AMPK/FOXO3信号通路调控鸭成肌细胞凋亡与分化的机制研究

发布时间：2021-03-23 05:58

　　腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPIC）是细胞发育过程中的重要调控因子。FOXO3作为AMPK重要的下游分子,广泛参与细胞增殖、凋亡、分化、代谢等过程。然而,AMPK/FOXO3通路对鸭肌肉发育调控还未见相关研究,为了探讨腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK/FOXO3）信号通路在鸭成肌细胞凋亡与分化中的调控作用。首先,我们分别利用地塞米松和2%孕马血清诱导鸭成肌细胞凋亡和分化,检测AMPK和F0X03的表达量,然后,改变AMPK/FOXO3通路活性并检测细胞活性和周期以及相关标志基因表达量。1.分别用不同浓度的AMPK抑制剂（0.25μM、0.5μM、1μM、）和激活剂（0.5mM、1 mM、1.5 mM）处理成肌细胞,CCK-8和qRT-PCR结果显示0.5μM和1mM分别为抑制剂和激活剂的最佳处理浓度。鸭成肌细胞转染pEGFP-N1-FOXO3真核表达载体12、24、36、48h后检测FOX03的表达量,与对照组（Control和pEGFP-N1组）相比,在24小时鸭FOXO3的表达量显著上升。2.高浓度（1000ng/mL、10000... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３－１－２－２不同浓度ＡＩＣＡ民处理后尸和八）爪Ｗ?ｍＲＮＡ表达量??Ｉ＾ｉｕｒｅ?３－１－２－２?Ｒｅｌａｔｉｖｅ?ｅｘｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ＡＭＰＫ?ａｎｄ?ＦＯＸ０３??

０．０５）（图３－１－３－１?），而０．２５＾ｉＭ组／？－心你公和ＦＯＹＷ蛋白表达量无明显变化；??不同浓度激活剂处理蛋白表达量均显著性高于对照组（Ｐ＜０．０５），而??八化ａ？在０．５ｍＭ和ｌｍＭ高于对照组（Ｐ＜０．０５）（图３－：ｌ－３－２）。因此，分别将??０．５＾ｉＭ和ＩｍＭ作为抑制剂和激活剂的最佳处理浓度。??Ｓ?化１?Ｉ?１?，??Ｗ?Ｉ?？?Ｉ?画?Ｃｏｎｔｒｏｌ??穿?８－?而１?巧?巧?０．２５ｉｊｌ＼／ｌ??Ｉ?鑛?ｇ?宜?０．５１ＪＭ??Ｈ?６－?圓Ｓ昌?圓１ＨＭ??Ｉ－?圍ｉ圍??Ｉ?２－ｒＳｉｆｎｎ圍圓圍??Ｉ。Ｊｊ圍ＪＬ圍Ｉ圍??Ｓ?Ｕ?＂ＩＩＷＩ?，?■?ＩＩＩ＂??ｔ?／?＜／??图３－１－３－１不同浓度Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎ?２ＨＣ１处理２４ｈ后护＾４的戶／：和蛋白表达??且??里??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１－３－１?Ｔｈｅ?ｐｒｏ化ｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆａｎｄ??ａｔ?２４ｈ?ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ?Ｄｏｒｓｏｍｏｒｐｈｉｎ?２ＨＣ１?ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ??注：＊表明基因表达量差异显著（Ｐ＜０Ｘ）５）。??Ｎｏｔｅ；?＊?ｓｈｏｗ?ｔｈａｔ

京鸭的腿肌ｃＤＡＮ为模板进行扩增，ＰＣＲ产物用１．５％琼脂糖凝胶电泳检测，电??泳电压为１８０Ｖ，电泳１５ｍｉｎ，最终得到产物清晰且特异性较好的目的条带，长??度与推算结果相符（如图３－２－１）。??胆??２５??


本文编号：3095275