性的炎症需要更长时间的治疗。Wang等[13]在添加植物乳杆菌处理炎症细胞时也观察到相似现象，于是将治疗时间延长后发现促炎因子的显著下调。然而，本试验发现约氏乳杆菌和CQN混合添加处理炎症细胞后，细胞因子IL-6、IL-8和IL-10均恢复至正常水平，这表明乳杆菌和CQN混合后大大提高了其抗炎效果。有研究表明，大肠杆菌依赖菌体表面黏蛋白黏附于细胞膜进行侵染[4]。因此，本研究对大肠杆菌和约氏乳杆菌的黏附细胞的状态进行了观察，发现约氏乳杆菌和CQN混合处理尽管没有显著降低大肠杆菌对细胞的黏附率，但是抑制了其生长，并且CQN的添加显著增强了约氏乳杆菌的黏附率，这可能是导致细胞炎症减缓的重要原因之一。Inturri等[14]研究发现，长双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌的联合使用可有效降低革兰氏阴性菌的黏附性能。大量研究表明，乳杆菌联合中药、维生素和一些糖类可以有效减缓炎症的发生并提高机体的免疫功能[15-17]。这些证据均表明，乳杆菌联合多种物质将会是高效治疗奶牛子宫内膜炎的新走向。尽管本研究发现约氏乳杆菌和壳聚糖季铵盐的混合处理可以有效抑制细胞因子的上升，但其是基于细胞层面的体外研究，且机制尚不明确，需要更深入的研究。图3 不同处理对细胞因子的影响

【参考文献】：
期刊论文
[1]健康奶牛阴道乳酸菌分离鉴定及作为候选益生菌株的体外评价[J]. 田丰松,王军,刘畅,李长久,丁赫,杨雨江,吕文发.  中国预防兽医学报. 2016(06)



本文编号：3087479