鸡脾转移因子多肽的组成研究及其在蛋种鸭黄病毒治疗中的应用实验

发布时间：2021-04-29 20:09

　　转移因子（Transfer factor，TF）是一种低分子量的淋巴细胞提取物，能够将免疫致敏信息转移到T淋巴细胞，增强机体免疫功能，是一种新型的免疫激发剂。目前，该产品不仅用于家禽的免疫抑制病、过敏症及自身免疫疾病的治疗，而且已作为一种免疫增强剂用于提高疫苗的免疫效果。但是，转移因子的组成一直是一个难于破解的迷。本研究利用冻融-透析法制备兽用鸡脾转移因子口服溶液，分别采用福林酚法测定鸡脾转移因子的多肽含量；利用SDS-PAGE电泳法和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法（MALDI-TOF-MS）测定其分子量；采用液相色谱-质谱联用法（LC-MS）分析鸡脾转移因子的多肽组成；利用脱E受体法测定鸡脾转移因子活力。同时，对其在临床上的应用效果进行了评价。研究表明，通过福林酚法测定的鸡脾转移因子口服溶液多肽含量为1570.8μg/mL；利用SDS-PAGE电泳法测得的多肽分子量为9213Da；利用脱E受体法测定的鸡脾转移因子活力为10.92%；利用LC-MS法测得的多肽分子量为800Da～7476Da，共含有581种多肽，其中包括T细胞凋亡抑制相关蛋白（TIAL1）、胸腺肽β4（TMSB4X... 

【文章来源】：山东农业大学山东省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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符号说明
中文摘要
Abstract
1.文献综述
    1.1 转移因子的分类
    1.2 转移因子的理化特性
    1.3 转移因子的生物学活性及作用机理
        1.3.1 TF 可增强体液免疫、抗放射及免疫抑制
        1.3.2 TF 可增强细胞免疫
        1.3.3 TF 可趋化中性粒细胞和巨噬细胞活性
        1.3.4 TF 具有免疫调节作用
        1.3.5 TF 可促进机体生长发育
        1.3.6 TF 的人工被动免疫作用
    1.4 转移因子的制备方法
        1.4.1 冻融透析法
        1.4.2 乙醇提取法
        1.4.3 层析法
        1.4.4 超滤法
    1.5 转移因子在生产中的应用
        1.5.1 在人临床上的应用
            1.5.1.1 治疗小儿心肌炎
            1.5.1.2 治疗流行性腮腺炎
            1.5.1.3 治疗呼吸道反复感染
            1.5.1.4 治疗疱疹病毒
            1.5.1.5 治疗病毒性肠炎
        1.5.2 在动物临床上的应用
            1.5.2.1 在家畜疾病防治中的应用
            1.5.2.2 在家禽疾病防治中的应用
    1.6 本研究的目的与意义
2 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料来源
        2.1.2 主要试剂和物品
        2.1.3 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 非特异性鸡脾转移因子制备
        2.2.2 多肽含量测定
        2.2.3 分子量测定
            2.2.3.1 SDS-PAGE 电泳法
            2.2.3.2 MALDI-TOF-MS 法
        2.2.4 多肽组成分析
            2.2.4.1 样品处理
            2.2.4.2 毛细管高效液相色谱方法
            2.2.4.3 质谱数据采集
            2.2.4.4 数据分析
        2.2.5 活力测定
    2.3 脾转移因子初步临床应用实验
        2.3.1 试验动物
        2.3.2 药物选择
        2.3.3 动物分组
        2.3.4 治疗方案
        2.3.5 数据记录方法
3 结果与分析
    3.1 多肽含量测定结果
    3.2 分子量测定结果
        3.2.1 SDS-PAGE 电泳法
        3.2.2 MALDI-TOF-MS 法
    3.3 多肽组成分析结果
    3.4 活力测定结果
    3.5 脾转移因子初步临床应用实验
        3.5.1 蛋种鸭发病概况
        3.5.2 产蛋率总体变化
        3.5.3 治疗前后产蛋率降幅比较
        3.5.4 产蛋率恢复效果评价
4 讨论
    4.1 转移因子的多肽组成
    4.2 转移因子分子量及其分布
    4.3 转移因子功能与组分的关系
    4.4 脾转移因子初步临床应用实验
5 结论
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]转移因子对猪圆环病毒亚单位疫苗免疫效果的影响[J]. 屈泰龙,李润成,钱幸,杨宇,余兴龙.  湖南农业大学学报(自然科学版). 2013(04)
[2]转移因子治疗小儿病毒性心肌炎的疗效分析[J]. 程瑞蓉,蔡军.  中国美容医学. 2012(12)
[3]转移因子对猪病毒性免疫抑制的缓解作用[J]. 陈智敏.  福建畜牧兽医. 2012(05)
[4]鸡脾转移因子的制备及对雏鸡免疫应答的作用研究[J]. 乔宏兴,张晓根,任敏,宁豫昌,白静.  甘肃农业大学学报. 2012(01)
[5]冻融法提取脾脏转移因子影响因素的试验[J]. 刘尧,刘宗柱.  中国兽医杂志. 2012(01)
[6]一例蛋鸭黄病毒病的诊治[J]. 唐维国,施少华,傅光华,韦启鹏,刘林秀,季华员,林建生,黄瑜.  中国家禽. 2012(02)
[7]猪脾转移因子微囊的制备及其活性检测[J]. 符华林,唐文,黄平全,金超,胡俊,邓凤英.  中国兽医科学. 2012(01)
[8]鸭黄病毒BZ株的生物学特性研究[J]. 马秀丽,于可响,高凤,李玉峰,黄兵,吴静,秦卓明.  中国家禽. 2011(21)
[9]特异性和非特异性猪脾转移因子的制备及其免疫活性比较[J]. 李士学,侍俊超,周微,袁丽,肖龙文,宋文飞,曹锦艳,张英.  中国生物制品学杂志. 2011(10)
[10]鸭黄病毒油乳剂灭活疫苗研制及免疫效果测定[J]. 万春和,施少华,傅光华,梁昭平,王斌,程龙飞,李敏,陈红梅,林芳,林建生,王鑫,许芬芬,黄瑜.  养禽与禽病防治. 2011(10)

博士论文
[1]鸡脾转移因子的研制、检验规程及其应用[D]. 凌红丽.南京农业大学 2006

硕士论文
[1]鸡转移因子脂质体的制备及其免疫增效研究[D]. 王志龙.天津农学院 2011
[2]转移因子对鸡免疫机能的影响及其毒性试验研究[D]. 孙秀玉.山东农业大学 2009



本文编号：3168094