IBV分离株GX-YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺免疫功能影响的研究
发布时间：2021-03-30 03:11
鸡传染性支气管炎（Infectious bronchitis, IB）是由冠状病毒鸡传染性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus, IBV）引起的一种急性高度接触传染性呼吸道疾病,给养禽业带来严重的经济损失。IBV是典型的嗜黏膜病原,主要通过呼吸道黏膜途径感染机体。黏膜免疫可诱导局部黏膜免疫和诱导全身免疫,在抗IBV感染免疫应答中发挥非常重要的作用。禽类的气管黏膜和哈德氏腺是黏膜免疫系统的重要组成部分,因此研究IBV感染对气管黏膜和哈德氏腺免疫功能的影响非常重要。本研究采用IBV广西分离株GX-YL5人工感染免疫鸡和非免疫鸡,应用实时荧光定量RT-PCR方法检测不同时相气管黏膜和哈德氏腺中与天然免疫相关的部分模式识别受体（TLR2、TLR3、TLR6和TLR7）和细胞因子（IFN-α、IFN-β、Mx、IL-6、 IL-10、IL-1β、MMP3、MIP-1β、CXCR4和CCR6）的mRNA转录水平与IBV病毒载量动态,同时使用ELISA检测气管黏膜和哈德氏腺分泌型免疫球蛋白A （sIgA）和血清IgG抗体,旨在从分子水平探究IBV对鸡气管黏膜和哈德氏腺...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
1.1 鸡传染性支气管炎病毒天然免疫研究概况
1.1.1 传染性支气管炎病毒
1.1.2 天然免疫
1.1.3 IBV感染的天然免疫应答研究进展
1.2 家禽黏膜免疫
1.2.1 家禽呼吸道黏膜免疫
1.2.2 家禽的哈德氏腺
1.2.3 鸡分泌型免疫球蛋白A
1.2.3.1 鸡分泌型免疫球蛋白A的结构
1.2.3.2 slgA的功能
1.2.3.3 slgA介导的黏膜免疫
1.3 实时荧光定量PCR
1.3.1 实时荧光定量PCR原理
1.3.2 实时荧光定量PCR定量方法
1.3.3 实时荧光定量PCR的应用
1.3.3.1 定性分析
1.3.3.2 病毒感染的定量监测
1.3.3.3 基因mRNA表达量分析
1.4 本课题的研究目的和意义
第二章 IBV GX-YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7 mRNA转录水平的影响
摘要
2.1 材料
2.1.1 实验动物和病毒
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 动物分组和攻毒
2.2.2 实验动物样品的采集和处理
2.2.3 RNA的抽提
2.2.4 RNA质量和浓度检测
2.2.5 反转录
2.2.6 Real-time PCR反应
2.2.7 数据统计和分析
2.3 结果
2.3.1 临床症状和剖检病理变化
2.3.2 RNA质量和浓度检测结果
2.3.3 气管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7mRNA转录水平
2.4 小结与讨论
第三章 IBV GX-YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺部分细胞因子mRNA转录水平的影响
摘要
3.1 材料
3.1.1 实验动物和病毒
3.1.2 主要试剂
3.1.3 主要仪器
3.2 方法
3.2.1 动物实验
3.2.2 实验动物样品的采集和处理
3.2.3 RNA的抽提
3.2.4 RNA质量和浓度检测
3.2.5 反转录
3.2.6 Real-time PCR反应
3.2.7 数据统计和分析
3.3 结果
3.3.1 气管黏膜和哈德氏腺细胞因子mRNA转录水平
3.4 小结与讨论
第四章 IBV GX-YL5感染鸡后不同时相气管黏膜和哈德氏腺IBV载量的变化动态
摘要
4.1 材料
4.1.1 实验动物和病毒
4.1.2 主要试剂
4.1.3 主要仪器
4.2 方法
4.2.1 动物实验
4.2.2 实验动物样品的采集和处理
4.2.3 RNA的抽提
4.2.4 RNA质量和浓度检测
4.2.5 反转录
4.2.6 Real-time PCR反应
4.2.7 数据统计和分析
4.3 结果
4.3.1 IBV感染鸡后气管黏膜和哈德氏腺病毒载量变化情况
4.4 小结与讨论
第五章 IBV GX-YL5感染鸡后不同时相气管洗液与哈德氏腺sIgA抗体和血清IgG抗体变化情况
