山东省部分种鸡场死胚中沙门氏菌的鉴定及耐药特性研究
发布时间：2021-04-13 17:16
沙门氏菌病是由沙门氏菌属细菌引起的疾病总称。目前沙门氏菌病是全球家禽业面临的主要威胁。沙门氏菌属肠杆菌科,革兰氏阴性菌,家禽感染的沙门氏菌主要分为鸡白痢沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌等。肠炎沙门氏菌的感染不仅与养殖场的发病率和死亡率相关,甚至会引起人类的胃肠炎,每年因此死亡的人数达15万。鸡白痢沙门氏菌主要感染3周龄内的雏鸡,主要临床症状为排白色粪便,严重者可以造成脱水,甚至大规模死亡,成年鸡被感染后虽多为隐性带病,但会导致鸡场的受精率、产蛋率和孵化率显著下降,从而给养殖场造成严重的经济损失。为了解2019年山东省同一时期内9个种鸡场死胚中沙门氏菌的流行情况,研究其耐药基因、耐药表型的水平传递情况,本研究选择同一时期内9个种鸡场的18胚龄未出壳死胚（每个种鸡场90枚）用于评估2019年山东省种鸡场死胚中沙门氏菌的流行情况及危害预警。分别无菌采集810枚未出壳死胚的肝、脾和卵黄,混合研磨,进行前增菌、增菌和选择性培养基的鉴别培养,疑似菌落纯化后再经PCR方法以及微生物质谱鉴定等方法完成沙门氏菌分离株的鉴定。同时,本研究对所有沙门氏菌分离株进行了血清分型、MLST分...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
沙门氏菌形态结构图（ManojKumawatetal.,2020）
山东省部分种鸡场死胚中沙门氏菌的鉴定及耐药特性研究30百日鸡场死胚中沙门氏菌阳性率次之为51.11%（46/90）。表3-19个种鸡场沙门氏菌的分离情况统计表Table3-1ThestatisticaltableofSalmonellaisolatesinninefarms编号鸡品种阳性率1百日鸡51.11%（46/90）2绿壳蛋鸡17.78%（16/90）3琅琊鸡26.67%（24/90）4芦花鸡85.56%（77/90）5青脚麻鸡0%（0/90）6青脚麻鸡15.56%（14/90）7白羽肉鸡0%（0/90）8白羽肉鸡0%（0/90）9白羽肉鸡0%（0/90）3.1.1山东省5个阳性鸡场沙门氏菌的培养特性分离自阳性鸡场的沙门氏菌在XLD培养基上的菌落形态（如图2所示），一种表现为黑色，光滑，外周有一圈透明带的圆形菌落；另一种表现为无色、透明的小菌落。另外沙门氏菌在半固体培养基上的形态（如图3所示），一种在半固体培养基上长鞭毛，其他沙门氏菌则会长出白色的鞭毛，而另外一种在半固体培养基上不长鞭毛。图2沙门氏菌在XLD培养基上的培养特性Fig.2SalmonellaintheXLDmedium
山东农业大学硕士学位论文31图3沙门氏菌在LB培养基上的培养特性Fig.3SalmonellaintheLBmedium3.1.2山东省5个阳性鸡场沙门氏菌的PCR鉴定结果PCR检测沙门氏菌的invA基因，检测结果发现810个样品中，共检出177个invA阳性样品。部分PCR鉴定结果见图4。invA结果显示为大约331bp的特异性条带，结果与目的条带相符合。结果表明，种鸡场死胚中沙门氏菌阳性率为55.6（5/9），本次死胚中沙门氏菌分离率为21.85%（177/810）。*泳道1-23为疑似沙门氏菌阳性样本泳道，泳道-为阴性对照，泳道+为阳性对照，M为DL2000DNAMarker*Lane1-23isasuspectedsalmonellapositivesamplelane,lane-isanegativecontrol,lane+isapositivecontrol,MisDL2000DNAMarker图4沙门氏菌invA基因扩增结果Fig.4PCRamplificationofinvAgene3.1.3山东省5个阳性鸡场沙门氏菌的质谱鉴定结果结果表明，单菌落的质谱鉴定结果显示为沙门氏菌，Log(score)=2.198。177株沙门氏菌的质谱鉴定结果与3.1.2中PCR鉴定结果100%吻合。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡沙门氏菌病的综合防治[J]. 朱明轩,李宏喜. 今日畜牧兽医. 2019(10)
[2]2008—2017年我国部分地区禽源沙门氏菌流行状况及耐药分析[J]. 赵建梅,李月华,张青青,赵格,王娟,刘娜,黄秀梅,王君玮,曲志娜. 中国动物检疫. 2019(08)
