新城疫病毒基质（M）蛋白生物学功能的初步研究

发布时间：2021-04-26 01:47

　　本研究对新城疫病毒（NDV）基质蛋白（M）的生物学功能进行了初步研究,试验包括6个部分,各个内容如下：1、M蛋白结构的生物信息学分析蛋白质的功能由其生物学结构决定,NDV M蛋白的功能研究目旧非常少,对其结构的认知也很肤浅。本文用生物信息学方法,对M蛋白翻译后修饰的磷酸化位点、糖基化位点、类泛素化位点、酰胺化位点和豆蔻酰化位点,线性motif和domain,B细胞抗原表位,T细胞表位,二级结构,亚细胞分布等进行预测分析,为今后研究M蛋白的结构和功能提供理论依据。2、M蛋白多克隆抗体的制备及其B细胞线性抗原表位分析通过构建NDV M蛋白原核表达载体,对M蛋白进行体外表达,经分离纯化后免疫小鼠,实时监测免疫效果,适时收集血清制备M蛋白多克隆抗体；同时利用生物信息学方法预测M蛋白B细胞线性抗原表位,对综合得分较高的寡肽序列进行人工合成,偶联BSA后免疫动物,对高免血清采用ELISA和Western blot进行表位验证。结论：成功表达M蛋白,成功制备M蛋白特异性的多克隆抗体,并且确证2个B细胞表位。3、稳定表达M蛋白DF-1细胞构建研究中使用PiggyBac转座子系统,将M基因随机转座到宿主... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：130 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
引言
第一章 RNA病毒M蛋白生物学功能研究进展
    1 RNA病毒M蛋白概述
    2 RNA病毒M蛋白与病毒装配和出芽
    3 RNA病毒M蛋白与宿主细胞的相互作用
    4 NDV M蛋白的结构与功能
    5 小结与展望
    参考文献
第二章 M蛋白生物信息学分析
    摘要
    1 试验方法
    2 结果及分析
    3 讨论
    ABSTRACT
    参考文献
第三章 M蛋白抗体制备及B细胞抗原表位分析
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    ABSTRACT
    参考文献
第四章 稳定表达M蛋白DF-1细胞构建
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    ABSTRACT
    参考文献
第五章 M蛋白细胞定位研究
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    ABSTRACT
    参考文献
第六章 M蛋白对NDV增殖的影响
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    ABSTRACT
    参考文献
第七章 M蛋白与宿主细胞相互作用蛋白的捕获及其蛋白质组学分析
    摘要
    1 材料与方法
    2 结果与分析
    3 讨论
    ABSTRACT
    参考文献
全文结论
致谢
攻读硕士学位期间发表论文与学术交流情况


【参考文献】：
期刊论文
[1]新城疫病毒基质蛋白与禽细胞核磷蛋白B23.1在HEK-293T细胞中的相互作用[J]. 段志强,陈坚,何亮,许海旭,李群辉,胡顺林,刘秀梵.  微生物学报. 2013(07)
[2]新城疫病毒基质蛋白第23位苯丙氨酸对病毒复制与细胞致病性的作用[J]. 高海岗,陆建荣,胡增垒,胡娇,刘晓文,王晓泉,朱杰.  中国家禽. 2012(09)
[3]水泡口炎病毒基质蛋白对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 赵菊梅,刘涛,魏于全,文艳君,吴扬.  四川大学学报(医学版). 2009(02)
[4]新城疫病毒（NDV）基质（M）蛋白在体外对炎症因子诱导的作用[J]. 王蕾,陈福勇,郑世军,索勋.  中国兽医杂志. 2008(04)
[5]水泡口炎病毒M蛋白对小鼠Lewis肺癌LL/2c细胞增殖与凋亡的影响[J]. 赵菊梅,刘涛,徐健蓉,王国庆,杜小波,文艳君.  癌症. 2007(03)



本文编号：3160495