不同纤维直径的细毛羊皮肤组织中毛囊差异蛋白质双向电泳与质谱分析

发布时间：2021-04-13 15:47

　　本文以不同纤维直径的细毛羊皮肤组织中的毛囊作为实验材料，利用不同的提取方法，不同pH值的IPG胶条以及不同的上样量，探索适用于细毛羊皮肤组织的双向电泳体系，建立细毛羊皮肤组织的2-DE凝胶图谱，挖取差异明显的蛋白点进行质谱鉴定，鉴定肽指纹图谱并在数据库中比对，结合生物信息学知识分析这些差异蛋白与羊毛纤维直径的内在联系，这对提高羊毛品质具有重要的实际意义。本研究主要获得了以下结果：1.比较TCA沉淀法，酚抽提法以及TCA/丙酮法，得出TCA/丙酮法最适合细毛羊毛囊组织总蛋白质的提取。2.选择用pH3-10的IPG胶条分离皮肤组织中的毛囊总蛋白，摸索蛋白点主要集中的范围。实验中使用pH4-7，长度为18cm长的IPG线性胶条，这样有助于将皮肤组织中的毛囊总蛋白在2-DE图像上整体分布开。比较每根胶条样品上样量分别为80μL、100μL、120μL，最后选择上样量为100μL时图谱最清晰。上样量为100μL，选择18cm，pH4-7的线性IPG胶条，得到质量较好的双向凝胶电泳图谱。3.对两岁的超细型、细型细毛羊毛囊蛋白质2-DE凝胶图谱进行分析，检测出其中除差异点7、30、31、34、35出... 

【文章来源】：新疆农业大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

三种不同提取方法处理的双向电泳结果

30A 上样量80μL B 上样量100μL C 上样量120μLA Protein-loading amount 80μL B Protein-loading amount 100μL C Protein-loading amount 120μL图 3-2 不同上样量对双向电泳图谱的影响Fig 3-2 Comparison of 2-DE map from different loaded proteins

31A B图 3-3 不同 pH 范围的 IPG 胶条对双向电泳图谱的影响Fig 3-3 Comparison of 2-DE maps with two IPG strips with different gradients

【参考文献】：
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本文编号：3135578