[3]广东省中山市2017年沙门菌耐药菌谱及分子分型分析[J]. 袁展红,郑悦康,刘绮明,区金结,仇绮琳,叶志英. 中国热带医学. 2019(05)
[4]浅谈鸡白痢病的综合防治技术[J]. 张忠赞,匡加聪,张志川,郭兆廷,李佳赟. 畜禽业. 2019(04)
[5]内蒙古呼和浩特地区鸡源沙门氏菌分离鉴定、血清学鉴定及耐药性研究[J]. 高瑞霞,滕贇,张彦斌,卜红宇,岳佳,崔生辉,周刚. 食品安全质量检测学报. 2019(06)
[6]一株食源性伤寒沙门氏菌的多重耐药性分析与小鼠致病性研究[J]. 赵翔,刘东,潘金金,袁飞. 中国动物检疫. 2018(11)
[7]2016年江苏省沙门氏菌血清型的分布、耐药状况及相关基因研究[J]. 沈赟,秦思,唐震. 南京医科大学学报(自然科学版). 2018(09)
[8]山东地区屠宰场猪肉污染沙门氏菌菌株毒力基因筛查与ERIC-PCR分型[J]. 黄秀梅,张倩,盖文燕,曲志娜,李晨阳,赵思俊,赵建梅,赵格,李月华,王玉东,王君玮,王娟. 中国人兽共患病学报. 2018(08)
[9]三黄种鸡场孵化死胚中沙门菌的分离鉴定与耐药性分析[J]. 徐耀辉,邓同炜,齐亚如,韩文龙,卢建洲,蒋增海. 畜牧兽医学报. 2018(05)
[10]食源性致病菌耐药机制研究进展[J]. 赵勇,李欢,张昭寰,刘海泉,潘迎捷. 生物加工过程. 2018(02)
博士论文
[1]基于荧光微球的食源性致病菌免疫检测方法的建立及评价[D]. 李倩茹.华南理工大学 2018
[2]华中地区三种畜禽病原菌耐药和毒力的流行性及分子特征研究[D]. 匡秀华.华中农业大学 2015
硕士论文
[1]2017-2018年华东地区禽源沙门菌的流行病学调查及基于鸡白痢沙门菌LPS间接ELISA检测方法的建立[D]. 胡建乐.扬州大学 2019
[2]种鸡场沙门氏菌感染状况的调查与防控[D]. 郭龙宗.山东农业大学 2017
[3]我国部分地区种鸡场沙门菌流行现状调查、耐药性分析及分子分型[D]. 费晓.扬州大学 2017
[4]扬州地区部分屠宰场、农贸市场和动物医院猪源沙门菌分离鉴定、耐药性分析及致病性研究[D]. 印广浩.扬州大学 2016
[5]动物源沙门氏菌耐药基因及毒力岛基因mgtC和sopB的检测[D]. 欧阳本.安徽农业大学 2013
[6]华东地区鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定、分子流行病学及致病性研究[D]. 查华.扬州大学 2013
[7]四川主要肉品生产链中沙门氏菌的分离鉴定、耐药性分析及PFGE分型[D]. 侯小刚.四川农业大学 2012
[8]基于SEF14菌毛的肠炎沙门氏菌特异性诊断方法的建立及应用[D]. 段小丽.扬州大学 2012
本文编号：3135700
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
沙门氏菌形态结构图（ManojKumawatetal.,2020）
山东省部分种鸡场死胚中沙门氏菌的鉴定及耐药特性研究30百日鸡场死胚中沙门氏菌阳性率次之为51.11%（46/90）。表3-19个种鸡场沙门氏菌的分离情况统计表Table3-1ThestatisticaltableofSalmonellaisolatesinninefarms编号鸡品种阳性率1百日鸡51.11%（46/90）2绿壳蛋鸡17.78%（16/90）3琅琊鸡26.67%（24/90）4芦花鸡85.56%（77/90）5青脚麻鸡0%（0/90）6青脚麻鸡15.56%（14/90）7白羽肉鸡0%（0/90）8白羽肉鸡0%（0/90）9白羽肉鸡0%（0/90）3.1.1山东省5个阳性鸡场沙门氏菌的培养特性分离自阳性鸡场的沙门氏菌在XLD培养基上的菌落形态（如图2所示），一种表现为黑色，光滑，外周有一圈透明带的圆形菌落；另一种表现为无色、透明的小菌落。另外沙门氏菌在半固体培养基上的形态（如图3所示），一种在半固体培养基上长鞭毛，其他沙门氏菌则会长出白色的鞭毛，而另外一种在半固体培养基上不长鞭毛。图2沙门氏菌在XLD培养基上的培养特性Fig.2SalmonellaintheXLDmedium
