绵羊乳房炎病原菌分离鉴定及灭活疫苗的免疫效果评估
发布时间：2021-03-18 21:57
乳房炎是哺乳动物非常普遍且危害巨大的一种疾病,严重影响乳畜的泌乳机能,对乳畜自身及新生动物健康造成威胁。绵羊作为优质的肉用品种,在我国青海、甘肃、西藏等地区被广泛养殖,但是长期以来,对乳房炎的研究主要集中在奶牛和奶山羊,而绵羊乳房炎的研究相对较少。本次研究主要针对青海省绵羊乳房炎,以期为绵羊乳房炎的诊断、防治提供一定的理论依据。本研究采集了青海省绵羊临床乳房炎乳样,通过细菌分离培养、菌落观察、革兰氏染色、16S rDNA序列分析、特异性PCR扩增等方法对乳汁中的病原菌进行分离鉴定,并对分离的病原菌进行了药敏试验;以分离鉴定的菌株为材料,制备了绵羊乳房炎灭活疫苗,对陕西千阳地区的奶山羊进行免疫,采用间接ELISA方法测定奶山羊乳汁和血液中的抗体效价,并用乳房炎诊断液诊断隐性乳房炎的情况,评估疫苗免疫效果。研究结果如下:1.分离到了青海省部分地区绵羊乳房炎主要病原菌4种,分别为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、蜡样芽孢杆菌。2.金黄色葡萄球菌对头孢菌素类和大环内酯类药物敏感,对青霉素类和氨基糖苷类药物耐药;大肠杆菌对大部分氨基糖苷类、四环素类药物敏感,对青霉素类药物表现出一定程度的耐药性;...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
乳样外观结果
图 2-2 病原菌特征性菌落形态观察结果黄色葡萄球菌快速鉴定培养基上的菌落形态；B：B 类C：C 类病原菌在绵羊血琼脂平板上的菌落形态；D：D脂平板上的菌落形态Figure 2-2 Appearances of pathogenic bacteria colonacteria A on Staphylococcus aureus rapid identification meacConkey medium; C: Pathogenic bacteria C on Sheep bloPathogenic bacteria C on Sheep blood agar medium定结果结果将 4 类病原菌进行革兰氏染色，然后镜检观察下的形态如下：A 类病原菌为革兰氏阳性菌，球短链和葡萄串状排列，以葡萄串状排列为主；B，两端钝圆，无荚膜、无芽孢，无特殊排列形式
图 2-3 4 种病原菌形态观察结果（革兰氏染色）A：A 类病原菌；B：B 类病原菌；C：C 类病原菌；D：D 类病原菌Figure 2-3 Microscopic morphology of pathogenic bacteria (Gram stain)A: Pathogenic bacteria A; B: Pathogenic bacteria BC: Pathogenic bacteria C; D: Pathogenic bacteria D菌 16S rDNA 扩增结果到的 4 类病原菌的基因组 DNA 为模板，用细菌 16S rDNA 的通电泳检测，发现 PCR 扩增产物条带都明亮、清晰、且条带大小扩增产物是所需的目的 DNA 片段且浓度较高（图 2-4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]瓜蒌散对牛乳房炎的治疗价值分析[J]. 徐迪. 吉林畜牧兽医. 2019(10)
[2]母羊乳房炎的发病原因、临床症状与防治措施[J]. 吕学广. 现代畜牧科技. 2019(09)
[3]奶山羊乳房炎的综合防治措施与建议[J]. 崔晨光. 中国乳业. 2019(08)
[4]牛羊乳房炎经中西医结合治疗的效果观察[J]. 邱卫东. 中国动物保健. 2019(08)
[5]蒲公英瓜蒌方剂加减治疗绵羊乳房炎[J]. 曹建武. 中兽医医药杂志. 2019(02)
[6]湖羊生态养殖模式探讨[J]. 许阳. 中国畜禽种业. 2019(01)
[7]防治牛羊乳房炎的有效策略分析[J]. 苏雄. 今日畜牧兽医. 2018(12)
[8]绵羊乳房炎的危害与防治[J]. 时帅峰,李海涛,马小军,庞彦生,张帅团. 今日畜牧兽医. 2018(04)
[9]山羊乳房炎的研究进展[J]. 薛照越,潘玉琨,杨发龙. 今日畜牧兽医. 2018(03)
[10]青海省绵羊发展现状及建议[J]. 赵青山,赵登雪. 今日畜牧兽医. 2017(11)
硕士论文
[1]奶山羊乳房炎病原菌分离鉴定及多重PCR检测方法建立[D]. 谢晓艳.西北农林科技大学 2017
[2]奶牛乳房炎大肠杆菌lps基因亚单位疫苗的构建及免疫原性研究[D]. 候书宝.甘肃农业大学 2016
[3]奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及其免疫效果评估[D]. 侯伟杰.西北农林科技大学 2014
[4]我国奶山羊主要养殖省份隐性乳房炎的调查及病原菌多重PCR检测方法的建立[D]. 姚运亮.西北农林科技大学 2013
