生长激素对原代鸡肝细胞差异表达基因的转录组分析

发布时间：2021-04-11 08:29

　　生长激素（GH）可通过调节动物体内三大营养物质代谢而影响动物体的生长发育，自GH被发现之后人们对GH的研究越来越多，其中关于在动物体内受GH调控的基因一直以来都是人们研究的重点。近年来，随着二代测序技术的发展成熟，人们将其应用于生物学研究的各个方面，其中转录组测序由于在研究基因表达情况等方面发挥着重要作用而引起了人们的重视。本研究使用改良型的两步胶原酶灌流法成功在四周龄AA白羽肉鸡中分离出了高活性的肝脏原代细胞，使用William’s E进行培养发现培养的细胞生长状态良好。在成功分离出鸡原代肝细胞后我们使用鸡生长激素（cGH）对其进行处理，发现GH处理鸡原代肝细胞的最佳时间是12²4h。同时对经GH处理不同时间后鸡原代肝细胞内相关基因的表达情况进行研究，发现在SOCS家族中的SOCS-2、3、4和CIS的表达量在GH处理后有显著上升，而所研究的几个HNF家族成员的表达量在GH处理后并没有发生显著变化。我们采用转录组测序的方法来进一步系统研究GH处理后鸡原代肝细胞中基因的表达情况。结果发现在GH处理组和对照组中共有164个差异表达基因。通过生物信息学分析表明差异基因... 

【文章来源】：苏州大学江苏省

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

GH引起的信号通路[43]

胞核发挥着重要作用，后来随着研究的不断深入人们发现除了酪氨酸外其它一些氨基酸的磷酸化对Stats调节转录也起到至关重要的作用，如Stat1和3的Ser727、Stat5a的Ser725、799和Stat5b的Ser730、710、193等[47, 49-51]。除了磷酸化外还有其它一些蛋白修饰形式也对Stats转录调节功能最大化起作用，如Stats蛋白N-端精氨酸(Arg)的甲基化可通过阻断Stats蛋白与PIAS蛋白的作用而增加转录效率，同时乙酰化也可以增加转录效率等[44, 52, 53]。

生长中起重要作用。另外，GH刺激下在细胞内发挥重要作用的因子IGF含量也受到JAK-Stat5的调控。在机体内JAK-Stats信号通路是受到严格的以免引起机体紊乱。有研究表明，持续激活的Stat5a和Stat5b可通过PPAR牛血清 (fetal calf serum，FBS)的情况下促进脂肪细胞分化[59]。在体-Stat5的负向调控主要是反馈抑制型的，即在细胞因子的刺激下促进某种达，而这种蛋白反过来又可以抑制信号通路，其中典型的例子就是SOC，SOCS家族成员可通过使JAKs失活、阻碍Stats接近受体结合位点以及使蛋白被蛋白酶体降解等多种途径来抑制信号通路[60-62]。近期又发现另外成纤维细胞生长因子21 (fibroblast growth factor，FGF21)也可通过反馈调来抑制JAK-Stats信号通路[63]。另外还有以下几种途径可以负向调控JAK通路：依赖于蛋白酪氨酸磷酸酶 (protein tyrosine phosphatase，PTP)的抑依赖于活化Stats蛋白抑制因子的抑制途径、依赖于泛素-蛋白酶体的蛋白和依赖于丝氨酸去磷酸化的抑制途径等[64]。

【参考文献】：
期刊论文
[1]动物GH/IGF-Ⅰ轴调控机制的研究进展[J]. 顾志良,王慧娟,郁建锋.  中国畜牧兽医. 2011(10)
[2]实时荧光定量PCR技术综述[J]. 邓文星,张映.  生物技术通报. 2007(05)
[3]鸡生长激素cDNA的克隆分析[J]. 李宁,邢宝东,戴茹娟,冯继东.  中国家禽. 1997(01)



本文编号：3130923