外源重组Wnt3a蛋白对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞数量及分泌活性影响的研究
发布时间：2021-04-07 11:47
奶牛的乳腺组织具有合成及分泌乳汁的特殊功能，而这一功能是由乳腺上皮细胞来完成的，上皮细胞的数量及其分泌活性直接影响到奶牛的产奶量。奶牛的乳腺组织具有重塑的功能，伴随着泌乳周期周而复始的变化，不断的进行退化和重塑。如果在乳腺组织重塑的过程中，能够使具有泌乳功能的上皮细胞的数量在有限的空间内增加更多，活性更强，那么对乳产量具有重要的意义。有研究证明成年小鼠乳腺中含有对Wnt蛋白敏感的细胞群，这一细胞群中含有丰富的乳腺干细胞，并证实了Wnt3a蛋白对乳腺干细胞集落的形成有明显的促进作用，维持了其形成功能性腺体的功能。推测，Wnt通路的激活可以促进奶牛乳腺上皮细胞的增殖。本实验以健康奶牛乳腺组织为原材料，组织块培养方法进行细胞培养，用倒置显微镜对培养的细胞进行观察。结果发现，组织块培养至3-4天有成纤维细胞长出，6天左右有鹅卵石样和铺路石样上皮细胞长出，细胞核大而明显，有2至4个核仁，细胞间隔紧密。细胞培养液中β-酪蛋白提取方法的改进。因所培养的细胞为原代单层贴壁细胞，细胞数量有限，故培养液中上皮细胞分泌物的量很少，不易检测。本实验中采用了四种蛋白提取方法对细胞培养液中的β-酪蛋白进行提取，并...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
奶牛乳腺上皮细胞Fig.1bovinemammaryepithelialcellsa.培养至4d，成纤维细胞（裸箭头）长出，细胞间隙较大；b.7d时成纤维细胞和上皮细胞
河北农业大学硕士学位（毕业）论文-酪蛋白的提取及鉴定western-blot 鉴定结果发现，在接近 25KD小为 24kDa，表明细胞培养液中却有 β-酪这些上皮细胞具有正常分泌乳汁的功能袋浓缩法提取出 β-酪蛋白，冷冻干燥法，而采用调节温度和 pH 方法得到的提可初步确定，通过采用温度结合 β-酪蛋更好。
图 3 细胞生长曲线Fig.3 Growth curve of BMEC牛乳腺上皮细胞活性的影响 Western-blot 结果用 ImageJ 软件进行分析，合可以看出第一组和第二组 β-酪蛋白的量无而第四组 β-酪蛋白的量明显多于其他组的量活性无显著影响；25ng/mLWnt3a 蛋白刺激乳；而 50ng/mL 的 Wnt3a 蛋白作用于细胞，使
【参考文献】：
期刊论文
[1]卷曲蛋白在肿瘤中的研究进展[J]. 沈艳,李孝生. 检验医学与临床. 2013(06)
[2]卷曲蛋白受体与肿瘤的研究进展[J]. 陈星星,贺修胜,卢小敏. 现代生物医学进展. 2013(07)
[3]大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳性能的影响[J]. 穆莹,江连洲. 中国畜牧兽医. 2013(01)
[4]牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估[J]. 王子东,苏建国,段彪,杨春荣,高广琦,康峰,张荣芳,胡晓明,扈廷茂,李光鹏. 生物技术通报. 2012(11)
[5]蛋氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞泌乳能力的影响[J]. 王佳丽,高学军,李庆章,黄建国,陆黎敏,乔彬,潘洪宝. 乳业科学与技术. 2012(01)
[6]牛乳腺上皮细胞体外分离和培养[J]. 弓超,王凌云,周欢敏. 动物医学进展. 2011(07)
[7]利用子宫内胚胎电转技术研究Frizzled 10在大脑皮质发育中的功能[J]. 刘斌,顾小春. 东南大学学报(医学版). 2011(03)
[8]中药王不留行对奶牛乳腺细胞增殖及泌乳的影响[J]. 李楠,高学军,关力. 中国畜牧兽医. 2011(06)
[9]Wnt1和Frizzled2在性成熟前小鼠卵巢组织定位及配受体关系鉴定[J]. 庞训胜,林春联,许雪萍,王正朝. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2011(03)
[10]成骨细胞中经典Wnt/β-catenin通路研究进展[J]. 许兵,刘慧,许应星,吴岩,肖鲁伟,童培建. 生命科学. 2011(05)
博士论文
[1]Wnt/β-Catenin信号通路相关基因在胰腺导管腺癌发生中的作用研究[D]. 王伟.第二军医大学 2011
[2]牛乳腺上皮细胞永生化及其多能性的研究[D]. 李吉霞.西北农林科技大学 2010
硕士论文
[1]奶牛乳腺上皮细胞系的建立及生理功能鉴定[D]. 李艳.扬州大学 2011
[2]β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响[D]. 王莉.南京农业大学 2010
