大肠杆菌乳腺炎奶牛嗜中性粒细胞DNA甲基化和基因表达调控研究

发布时间：2021-03-24 01:47

　　奶牛乳腺炎主要是由病原菌引起的一种炎症反应,大肠杆菌是导致乳腺炎发生的常见细菌之一。嗜中性粒细胞是炎症反应的第一效应者,可抵御病原菌侵袭。细菌侵入乳腺后,嗜中性粒细胞被招募且快速迁移至炎症部位吞噬细菌清除病原。DNA甲基化在炎症的发生、发展过程中发挥调控作用,并且与疾病易感性密切相关。鉴于此,本研究以半同胞健康和大肠杆菌乳腺炎奶牛为模型,进行如下研究:对血液嗜中性粒细胞进行DNA甲基化和RNA-seq测序;整合转录组和甲基化数据,筛选与炎症、免疫和防御反应相关的基因;通过亚硫酸盐测序和实时荧光定量PCR验证基因甲基化和表达水平,鉴定调控基因表达的甲基化位点,挖掘出与奶牛乳腺炎症反应相关的表观遗传学标记,揭示DNA甲基化在乳腺炎感染过程中发挥作用的分子机制,为奶牛乳腺炎的分子育种和治疗提供新证据。主要研究结果如下:（1）根据体细胞数测定、血液学分析和细菌学鉴定等实验筛选6头半同胞配对的健康奶牛（HC组,n=3）和大肠杆菌感染的乳腺炎奶牛（MC组,n=3）作为实验奶牛。采用简化甲基化测序技术分析了血液嗜中性粒细胞全基因组甲基化模式,绘制了染色体范围的全基因组甲基化图谱。鉴定出两组样品中的基... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：129 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

牛血液分离的白细胞（85%PMN）的细胞离心涂片

图 1-3 亚硫酸盐测序原理[58]Fig. 1-3 The principle of bisulfite sequencin疫共沉淀技术（MeDIP）共沉淀技术，是利用甲基化胞嘧啶特异于染色体或全基因组分析（见图 1-4）审查整个基因组中的甲基化水平，用范围的 DNA 甲基化动态模式[60]。

图 1-3 亚硫酸盐测序原理[58]Fig. 1-3 The principle of bisulfite sequencing疫共沉淀技术（MeDIP）共沉淀技术，是利用甲基化胞嘧啶特异用于染色体或全基因组分析（见图 1-4）[以审查整个基因组中的甲基化水平，用于组范围的 DNA 甲基化动态模式[60]。

【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA甲基化在奶牛金黄色葡萄球菌性乳房炎中的调控[J]. 刘利,高雪,高会江,张路培,李俊雅,许尚忠.  畜牧兽医学报. 2012(10)

博士论文
[1]奶牛金葡菌乳房炎抗性的全基因组DNA甲基化表达调控及候选基因功能验证[D]. 宋敏艳.中国农业大学 2017



本文编号：3096817