[5]奶山羊乳房炎病原菌调查及其细胞因子的变化检测[D]. 韩炎森.西北农林科技大学 2011
[6]关中奶山羊临床型乳房炎模型的建立及疫苗研制[D]. 牟珊.西北农林科技大学 2010
[7]杨凌奶牛隐性乳房炎的流行病学调查及主要病原的分离鉴定和药敏试验[D]. 马启才.西北农林科技大学 2010
[8]奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌油乳剂灭活疫苗的研制及免疫效果评价[D]. 钟辉.南京农业大学 2005
本文编号：3088993
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
乳样外观结果
图 2-2 病原菌特征性菌落形态观察结果黄色葡萄球菌快速鉴定培养基上的菌落形态；B：B 类C：C 类病原菌在绵羊血琼脂平板上的菌落形态；D：D脂平板上的菌落形态Figure 2-2 Appearances of pathogenic bacteria colonacteria A on Staphylococcus aureus rapid identification meacConkey medium; C: Pathogenic bacteria C on Sheep bloPathogenic bacteria C on Sheep blood agar medium定结果结果将 4 类病原菌进行革兰氏染色，然后镜检观察下的形态如下：A 类病原菌为革兰氏阳性菌，球短链和葡萄串状排列，以葡萄串状排列为主；B，两端钝圆，无荚膜、无芽孢，无特殊排列形式
图 2-3 4 种病原菌形态观察结果（革兰氏染色）A：A 类病原菌；B：B 类病原菌；C：C 类病原菌；D：D 类病原菌Figure 2-3 Microscopic morphology of pathogenic bacteria (Gram stain)A: Pathogenic bacteria A; B: Pathogenic bacteria BC: Pathogenic bacteria C; D: Pathogenic bacteria D菌 16S rDNA 扩增结果到的 4 类病原菌的基因组 DNA 为模板，用细菌 16S rDNA 的通电泳检测，发现 PCR 扩增产物条带都明亮、清晰、且条带大小扩增产物是所需的目的 DNA 片段且浓度较高（图 2-4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]瓜蒌散对牛乳房炎的治疗价值分析[J]. 徐迪. 吉林畜牧兽医. 2019(10)
[2]母羊乳房炎的发病原因、临床症状与防治措施[J]. 吕学广. 现代畜牧科技. 2019(09)
[3]奶山羊乳房炎的综合防治措施与建议[J]. 崔晨光. 中国乳业. 2019(08)
[4]牛羊乳房炎经中西医结合治疗的效果观察[J]. 邱卫东. 中国动物保健. 2019(08)
[5]蒲公英瓜蒌方剂加减治疗绵羊乳房炎[J]. 曹建武. 中兽医医药杂志. 2019(02)
[6]湖羊生态养殖模式探讨[J]. 许阳. 中国畜禽种业. 2019(01)
[7]防治牛羊乳房炎的有效策略分析[J]. 苏雄. 今日畜牧兽医. 2018(12)
[8]绵羊乳房炎的危害与防治[J]. 时帅峰,李海涛,马小军,庞彦生,张帅团. 今日畜牧兽医. 2018(04)
[9]山羊乳房炎的研究进展[J]. 薛照越,潘玉琨,杨发龙. 今日畜牧兽医. 2018(03)
[10]青海省绵羊发展现状及建议[J]. 赵青山,赵登雪. 今日畜牧兽医. 2017(11)
硕士论文
[1]奶山羊乳房炎病原菌分离鉴定及多重PCR检测方法建立[D]. 谢晓艳.西北农林科技大学 2017
[2]奶牛乳房炎大肠杆菌lps基因亚单位疫苗的构建及免疫原性研究[D]. 候书宝.甘肃农业大学 2016
[3]奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及其免疫效果评估[D]. 侯伟杰.西北农林科技大学 2014
[4]我国奶山羊主要养殖省份隐性乳房炎的调查及病原菌多重PCR检测方法的建立[D]. 姚运亮.西北农林科技大学 2013
[5]奶山羊乳房炎病原菌调查及其细胞因子的变化检测[D]. 韩炎森.西北农林科技大学 2011
[6]关中奶山羊临床型乳房炎模型的建立及疫苗研制[D]. 牟珊.西北农林科技大学 2010
[7]杨凌奶牛隐性乳房炎的流行病学调查及主要病原的分离鉴定和药敏试验[D]. 马启才.西北农林科技大学 2010
[8]奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌油乳剂灭活疫苗的研制及免疫效果评价[D]. 钟辉.南京农业大学 2005
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