不同致病力MDRV双重RT-PCR检测方法建立及诱导细胞凋亡研究
发布时间：2021-04-14 01:40
番鸭呼肠孤病毒（Muscovy duck reovirus,MDRV）是以感染番鸭出现“肝白点”为主要病变特征,并可引起软脚,喜卧,趾、跗关节肿胀等症状的一种传染性很强的病毒。2001年以来,本实验室分离出多株番鸭呼肠孤病毒,其中包括不同致病力的YB株和YJL株。经测序分析,YB株与MDRV法国89026株的S4基因同源性达94%以上,而YJL株与禽呼肠孤病毒（Avian reovirus,ARV）S1133株、176株的S1基因之间同源率高达96%以上,YB株与YJL株之间S组基因同源性低于30%。YB毒株在临床上表现为高致病力的特点,能够引起高的致死率,YJL毒株,在临床上对番鸭表现为低致病力的特点。由于两毒株在临床症状上有着类似发病症状和致病机理,通过临床诊断鉴别比较困难,所以建立一种快速、高效、特异的检测方法对于临床上区分不同致病力毒株具有重要意义。YJL株的S1基因编码P10、P17和σ C三个蛋白,而YB株的S4基因编码P10和σC两个蛋白,不含有P17蛋白,且两个毒株的P10蛋白基因的同源性极低。根据这2株病毒基因特点,分别针对YB株P10蛋白基因和YJL株P17蛋白基因...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１单项ＰＣＲ特异性扩增结果??Ｆｉｇ．５．?Ｓｐｅｃｉｆｉｃ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓ＾Ｌｔｓ?ｏｆ?ｓｉｎｇｌｅ?ＰＣＲ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]直接免疫荧光检测禽呼肠孤病毒方法的建立[J]. 谢志勤,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢丽基,范晴. 中国动物检疫. 2012(11)
[2]一株新型鸭源呼肠孤病毒（TH11株）的分离与鉴定[J]. 陈宗艳,朱英奇,王世传,李传峰,李露,王玢缤,付玉志,高景鹏,王超,刘光清. 中国动物传染病学报. 2012(01)
[3]禽（番鸭）呼肠孤病毒TaqMan探针荧光RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 严进,关育芳,李中华,吴异健,吴宝成. 中国预防兽医学报. 2009(11)
[4]番鸭呼肠孤病毒p10.8蛋白致细胞凋亡功能[J]. 张云,郭东春,耿宏伟,王钰,魏萍. 中国预防兽医学报. 2009(10)
[5]呼肠孤病毒科的系统发育分析[J]. 高芳銮,范国成,谢荔岩,黄美英,吴祖建. 激光生物学报. 2008(04)
[6]番鸭呼肠孤病毒诱导雏番鸭免疫器官细胞凋亡的研究[J]. 陈志胜,马春全,卢玉葵,肖静芸. 中国预防兽医学报. 2005(06)
[7]中国禽（番鸭）呼肠孤病毒分离株S1基因全序列分析[J]. 王劭,邓国华,吴异健,吴宝成,陈化兰. 中国预防兽医学报. 2005(02)
[8]禽（番鸭）呼肠孤病毒诱导脾脏单核—巨噬细胞和淋巴细胞凋亡的超微观察[J]. 姚金水,吴宝成,陈文列,陈家祥,吴异键. 福建农业大学学报. 2004(04)
[9]正呼肠孤病毒及其分类学依据研究进展[J]. 张云,刘明,欧阳岁东,童光志. 动物医学进展. 2004(06)
[10]禽类呼肠孤病毒的分子生物学[J]. 刘文兴,王劭,吴宝成. 畜牧兽医科技信息. 2004(08)
硕士论文
[1]番鸭呼肠孤病毒S组基因序列分析及衣壳蛋白克隆表达[D]. 王劭.福建农林大学 2005
[2]禽（鸡源）呼肠孤病毒的分离与鉴定[D]. 梁英.福建农林大学 2005
[3]番鸭呼肠孤病毒病诊断技术研究[D]. 王全溪.福建农林大学 2004
本文编号：3136403
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１单项ＰＣＲ特异性扩增结果??Ｆｉｇ．５．?Ｓｐｅｃｉｆｉｃ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓ＾Ｌｔｓ?ｏｆ?ｓｉｎｇｌｅ?ＰＣＲ??
