H9N2亚型禽流感病毒的分离及其HA基因的遗传变异分析
发布时间：2021-04-09 15:46
H9N2亚型禽流感在全世界广泛流行，给养殖业带来了巨大的经济损失。该亚型最初只在禽类中传播，后来人们发现它也可以直接感染哺乳动物，具有重要的公共卫生学意义。本研究通过对H9N2亚型禽流感病毒的分离、HA基因的克隆及遗传变异分析，以了解近年来H9N2亚型禽流感病毒的变异规律，主要获得以下成果：1、从河南洛阳、陕西咸阳地区的养殖场，临床疑似禽流感发病的鸡群中采集病料，通过鸡胚接种传代，血凝试验和RT-PCR鉴定的方法，先后分离到5株H9N2亚型禽流感病毒，分别命名为LY35、LY36、LY48、LY49、XY。2、参照GenBank中收录的HA基因序列，合成两对引物，采用RT-PCR法扩增LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因，经克隆测序后，进行序列拼接，获得这两株病毒的全长HA基因序列并上传到Genbank，登陆号分别为KF638574、KF638575。3、运用DNAStar软件将LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因序列与Genbank收录的参考毒株进行比对分析，并用MEGA6软件绘制系统进化树。结果表明，LY36、XY株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸同源性为97...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
AIV结构图（引自Leeetal,2009）
保护遗传物质防止 RNA 酶的降解。M1 蛋白形成基质膜，紧层膜内侧，不仅用来保护核衣壳，也用来支撑和维持病毒的外观形态。病种放射性的纤突：棒状三聚体血凝素 HA 和蘑菇型四聚体神经氨酸酶 NA蛋白具有型特异性。其结构如图 1-1 所示。禽流感病毒的复制流感病毒的复制和大多数的病毒一样，都是经过吸附和穿入、脱壳、装配几个步骤，其过程如图 1-2 所示。
（2）LY36：洛阳市肉鸡，40 日龄，7000 只，2013 年 1 月发病。发病第 5 天，每天死亡 30~50 只；大肠杆菌，支原体并发；未注射过流感疫苗；腺胃乳头出血；出血有黏液，初步诊断可能存在流感感染。（3）LY48：洛阳市白羽蛋鸡，360 日龄，2000 只，2013 年 1 月发病。发病第 4 均每天死亡 4~9 只；最近 3 个月内，未过注射流感疫苗。剖检可见腺胃有典型的出，输卵管内有脓样分泌物，初步诊断为禽流感。（4）LY49：洛阳市蛋鸡，70 日龄，约 1000 只，2013 年 1 月发病。每天死亡数 10 只发展为 40 只，越来越多，周边也出现此情况，病情日益严重，不断扩散。病神沉郁，剖检可见腺胃出血，初步诊断为禽流感。（5）XY：咸阳蛋鸡，35 日龄，约 15 000 只，18 日龄开始发病，每天死亡 40。病鸡精神差，呼吸困难；剖检可见肝脏肿大，有红色坏死点，个别呈青铜色；气浊，有黄色干酪物；包心；气管环有出血，略有黄白色黏液，个别鸡腺胃有出血点药情况：18 日龄时：百益康，清瘟败毒散，死亡略有下降；32 日龄时使用环丙沙杏石甘散，黄芪多糖，荆防败毒散，效果不大；35 日龄时用氟苯尼考，抗病毒药，连未见效果，初步诊断为病毒感染。
【参考文献】：
期刊论文
[1]青海湖地区5株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列进化分析[J]. 刘琳玉,姜双应,汪立杰,易虎,赵生仓,唐志坚,徐翠玲,董婕,高荣保,张烨,邹淑梅,李晓丹,杨磊,杨静,陈涛,舒跃龙. 病毒学报. 2014(02)
[2]两广地区2011-2012年H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进化分析[J]. 李广伟,严专强,廖昌韬,薛瑜,冀君,陈峰,马静云,毕英佐,谢青梅. 中国兽医学报. 2014(03)
[3]10株H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的序列分析[J]. 刘彦云,刘春国,王寿山,张超林,王伟,吕让,刘明. 中国畜牧兽医. 2013(08)
[4]H9N2亚型禽流感流行分析及疫苗毒株的筛选[J]. 刘东,宫晓,刘晓东,梁俊超,师东方. 中国动物检疫. 2013(06)
[5]山东地区16株H9N2亚型禽流感病毒HA基因的序列分析[J]. 武利利,刁有祥,鞠小军,于春梅,崔京腾. 病毒学报. 2012(03)
[6]H9N2亚型禽流感病毒基因组的遗传进化分析[J]. 李树纯,李心海,仲书官,孙化露,潘金金,陈素娟,彭大新,刘秀梵. 病毒学报. 2012(01)
[7]Preparation of Anti-Idiotypic Antibody against Avian Influenza Virus Subtype H9[J]. Baoquan Li~1 Jun Peng~1 Zhongxiang Niu~(1,2) Xunhe Yin~1 Faxiao Liu~1 ~1College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an,China;. Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)
