山羊胎盘滋养层细胞TET1基因对Wnt通路相关分子表达的影响
发布时间：2021-03-31 19:30
山羊生产中,胎盘早期的正常生长和发育是影响母畜繁殖性能及羔羊品质的关键因素。滋养层细胞是早期胎盘组织功能体现的主要成分之一,并且在胚胎附植、入侵子宫等过程中起着重要的调节作用。TET1（ten-eleven translocation 1）作为去甲基化主导作用的双加氧酶成员,在哺乳动物早期胎盘发育、胚胎着床、胎儿生长、基因组印记以及相关信号通路调控中具有普遍作用。同时,大量研究证实由Wnt分子启动的Wnt信号通路,广泛参与细胞命运决定、胎儿发育和胎盘形成等生命过程。所以,在哺乳动物胎盘发育过程中,两者的生理功能、调控位置和作用阶段都具有一定的相似性和同步性。但是,在山羊胎盘滋养层细胞（goat placental trophoblast cells,GTCs）的分化和发育过程中,TET1是否通过Wnt信号通路相关分子发挥调控作用,目前还没有相关报道。通过建立原代GTCs体外培养体系,过表达及shRNA干扰调节GTCs中TET1的表达,研究GTCs的活性和迁移能力,比较Wnt通路相关基因mRNA相对表达量,从转录表达途径上揭示GTCs中TET1对Wnt信号通路相关基因的调控作用,从而研究...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
经典Wnt/β-catenin信号通路（左）和非经典Wnt通路（右）
西南大学硕士学位论文将剪碎的组织块转入 90 cm2培养皿中，加入 0.1%胶原酶 I 溶液（组织︰胶原酶 I=1︰5），充分混匀，37℃恒温摇床 70 rpm 消化 40 min，中间可用移液枪离散混匀。培养皿中的组织与细胞混合物转入 15 mL 离心管中，1800 rpm 离心 5 min，弃上清。加入 20% FBS（无菌 PBS 配制）重悬沉淀，终止消化，1800 rpm 离心 5 min，弃上清。加入适量全培养液，用移液枪吹打使沉淀悬浮，将细胞和组织混合液均匀加至 25 cm2培养瓶中。每瓶加入 5 mL 全培养液，于 5% CO2、饱和湿度、37℃恒温培养箱中培养。2 d 后换液，去除掉悬浮在培养液中的红细胞和组织等。显微镜下观察细胞形态及生长状况。
图 4-4 RT-qPCR 分析 GTCs 中不同浓度 Dox 处理后 TET1 基因 mRNA 相对表达量.4-4 RT-qPCR of TET1 gene mRNA level in GTCs treated with different concentrations ofP<0.05，**P<0.01，下同*P<0.01, **P<0.01, the same as below
【参考文献】：
期刊论文
[1]用作交联剂的甲醛可改变细胞蛋白质谱[J]. 蒋绰,谢力琦,廖日晶,陈付学,吴嘉熙. 中国细胞生物学学报. 2016(08)
[2]Induction of CXC chemokines in human mesenchymal stem cells by stimulation with secreted frizzled-related proteins through non-canonical Wnt signaling[J]. David S Bischoff,Jian-Hua Zhu,Nalini S Makhijani,Dean T Yamaguchi. World Journal of Stem Cells. 2015(11)
[3]大足黑山羊胎盘子叶性状和结构及其与繁殖性能的相关性[J]. 罗南剑,管代禄,李黄琨,王燕,赵永聚. 中国兽医学报. 2015(08)
[4]TGF-β/BMP signaling and other molecular events: regulation of osteoblastogenesis and bone formation[J]. Md Shaifur Rahman,Naznin Akhtar,Hossen Mohammad Jamil,Rajat Suvra Banik,Sikder M Asaduzzaman. Bone Research. 2015(01)
[5]绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离培养与鉴定[J]. 王专家,张宇飞,刘淑英. 细胞与分子免疫学杂志. 2014(01)
[6]绵羊胎盘滋养层细胞的体外培养与鉴定[J]. 刘慧,刘淑英,刘丽珍,张宇飞. 中国兽医科学. 2012(03)
博士论文