为２８８ｂｐ和４４１ｂｐ，位置与??预期大小相符。对这２株ＰＣＲ扩增产物测序获得的序列，经ＤＮＡｓｔａｒ软件分析，??这些序列分别与原来的参考序列一致。??将ＹＢ株、ＹＪＬ株与ＮＣＢＩ上公布的包括传统毒株法国株８９０２６在内的６株??ＭＤＲＶ病毒株的Ｐ１０蛋白基因和包括标准株美国Ｓ１１３３株、１７６ＡＲＶ病毒株在内??的６株ＡＲＶ毒株的Ｐ１７蛋白基因进行同源序列比对（登录号见表２－５），以得知??两毒株在病原地域分布的地位和关系，２个蛋白基因核苷酸序列同源性分析及发??育进化树枝见图２、图３、图４、图５。由图可知，ＹＢ毒株与传统毒株国内３株??ＭＤＲＶ毒株、法国８９０２６株同源性均在９４％以上，与ＹＪＬ株、ＡＲＶ?Ｓ１１３３株同??源性仅４０％，从发育树可知ＹＢ株与传统法国株８９０２６、国内株ＺＪ２０００、Ｓ１２、??Ｃ４属于同一进化分支，ＹＪＬ株与ＡＲＶＳ１１３３株属于另外一进化分支，关系较远。??而Ｙ几毒株与包括参考株美国Ｓ１１３３、加拿大株１７６在内的国内外几株ＡＲＶ毒??株同源性高达９９％以上，从发育树可知它们之间的演化距离只有０．４，说明其核??苷酸同源性很高。??表２－５?ＭＤＲＶ参考毒株??Ｔａｂｌｅ２－５?ＭＤＲＶ?ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ?ｓｔｒａｉｎｓ??毒株?ｉｉ?登录号?ｉｉ?±ｉｉ?登录号??Ｓｔｒａｉｎ?Ｃｏｕｎｔｒｙ?Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ?Ｎｏ．?Ｓｔｒａｉｎ?Ｃｏｕｎｔｒｙ?Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ?Ｎｏ．??ＭＤＲＶＹＢ－Ｐ１０?中国福建?ＫＣ５７１１７４?ＡＲＶ?ＳＩ?１３３?美国?ＡＦ３３０７０３??ＭＤＲＶ?８９０２６?法国?ＡＪ３１０５２６?ＡＲＶ?ＰＩ００?美国?ＤＱ８６８７９１??Ｍ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]直接免疫荧光检测禽呼肠孤病毒方法的建立[J]. 谢志勤,谢芝勋,刘加波,庞耀珊,邓显文,谢丽基,范晴. 中国动物检疫. 2012(11)
[2]一株新型鸭源呼肠孤病毒（TH11株）的分离与鉴定[J]. 陈宗艳,朱英奇,王世传,李传峰,李露,王玢缤,付玉志,高景鹏,王超,刘光清. 中国动物传染病学报. 2012(01)
[3]禽（番鸭）呼肠孤病毒TaqMan探针荧光RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 严进,关育芳,李中华,吴异健,吴宝成. 中国预防兽医学报. 2009(11)
[4]番鸭呼肠孤病毒p10.8蛋白致细胞凋亡功能[J]. 张云,郭东春,耿宏伟,王钰,魏萍. 中国预防兽医学报. 2009(10)
[5]呼肠孤病毒科的系统发育分析[J]. 高芳銮,范国成,谢荔岩,黄美英,吴祖建. 激光生物学报. 2008(04)
[6]番鸭呼肠孤病毒诱导雏番鸭免疫器官细胞凋亡的研究[J]. 陈志胜,马春全,卢玉葵,肖静芸. 中国预防兽医学报. 2005(06)
[7]中国禽（番鸭）呼肠孤病毒分离株S1基因全序列分析[J]. 王劭,邓国华,吴异健,吴宝成,陈化兰. 中国预防兽医学报. 2005(02)
[8]禽（番鸭）呼肠孤病毒诱导脾脏单核—巨噬细胞和淋巴细胞凋亡的超微观察[J]. 姚金水,吴宝成,陈文列,陈家祥,吴异键. 福建农业大学学报. 2004(04)
[9]正呼肠孤病毒及其分类学依据研究进展[J]. 张云,刘明,欧阳岁东,童光志. 动物医学进展. 2004(06)
[10]禽类呼肠孤病毒的分子生物学[J]. 刘文兴,王劭,吴宝成. 畜牧兽医科技信息. 2004(08)
硕士论文
[1]番鸭呼肠孤病毒S组基因序列分析及衣壳蛋白克隆表达[D]. 王劭.福建农林大学 2005
[2]禽（鸡源）呼肠孤病毒的分离与鉴定[D]. 梁英.福建农林大学 2005
[3]番鸭呼肠孤病毒病诊断技术研究[D]. 王全溪.福建农林大学 2004
本文编号：3136403
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