小鼠非手术胚胎移植研究

发布时间：2021-04-26 16:09

　　小鼠非手术法胚胎移植相对手术法胚胎移植的成功率较低，这制约了非手术法胚胎移植的广泛应用。但与手术法相比，非手术法简便快捷、不易污染、费用低，且能对小鼠损伤小，无需专业的手术器械。本实验从麻醉剂种类、激素调节、假孕鼠天数、移植器械的材质、移植管径、管长、弧度、模拟移植、移入液体和空气体积、移入胚胎数量和移植方法等方面对非手术法进行改进，改善传统的非手术胚胎移植方法，提高了胚胎移植的成功率。在麻醉剂实验中，不同麻醉剂和不麻醉组的差异均不显著（P>0.05）。2.5d和3.5d假孕鼠的手术法移植成功率差异显著（P<0.05），非手术移植成功率的差异不显著（P>0.05），2.5d假孕鼠的手术法和非手术法移植效率差异显著（P<0.05），3.5d假孕鼠的非手术法移植效率没有显著提高。在小鼠进行胚胎移植之后，两组小鼠分别皮下注射0.1ml20ug/ml的雌激素和孕酮，补充孕酮的移植成功率为35.7%；补充雌激素的小鼠只有一只发生了妊娠，其他均未妊娠。采用玻璃管和PTFE管的移植成功率分别为55.9%和72.4%，差异显著（P<0.05）；同样采用PTFE管，管径为6... 

【文章来源】：河北农业大学河北省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 胚胎移植技术
        1.1.1 胚胎移植技术的发展
        1.1.2 胚胎移植的生理学基础
        1.1.3 胚胎移植技术存在的问题及关键环节
    1.2 小鼠非手术胚胎移植技术
        1.2.1 小鼠胚胎发育过程与胚胎移植
        1.2.2 小鼠非手术胚胎移植的优势
        1.2.3 国内外研究进展及存在的问题
    1.3 影响小鼠非手术法胚胎移植因素
        1.3.1 胚胎移植器械与方法
        1.3.2 影响小鼠非手术法胚胎移植效率的因素
    1.4 本研究的意义及其主要内容
        1.4.1 目的意义
        1.4.2 研究的主要内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验仪器与耗材
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要溶液配制
    2.2 实验动物
        2.2.1 实验小鼠的饲养与管理
        2.2.2 结扎雄鼠的制备
        2.2.3 假孕母鼠的准备
    2.3 移植器械的制备
        2.3.1 玻璃移植管的制备
        2.3.2 PTFE 管移植器械的制备
    2.4 移植胚胎的获取
        2.4.1 小鼠胚胎的收集和体外培养
        2.4.2 体外胚胎的获取
        2.4.3 嵌合体胚胎的获取
        2.4.4 囊胚质量的评估
    2.5 小鼠胚胎移植的方法
        2.5.1 小鼠子宫手术胚胎移植的方法
        2.5.2 小鼠非手术胚胎移植的方法
    2.6 实验设计
        2.6.1 不同麻醉剂对小鼠非手术胚胎移植的影响
        2.6.2 不同假孕鼠天数对非手术胚胎移植的影响
        2.6.3 激素对小鼠非手术胚胎移植的影响
        2.6.4 PTFE 移植管对小鼠非手术胚胎移植的影响
    2.7 统计分析
3 结果与分析
    3.1 麻醉剂对小鼠非手术胚胎移植的影响
        3.1.1 不同麻醉剂对移植结果的影响
        3.1.2 麻醉对胚胎回收的影响
        3.1.3 机械损伤对胚胎着床的影响
    3.2 不同假孕天数对小鼠非手术胚胎移植的影响
    3.3 孕酮和雌激素对移植胚胎着床的影响
    3.4 移植器械对胚胎移植的影响
        3.4.1 玻璃管和 PTFE 管对小鼠子宫伤害实验
        3.4.2 移植管的材质、管径和移植深度对胚胎移植的影响
    3.5 PTFE 管的模拟移植对胚胎移植的影响
    3.6 体外胚胎的移植实验
    3.7 改进后实验结果
4 讨论
    4.1 小鼠胚胎非手术移植的移植管的材质、管径、长度和弯直对移植成功率的影响
    4.2 关于胚胎丢失的问题
    4.3 胚胎的植入与植入“窗口期”
        4.3.1 假孕小鼠的天数
        4.3.2 子宫进入“窗口期”的激素调节
        4.3.3 模拟移植的使用
    4.4 其他因素的影响
    4.5 目前存在的问题和发展前景
5 结论
参考文献
在读期间发表的论文
作者简历
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]丁卡因对急性分离的豚鼠鼻黏膜纤毛运动的影响[D]. 王刚.中国人民解放军军医进修学院 2008



本文编号：3161710