竹鼠肠道兼性厌氧纤维素降解菌的分离、鉴定及其产酶活性研究
发布时间：2021-04-20 22:59
农作物副产品如秸秆等含有很高的纤维素成分,是一种潜在的自然资源,在全球资源危机的今天,利用其大力发展畜牧业,不仅可以充分利用资源,还能避免因秸秆燃烧对生态环境造成的污染。利用纤维素酶分解纤维素是利用纤维素资源的有效手段之一,目前产纤维素酶菌株多分离自反刍动物瘤胃液、堆肥、土壤等,所得降解纤维素能力较强的菌株多为厌氧菌株,由于培养条件严格,在生产中的应用得到限制。本研究以竹鼠肠道内容物作为微生物来源,从中分离筛选出优良的兼性厌氧产纤维素酶菌株,为最大限度开发利用纤维素资源奠定基础,同时促进新能源、食品、以及畜牧业等相关行业的快速发展。本研究主要包括以下四部分内容：试验一：通过严格厌氧结合需氧培养,以羧甲基纤维素钠为唯一碳源对竹鼠肠道内容物进行涂布培养,初步分离出具有降解纤维素能力的菌株后,结合刚果红染色以及酶活测定复筛出所需目的菌株。试验结果显示,从竹鼠回肠、盲肠、结肠共得到17株菌株,根据菌株形态筛选出7株疑似纤维素降解菌,分别为来自竹鼠回肠的H-1、H-2菌株;盲肠的M-1、M-2、M-3菌株；结肠的J-1、J-2菌株；结合刚果红染色法所得到的透明圈与菌落直径比,测定其发酵液酶活后,...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 纤维素构造
1.1.1 天然纤维素的成分
1.1.2 纤维素的化学结构
1.2 纤维素酶
1.2.1 纤维素酶的分子结构及作用特征
1.2.2 纤维素酶的催化机制
1.2.3 纤维素酶活性的测定
1.3 纤维素酶的应用
1.3.1 在食品业上的应用
1.3.2 在畜牧业上的应用
1.3.3 在洗涤剂工业中的应用
1.3.4 在纺织工业上的应用
1.3.5 在能源工业中的应用
1.4 纤维素降解菌研究概况
1.5 选育纤维素降解菌的方法
1.5.1 从环境中筛选纤维素降解菌株
1.5.2 诱变育种
1.5.3 分子生物学手段构建高产纤维素酶菌株
1.5.4 优化菌种的培养条件
1.6 菌种鉴定方法
1.6.1 常规鉴定
1.6.2 分子生物学鉴定
1.7 研究目的与意义
第二章 竹鼠肠道兼性厌氧纤维素菌株的筛选
2.1 材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要仪器设备
2.1.3 培养基配制
2.1.4 纤维素酶测定试剂配制
2.1.5 样品处理
2.1.6 富集培养
2.1.7 初筛
2.1.8 复筛
2.1.9 纤维素酶活的测定
2.2 结果与分析
2.2.1 纤维素降解菌的初筛
2.2.2 纤维素降解菌的复筛
2.3 讨论
2.3.1 兼性纤维素降解菌的筛选方法
2.3.2 菌株纤维素酶活测定方法的选择
2.4 小结
第三章 竹鼠肠道兼性厌氧纤维素降解菌株的鉴定
3.1 材料方法
3.1.1 仪器设备
3.1.2 试验样品及试剂
3.2 试验方法
3.2.1 菌体形态观察
3.2.2 菌体革兰氏染色
3.2.3 需氧性与运动性
3.2.4 菌株的生理生化实验
3.2.5 分子生物学鉴定
3.3 结果与分析
3.3.1 菌体形态学及革兰氏染色观察
3.3.2 菌株运动性与需氧性
3.3.3 菌株生理生化特征鉴定
3.3.4 菌株分子鉴定结果
3.4 讨论
3.4.1 细菌基因组DNA的提取
3.4.2 菌株的鉴定
3.5 小结
第四章 竹鼠肠道兼性厌氧纤维素降解菌的产酶性质研究
4.1 试验材料与方法
4.1.1 试验菌株
4.1.2 仪器设备
4.1.3 种子培养基、发酵培养基
4.1.4 酶活力测定
4.1.5 菌株产酶条件的选择和优化
4.2 结果与分析
4.2.1 发酵时间对产酶的影响