摘要
5.1 材料
5.1.1 实验动物和病毒
5.1.2 主要试剂及配制
5.1.3 主要仪器
5.2 方法
5.2.1 动物实验
5.2.2 实验动物样品的采集和处理
5.2.3 sIgA抗体的检测
5.2.4 血清IgG抗体的检测
5.2.5 数据统计和分析
5.3 结果
5.3.1 攻毒后不同时相气管洗液sIgA浓度
5.3.2 攻毒后不同时相哈德氏腺sIgA浓度
5.3.3 攻毒后不同时相血清IgG抗体水平
5.4 小结与讨论
第六章 结论
参考文献
致谢
附录
个人简历
攻读学位期间发表论文情况及参加科研项目
本文编号：3108741
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：100 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
1.1 鸡传染性支气管炎病毒天然免疫研究概况
1.1.1 传染性支气管炎病毒
1.1.2 天然免疫
1.1.3 IBV感染的天然免疫应答研究进展
1.2 家禽黏膜免疫
1.2.1 家禽呼吸道黏膜免疫
1.2.2 家禽的哈德氏腺
1.2.3 鸡分泌型免疫球蛋白A
1.2.3.1 鸡分泌型免疫球蛋白A的结构
1.2.3.2 slgA的功能
1.2.3.3 slgA介导的黏膜免疫
1.3 实时荧光定量PCR
1.3.1 实时荧光定量PCR原理
1.3.2 实时荧光定量PCR定量方法
1.3.3 实时荧光定量PCR的应用
1.3.3.1 定性分析
1.3.3.2 病毒感染的定量监测
1.3.3.3 基因mRNA表达量分析
1.4 本课题的研究目的和意义
第二章 IBV GX-YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7 mRNA转录水平的影响
摘要
2.1 材料
2.1.1 实验动物和病毒
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.2 方法
2.2.1 动物分组和攻毒
2.2.2 实验动物样品的采集和处理
2.2.3 RNA的抽提
2.2.4 RNA质量和浓度检测
2.2.5 反转录
2.2.6 Real-time PCR反应
2.2.7 数据统计和分析
2.3 结果
2.3.1 临床症状和剖检病理变化
2.3.2 RNA质量和浓度检测结果
2.3.3 气管黏膜和哈德氏腺TLR2、TLR3、TLR6和TLR7mRNA转录水平
2.4 小结与讨论
第三章 IBV GX-YL5感染对鸡气管黏膜和哈德氏腺部分细胞因子mRNA转录水平的影响
摘要
3.1 材料
3.1.1 实验动物和病毒
3.1.2 主要试剂
3.1.3 主要仪器
3.2 方法
3.2.1 动物实验
3.2.2 实验动物样品的采集和处理
3.2.3 RNA的抽提
3.2.4 RNA质量和浓度检测
3.2.5 反转录
3.2.6 Real-time PCR反应
3.2.7 数据统计和分析
3.3 结果
3.3.1 气管黏膜和哈德氏腺细胞因子mRNA转录水平
3.4 小结与讨论
第四章 IBV GX-YL5感染鸡后不同时相气管黏膜和哈德氏腺IBV载量的变化动态
摘要
4.1 材料
4.1.1 实验动物和病毒
4.1.2 主要试剂
4.1.3 主要仪器
4.2 方法
4.2.1 动物实验
4.2.2 实验动物样品的采集和处理
4.2.3 RNA的抽提
4.2.4 RNA质量和浓度检测
4.2.5 反转录
4.2.6 Real-time PCR反应
4.2.7 数据统计和分析
4.3 结果
4.3.1 IBV感染鸡后气管黏膜和哈德氏腺病毒载量变化情况
4.4 小结与讨论
第五章 IBV GX-YL5感染鸡后不同时相气管洗液与哈德氏腺sIgA抗体和血清IgG抗体变化情况
摘要
5.1 材料
5.1.1 实验动物和病毒
5.1.2 主要试剂及配制
5.1.3 主要仪器
5.2 方法
5.2.1 动物实验
5.2.2 实验动物样品的采集和处理
5.2.3 sIgA抗体的检测
5.2.4 血清IgG抗体的检测
5.2.5 数据统计和分析
5.3 结果
5.3.1 攻毒后不同时相气管洗液sIgA浓度
5.3.2 攻毒后不同时相哈德氏腺sIgA浓度
5.3.3 攻毒后不同时相血清IgG抗体水平
5.4 小结与讨论
第六章 结论
参考文献
致谢
附录
个人简历
攻读学位期间发表论文情况及参加科研项目
本文编号：3108741
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