热应激对小鼠C2C12成肌细胞硒蛋白表达的影响及硒源缓解热应激的机制研究
发布时间：2021-04-08 21:02
本研究拟以小鼠肌肉C2C12细胞系为研究材料,构建骨骼肌细胞热应激模型,通过两个试验:1)考察热应激对小鼠肌肉C2C12细胞分化的影响,并考察在此过程中硒蛋白表达的变化;2)比较两种不同硒源对小鼠肌肉C2C12热应激的缓解效应并探索其可能机制。主要内容及结果如下:实验一:热应激对小鼠C2C12成肌细胞分化及硒蛋白表达的影响。选择小鼠C2C12成肌细胞作为试验材料,构建肌肉细胞热应激模型,考察热应激对小鼠C2C12成肌细胞分化的影响,同时考察硒蛋白表达的变化。采用单因子试验设计:C2C12细胞首先于37 oC二氧化碳培养箱中培养23 d至铺板率达到80%;然后分成2组进行成肌分化诱导:对照组于37.0 oC培养4、6、8 d;热应激组于41.5oC培养4、6、8 d,采用定量PCR技术考察24个硒蛋白基因、2个分化相关基因、2个能量调控基因和2个凋亡基因表达,采用Western-blot考察了HSP70、MYOGENIN蛋白及5个硒蛋白的表达。研究结果表明:（1）热应激抑制了C2C12细胞分化和损伤了...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
2C12细胞分化模式图
技术路线图
图 3 显微镜观察热应激对 C2C12 细胞分化的影响Fig.3 Microscope inspection of the myogenic differentiated C2C12 cells subject to HS.4.2 热应激对热休克蛋白 70 及分化相关基因表达的影响热应激抑制成肌细胞 C2C12 分化为肌管，这可能是改变了分化相关基因表达所引起。考察了热应激对 HSP70 和 4 个分化相关基因（AMPKα1、AMPKα2、MYOD、MYOGENIN）在 C2C12 细胞分化各个阶段的影响，结果见图 4。由图中可见热应激显著上调了（P＜0.01）C2C12 细胞 HSP70 mRNA 表达，下调了（P＜0.01）C2C12 细胞 MYOD 和 MYOGENIN mRNA 表达量。AMPKα1 和 AMPKα2显示出 3 种表达模式：在热应激处理 4 d AMPKα1 和 AMPKα2 mRNA 表达显著（P < 0.05 or 0.01）上调；在热应激处理 6 d 表达无差异（P > 0.05）；而在热应激处理 8 d AMPKα2 mRNA 表达显著（P < 0.05）下调。
【参考文献】：
期刊论文
[1]黑龙江省土壤硒分布及其影响因素研究[J]. 迟凤琴,徐强,匡恩俊,张久明,魏丹,宿庆瑞,韩锦泽. 土壤学报. 2016(05)
[2]富硒女贞子对热应激小鼠内分泌及免疫功能的影响[J]. 陈静,李丹丹,邹慧,劳雪芬,曹铮,许小琴. 畜牧与兽医. 2015(06)
[3]有机硒、无机硒、VE单独使用及有机硒与VE联用对大鼠体内抗氧化能力的影响[J]. 姚昭,李红艳,张云龙,邓泽元. 食品科学. 2013(15)
[4]宰前热应激对肉鸡胸肉氧化损伤和蛋白质功能特性的影响[J]. 潘晓建,彭增起,周光宏,于纪棉,鲍恩东. 中国农业科学. 2008(06)
[5]不同硒源对肥育猪鲜肉肉色和滴水损失的影响[J]. 占秀安,许梓荣. 畜牧兽医学报. 2004(05)
硕士论文
[1]热应激对猪肠道IPEC-J2细胞硒蛋白表达的影响及不同硒源缓解热应激机制的研究[D]. 曹蕾.四川农业大学 2017
[2]日粮硒缺乏对肉鸡硒蛋白基因及胰岛素信号相关基因表达的影响[D]. 许敬洋.四川农业大学 2016
[3]硒蛋白K对T淋巴细胞免疫应答影响的研究[D]. 李瑞敏.深圳大学 2015
[4]超营养剂量硒对肉鸡硒蛋白基因及胰岛素信号相关基因表达的影响[D]. 黄晓凤.四川农业大学 2015