4.2.2 碳源对产酶的影响
4.2.3 氮源对产酶的影响
4.2.4 初始接种量对产酶的影响
4.2.5 温度对产酶的影响
4.2.6 初始pH值对产酶的影响
4.3 讨论
4.3.1 影响纤维素酶活力的因素
4.3.2 产酶条件选择和优化
4.4 小结
第五章 结论
5.1 实验结果
5.2 创新点
5.3 问题与不足
5.4 研究展望
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
本文编号：3150568
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 纤维素构造
1.1.1 天然纤维素的成分
1.1.2 纤维素的化学结构
1.2 纤维素酶
1.2.1 纤维素酶的分子结构及作用特征
1.2.2 纤维素酶的催化机制
1.2.3 纤维素酶活性的测定
1.3 纤维素酶的应用
1.3.1 在食品业上的应用
1.3.2 在畜牧业上的应用
1.3.3 在洗涤剂工业中的应用
1.3.4 在纺织工业上的应用
1.3.5 在能源工业中的应用
1.4 纤维素降解菌研究概况
1.5 选育纤维素降解菌的方法
1.5.1 从环境中筛选纤维素降解菌株
1.5.2 诱变育种
1.5.3 分子生物学手段构建高产纤维素酶菌株
1.5.4 优化菌种的培养条件
1.6 菌种鉴定方法
1.6.1 常规鉴定
1.6.2 分子生物学鉴定
1.7 研究目的与意义
第二章 竹鼠肠道兼性厌氧纤维素菌株的筛选
2.1 材料与方法
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要仪器设备
2.1.3 培养基配制
2.1.4 纤维素酶测定试剂配制
2.1.5 样品处理
2.1.6 富集培养
2.1.7 初筛
2.1.8 复筛
2.1.9 纤维素酶活的测定
2.2 结果与分析
2.2.1 纤维素降解菌的初筛
2.2.2 纤维素降解菌的复筛
2.3 讨论
2.3.1 兼性纤维素降解菌的筛选方法
2.3.2 菌株纤维素酶活测定方法的选择
2.4 小结
第三章 竹鼠肠道兼性厌氧纤维素降解菌株的鉴定
3.1 材料方法
3.1.1 仪器设备
3.1.2 试验样品及试剂
3.2 试验方法
3.2.1 菌体形态观察
3.2.2 菌体革兰氏染色
3.2.3 需氧性与运动性
3.2.4 菌株的生理生化实验
3.2.5 分子生物学鉴定
3.3 结果与分析
3.3.1 菌体形态学及革兰氏染色观察
3.3.2 菌株运动性与需氧性
3.3.3 菌株生理生化特征鉴定
3.3.4 菌株分子鉴定结果
3.4 讨论
3.4.1 细菌基因组DNA的提取
3.4.2 菌株的鉴定
3.5 小结
第四章 竹鼠肠道兼性厌氧纤维素降解菌的产酶性质研究
4.1 试验材料与方法
4.1.1 试验菌株
4.1.2 仪器设备
4.1.3 种子培养基、发酵培养基
4.1.4 酶活力测定
4.1.5 菌株产酶条件的选择和优化
4.2 结果与分析
4.2.1 发酵时间对产酶的影响
4.2.2 碳源对产酶的影响
4.2.3 氮源对产酶的影响
4.2.4 初始接种量对产酶的影响
4.2.5 温度对产酶的影响
4.2.6 初始pH值对产酶的影响
4.3 讨论
4.3.1 影响纤维素酶活力的因素
4.3.2 产酶条件选择和优化
4.4 小结
第五章 结论
5.1 实验结果
5.2 创新点
5.3 问题与不足
5.4 研究展望
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
本文编号：3150568
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3150568.html