[8]全球禽流感的流行形势[J]. 甘孟侯. 中国预防兽医学报. 2004(06)
[9]禽流感病毒分子生物学研究进展[J]. 金元昌,李景鹏,张龙,孙岳,于敏,杨甲芳. 动物医学进展. 2003(01)
[10]我国禽流感防制研究进展[J]. 于康震,付朝阳,崔尚金,步志高,唐秀英. 中国兽医学报. 2001(01)
硕士论文
[1]广西马源H9N2亚型流感病毒的分离鉴定与全基因组序列分析[D]. 何奇松.广西大学 2012
本文编号：3127890
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
AIV结构图（引自Leeetal,2009）
保护遗传物质防止 RNA 酶的降解。M1 蛋白形成基质膜，紧层膜内侧，不仅用来保护核衣壳，也用来支撑和维持病毒的外观形态。病种放射性的纤突：棒状三聚体血凝素 HA 和蘑菇型四聚体神经氨酸酶 NA蛋白具有型特异性。其结构如图 1-1 所示。禽流感病毒的复制流感病毒的复制和大多数的病毒一样，都是经过吸附和穿入、脱壳、装配几个步骤，其过程如图 1-2 所示。
（2）LY36：洛阳市肉鸡，40 日龄，7000 只，2013 年 1 月发病。发病第 5 天，每天死亡 30~50 只；大肠杆菌，支原体并发；未注射过流感疫苗；腺胃乳头出血；出血有黏液，初步诊断可能存在流感感染。（3）LY48：洛阳市白羽蛋鸡，360 日龄，2000 只，2013 年 1 月发病。发病第 4 均每天死亡 4~9 只；最近 3 个月内，未过注射流感疫苗。剖检可见腺胃有典型的出，输卵管内有脓样分泌物，初步诊断为禽流感。（4）LY49：洛阳市蛋鸡，70 日龄，约 1000 只，2013 年 1 月发病。每天死亡数 10 只发展为 40 只，越来越多，周边也出现此情况，病情日益严重，不断扩散。病神沉郁，剖检可见腺胃出血，初步诊断为禽流感。（5）XY：咸阳蛋鸡，35 日龄，约 15 000 只，18 日龄开始发病，每天死亡 40。病鸡精神差，呼吸困难；剖检可见肝脏肿大，有红色坏死点，个别呈青铜色；气浊，有黄色干酪物；包心；气管环有出血，略有黄白色黏液，个别鸡腺胃有出血点药情况：18 日龄时：百益康，清瘟败毒散，死亡略有下降；32 日龄时使用环丙沙杏石甘散，黄芪多糖，荆防败毒散，效果不大；35 日龄时用氟苯尼考，抗病毒药，连未见效果，初步诊断为病毒感染。
【参考文献】：
期刊论文
[1]青海湖地区5株H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列进化分析[J]. 刘琳玉,姜双应,汪立杰,易虎,赵生仓,唐志坚,徐翠玲,董婕,高荣保,张烨,邹淑梅,李晓丹,杨磊,杨静,陈涛,舒跃龙. 病毒学报. 2014(02)
[2]两广地区2011-2012年H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进化分析[J]. 李广伟,严专强,廖昌韬,薛瑜,冀君,陈峰,马静云,毕英佐,谢青梅. 中国兽医学报. 2014(03)
[3]10株H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因的序列分析[J]. 刘彦云,刘春国,王寿山,张超林,王伟,吕让,刘明. 中国畜牧兽医. 2013(08)
[4]H9N2亚型禽流感流行分析及疫苗毒株的筛选[J]. 刘东,宫晓,刘晓东,梁俊超,师东方. 中国动物检疫. 2013(06)
[5]山东地区16株H9N2亚型禽流感病毒HA基因的序列分析[J]. 武利利,刁有祥,鞠小军,于春梅,崔京腾. 病毒学报. 2012(03)
[6]H9N2亚型禽流感病毒基因组的遗传进化分析[J]. 李树纯,李心海,仲书官,孙化露,潘金金,陈素娟,彭大新,刘秀梵. 病毒学报. 2012(01)
[7]Preparation of Anti-Idiotypic Antibody against Avian Influenza Virus Subtype H9[J]. Baoquan Li~1 Jun Peng~1 Zhongxiang Niu~(1,2) Xunhe Yin~1 Faxiao Liu~1 ~1College of Animal Science and Technology,Shandong Agricultural University,Tai’an,China;. Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)
[8]全球禽流感的流行形势[J]. 甘孟侯. 中国预防兽医学报. 2004(06)
[9]禽流感病毒分子生物学研究进展[J]. 金元昌,李景鹏,张龙,孙岳,于敏,杨甲芳. 动物医学进展. 2003(01)
[10]我国禽流感防制研究进展[J]. 于康震,付朝阳,崔尚金,步志高,唐秀英. 中国兽医学报. 2001(01)
硕士论文
[1]广西马源H9N2亚型流感病毒的分离鉴定与全基因组序列分析[D]. 何奇松.广西大学 2012
本文编号：3127890
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