[1]绵羊胎盘绒毛膜滋养层细胞中enJSRV囊膜蛋白的细胞生物学作用[D]. 张宇飞.内蒙古农业大学 2016
[2]苦马豆素诱导山羊胎盘滋养层细胞凋亡的信号转导通路研究[D]. 董峰.西北农林科技大学 2014
[3]1.Doxycycline诱导细胞凋亡及其机制 2.GDNF修饰的人羊膜上皮细胞在大鼠MCAO模型中的治疗作用[D]. 武家才.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） 2006
硕士论文
[1]山羊Tet1基因克隆及其在胎盘的表达谱[D]. 熊小燕.西南大学 2016
本文编号：3111957
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
经典Wnt/β-catenin信号通路（左）和非经典Wnt通路（右）
西南大学硕士学位论文将剪碎的组织块转入 90 cm2培养皿中，加入 0.1%胶原酶 I 溶液（组织︰胶原酶 I=1︰5），充分混匀，37℃恒温摇床 70 rpm 消化 40 min，中间可用移液枪离散混匀。培养皿中的组织与细胞混合物转入 15 mL 离心管中，1800 rpm 离心 5 min，弃上清。加入 20% FBS（无菌 PBS 配制）重悬沉淀，终止消化，1800 rpm 离心 5 min，弃上清。加入适量全培养液，用移液枪吹打使沉淀悬浮，将细胞和组织混合液均匀加至 25 cm2培养瓶中。每瓶加入 5 mL 全培养液，于 5% CO2、饱和湿度、37℃恒温培养箱中培养。2 d 后换液，去除掉悬浮在培养液中的红细胞和组织等。显微镜下观察细胞形态及生长状况。
图 4-4 RT-qPCR 分析 GTCs 中不同浓度 Dox 处理后 TET1 基因 mRNA 相对表达量.4-4 RT-qPCR of TET1 gene mRNA level in GTCs treated with different concentrations ofP<0.05，**P<0.01，下同*P<0.01, **P<0.01, the same as below
【参考文献】：
期刊论文
[1]用作交联剂的甲醛可改变细胞蛋白质谱[J]. 蒋绰,谢力琦,廖日晶,陈付学,吴嘉熙. 中国细胞生物学学报. 2016(08)
[2]Induction of CXC chemokines in human mesenchymal stem cells by stimulation with secreted frizzled-related proteins through non-canonical Wnt signaling[J]. David S Bischoff,Jian-Hua Zhu,Nalini S Makhijani,Dean T Yamaguchi. World Journal of Stem Cells. 2015(11)
[3]大足黑山羊胎盘子叶性状和结构及其与繁殖性能的相关性[J]. 罗南剑,管代禄,李黄琨,王燕,赵永聚. 中国兽医学报. 2015(08)
[4]TGF-β/BMP signaling and other molecular events: regulation of osteoblastogenesis and bone formation[J]. Md Shaifur Rahman,Naznin Akhtar,Hossen Mohammad Jamil,Rajat Suvra Banik,Sikder M Asaduzzaman. Bone Research. 2015(01)
[5]绵羊多核绒毛膜滋养层细胞的分离培养与鉴定[J]. 王专家,张宇飞,刘淑英. 细胞与分子免疫学杂志. 2014(01)
[6]绵羊胎盘滋养层细胞的体外培养与鉴定[J]. 刘慧,刘淑英,刘丽珍,张宇飞. 中国兽医科学. 2012(03)
博士论文
[1]绵羊胎盘绒毛膜滋养层细胞中enJSRV囊膜蛋白的细胞生物学作用[D]. 张宇飞.内蒙古农业大学 2016
[2]苦马豆素诱导山羊胎盘滋养层细胞凋亡的信号转导通路研究[D]. 董峰.西北农林科技大学 2014
[3]1.Doxycycline诱导细胞凋亡及其机制 2.GDNF修饰的人羊膜上皮细胞在大鼠MCAO模型中的治疗作用[D]. 武家才.中国科学院研究生院（上海生命科学研究院） 2006
硕士论文
[1]山羊Tet1基因克隆及其在胎盘的表达谱[D]. 熊小燕.西南大学 2016
本文编号：3111957
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