山东农业大学硕士学位论文31图3沙门氏菌在LB培养基上的培养特性Fig.3SalmonellaintheLBmedium3.1.2山东省5个阳性鸡场沙门氏菌的PCR鉴定结果PCR检测沙门氏菌的invA基因，检测结果发现810个样品中，共检出177个invA阳性样品。部分PCR鉴定结果见图4。invA结果显示为大约331bp的特异性条带，结果与目的条带相符合。结果表明，种鸡场死胚中沙门氏菌阳性率为55.6（5/9），本次死胚中沙门氏菌分离率为21.85%（177/810）。*泳道1-23为疑似沙门氏菌阳性样本泳道，泳道-为阴性对照，泳道+为阳性对照，M为DL2000DNAMarker*Lane1-23isasuspectedsalmonellapositivesamplelane,lane-isanegativecontrol,lane+isapositivecontrol,MisDL2000DNAMarker图4沙门氏菌invA基因扩增结果Fig.4PCRamplificationofinvAgene3.1.3山东省5个阳性鸡场沙门氏菌的质谱鉴定结果结果表明，单菌落的质谱鉴定结果显示为沙门氏菌，Log(score)=2.198。177株沙门氏菌的质谱鉴定结果与3.1.2中PCR鉴定结果100%吻合。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡沙门氏菌病的综合防治[J]. 朱明轩,李宏喜. 今日畜牧兽医. 2019(10)
[2]2008—2017年我国部分地区禽源沙门氏菌流行状况及耐药分析[J]. 赵建梅,李月华,张青青,赵格,王娟,刘娜,黄秀梅,王君玮,曲志娜. 中国动物检疫. 2019(08)
[3]广东省中山市2017年沙门菌耐药菌谱及分子分型分析[J]. 袁展红,郑悦康,刘绮明,区金结,仇绮琳,叶志英. 中国热带医学. 2019(05)
[4]浅谈鸡白痢病的综合防治技术[J]. 张忠赞,匡加聪,张志川,郭兆廷,李佳赟. 畜禽业. 2019(04)
[5]内蒙古呼和浩特地区鸡源沙门氏菌分离鉴定、血清学鉴定及耐药性研究[J]. 高瑞霞,滕贇,张彦斌,卜红宇,岳佳,崔生辉,周刚. 食品安全质量检测学报. 2019(06)
[6]一株食源性伤寒沙门氏菌的多重耐药性分析与小鼠致病性研究[J]. 赵翔,刘东,潘金金,袁飞. 中国动物检疫. 2018(11)
[7]2016年江苏省沙门氏菌血清型的分布、耐药状况及相关基因研究[J]. 沈赟,秦思,唐震. 南京医科大学学报(自然科学版). 2018(09)
[8]山东地区屠宰场猪肉污染沙门氏菌菌株毒力基因筛查与ERIC-PCR分型[J]. 黄秀梅,张倩,盖文燕,曲志娜,李晨阳,赵思俊,赵建梅,赵格,李月华,王玉东,王君玮,王娟. 中国人兽共患病学报. 2018(08)
[9]三黄种鸡场孵化死胚中沙门菌的分离鉴定与耐药性分析[J]. 徐耀辉,邓同炜,齐亚如,韩文龙,卢建洲,蒋增海. 畜牧兽医学报. 2018(05)
[10]食源性致病菌耐药机制研究进展[J]. 赵勇,李欢,张昭寰,刘海泉,潘迎捷. 生物加工过程. 2018(02)
博士论文
[1]基于荧光微球的食源性致病菌免疫检测方法的建立及评价[D]. 李倩茹.华南理工大学 2018
[2]华中地区三种畜禽病原菌耐药和毒力的流行性及分子特征研究[D]. 匡秀华.华中农业大学 2015
硕士论文
[1]2017-2018年华东地区禽源沙门菌的流行病学调查及基于鸡白痢沙门菌LPS间接ELISA检测方法的建立[D]. 胡建乐.扬州大学 2019
[2]种鸡场沙门氏菌感染状况的调查与防控[D]. 郭龙宗.山东农业大学 2017
[3]我国部分地区种鸡场沙门菌流行现状调查、耐药性分析及分子分型[D]. 费晓.扬州大学 2017
[4]扬州地区部分屠宰场、农贸市场和动物医院猪源沙门菌分离鉴定、耐药性分析及致病性研究[D]. 印广浩.扬州大学 2016
[5]动物源沙门氏菌耐药基因及毒力岛基因mgtC和sopB的检测[D]. 欧阳本.安徽农业大学 2013
[6]华东地区鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定、分子流行病学及致病性研究[D]. 查华.扬州大学 2013
[7]四川主要肉品生产链中沙门氏菌的分离鉴定、耐药性分析及PFGE分型[D]. 侯小刚.四川农业大学 2012
[8]基于SEF14菌毛的肠炎沙门氏菌特异性诊断方法的建立及应用[D]. 段小丽.扬州大学 2012
本文编号：3135700
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