[5]富硒益生菌对高温条件下仔猪生产性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响[D]. 吕晨辉.南京农业大学 2013
[6]母种猪补充不同硒源对后代乳猪生长性能的影响及作用机理的探讨[D]. 李星.浙江大学 2009
[7]有机硒和维生素E对地方杂交鸡抗氧化和抗热应激性能的影响[D]. 刘风民.山东农业大学 2004
本文编号：3126270
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：70 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
2C12细胞分化模式图
技术路线图
图 3 显微镜观察热应激对 C2C12 细胞分化的影响Fig.3 Microscope inspection of the myogenic differentiated C2C12 cells subject to HS.4.2 热应激对热休克蛋白 70 及分化相关基因表达的影响热应激抑制成肌细胞 C2C12 分化为肌管，这可能是改变了分化相关基因表达所引起。考察了热应激对 HSP70 和 4 个分化相关基因（AMPKα1、AMPKα2、MYOD、MYOGENIN）在 C2C12 细胞分化各个阶段的影响，结果见图 4。由图中可见热应激显著上调了（P＜0.01）C2C12 细胞 HSP70 mRNA 表达，下调了（P＜0.01）C2C12 细胞 MYOD 和 MYOGENIN mRNA 表达量。AMPKα1 和 AMPKα2显示出 3 种表达模式：在热应激处理 4 d AMPKα1 和 AMPKα2 mRNA 表达显著（P < 0.05 or 0.01）上调；在热应激处理 6 d 表达无差异（P > 0.05）；而在热应激处理 8 d AMPKα2 mRNA 表达显著（P < 0.05）下调。
【参考文献】：
期刊论文
[1]黑龙江省土壤硒分布及其影响因素研究[J]. 迟凤琴,徐强,匡恩俊,张久明,魏丹,宿庆瑞,韩锦泽. 土壤学报. 2016(05)
[2]富硒女贞子对热应激小鼠内分泌及免疫功能的影响[J]. 陈静,李丹丹,邹慧,劳雪芬,曹铮,许小琴. 畜牧与兽医. 2015(06)
[3]有机硒、无机硒、VE单独使用及有机硒与VE联用对大鼠体内抗氧化能力的影响[J]. 姚昭,李红艳,张云龙,邓泽元. 食品科学. 2013(15)
[4]宰前热应激对肉鸡胸肉氧化损伤和蛋白质功能特性的影响[J]. 潘晓建,彭增起,周光宏,于纪棉,鲍恩东. 中国农业科学. 2008(06)
[5]不同硒源对肥育猪鲜肉肉色和滴水损失的影响[J]. 占秀安,许梓荣. 畜牧兽医学报. 2004(05)
硕士论文
[1]热应激对猪肠道IPEC-J2细胞硒蛋白表达的影响及不同硒源缓解热应激机制的研究[D]. 曹蕾.四川农业大学 2017
[2]日粮硒缺乏对肉鸡硒蛋白基因及胰岛素信号相关基因表达的影响[D]. 许敬洋.四川农业大学 2016
[3]硒蛋白K对T淋巴细胞免疫应答影响的研究[D]. 李瑞敏.深圳大学 2015
[4]超营养剂量硒对肉鸡硒蛋白基因及胰岛素信号相关基因表达的影响[D]. 黄晓凤.四川农业大学 2015
[5]富硒益生菌对高温条件下仔猪生产性能、抗氧化能力和肠道菌群的影响[D]. 吕晨辉.南京农业大学 2013
[6]母种猪补充不同硒源对后代乳猪生长性能的影响及作用机理的探讨[D]. 李星.浙江大学 2009
[7]有机硒和维生素E对地方杂交鸡抗氧化和抗热应激性能的影响[D]. 刘风民.山东农业大学 2004
本文编号：3126270
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