[3]日本血吸虫Frizzled家族受体的克隆、表达及其生物学功能分析[D]. 王孝波.中国农业科学院 2010
[4]Wnt通路关键基因在绒山羊绒毛生长一个周期中的表达研究[D]. 刘维.内蒙古农业大学 2010
[5]荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞体外培养体系的建立[D]. 于婷.山东师范大学 2009
[6]P65、β-catenin表达在乳腺癌发生发展中的作用研究[D]. 邱霞.浙江大学 2006
本文编号：3123434
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：49 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
奶牛乳腺上皮细胞Fig.1bovinemammaryepithelialcellsa.培养至4d，成纤维细胞（裸箭头）长出，细胞间隙较大；b.7d时成纤维细胞和上皮细胞
河北农业大学硕士学位（毕业）论文-酪蛋白的提取及鉴定western-blot 鉴定结果发现，在接近 25KD小为 24kDa，表明细胞培养液中却有 β-酪这些上皮细胞具有正常分泌乳汁的功能袋浓缩法提取出 β-酪蛋白，冷冻干燥法，而采用调节温度和 pH 方法得到的提可初步确定，通过采用温度结合 β-酪蛋更好。
图 3 细胞生长曲线Fig.3 Growth curve of BMEC牛乳腺上皮细胞活性的影响 Western-blot 结果用 ImageJ 软件进行分析，合可以看出第一组和第二组 β-酪蛋白的量无而第四组 β-酪蛋白的量明显多于其他组的量活性无显著影响；25ng/mLWnt3a 蛋白刺激乳；而 50ng/mL 的 Wnt3a 蛋白作用于细胞，使
【参考文献】：
期刊论文
[1]卷曲蛋白在肿瘤中的研究进展[J]. 沈艳,李孝生. 检验医学与临床. 2013(06)
[2]卷曲蛋白受体与肿瘤的研究进展[J]. 陈星星,贺修胜,卢小敏. 现代生物医学进展. 2013(07)
[3]大豆异黄酮对奶牛乳腺上皮细胞增殖及泌乳性能的影响[J]. 穆莹,江连洲. 中国畜牧兽医. 2013(01)
[4]牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估[J]. 王子东,苏建国,段彪,杨春荣,高广琦,康峰,张荣芳,胡晓明,扈廷茂,李光鹏. 生物技术通报. 2012(11)
[5]蛋氨酸对体外培养奶牛乳腺上皮细胞泌乳能力的影响[J]. 王佳丽,高学军,李庆章,黄建国,陆黎敏,乔彬,潘洪宝. 乳业科学与技术. 2012(01)
[6]牛乳腺上皮细胞体外分离和培养[J]. 弓超,王凌云,周欢敏. 动物医学进展. 2011(07)
[7]利用子宫内胚胎电转技术研究Frizzled 10在大脑皮质发育中的功能[J]. 刘斌,顾小春. 东南大学学报(医学版). 2011(03)
[8]中药王不留行对奶牛乳腺细胞增殖及泌乳的影响[J]. 李楠,高学军,关力. 中国畜牧兽医. 2011(06)
[9]Wnt1和Frizzled2在性成熟前小鼠卵巢组织定位及配受体关系鉴定[J]. 庞训胜,林春联,许雪萍,王正朝. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2011(03)
[10]成骨细胞中经典Wnt/β-catenin通路研究进展[J]. 许兵,刘慧,许应星,吴岩,肖鲁伟,童培建. 生命科学. 2011(05)
博士论文
[1]Wnt/β-Catenin信号通路相关基因在胰腺导管腺癌发生中的作用研究[D]. 王伟.第二军医大学 2011
[2]牛乳腺上皮细胞永生化及其多能性的研究[D]. 李吉霞.西北农林科技大学 2010
硕士论文
[1]奶牛乳腺上皮细胞系的建立及生理功能鉴定[D]. 李艳.扬州大学 2011
[2]β-catenin在猪卵巢组织中的表达以及对猪卵巢颗粒细胞凋亡及类固醇生成酶的影响[D]. 王莉.南京农业大学 2010
[3]日本血吸虫Frizzled家族受体的克隆、表达及其生物学功能分析[D]. 王孝波.中国农业科学院 2010
[4]Wnt通路关键基因在绒山羊绒毛生长一个周期中的表达研究[D]. 刘维.内蒙古农业大学 2010
[5]荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞体外培养体系的建立[D]. 于婷.山东师范大学 2009
[6]P65、β-catenin表达在乳腺癌发生发展中的作用研究[D]. 邱霞.浙江大学 2006
本文编号：3123434
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