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空肠弯曲杆菌生物膜的形成及其特性的研究

发布时间:2021-05-09 01:11
  空肠弯曲杆菌(Campylobacter20Jejuni)是一种人畜共患病的病原菌,在世界范围内引起大规模的感染,该菌对生存条件的要求较为严苛。近年来有学者发现,该菌在一定条件下可以形成一种能够抵抗外界环境不良影响的生物膜,这也是该菌能够在严峻的环境中存活并产生耐药性的重要原因。本研究临床采取猪的盲肠部位作为分离空肠弯曲杆菌的试验样品,对空肠弯曲杆菌进行分离培养,分别采用常规生化鉴定以及PCR检测两种方法对分离到的菌株进行鉴定,比较两种方法的差异。经鉴定确认为空肠弯曲杆菌的菌株,通过结晶紫染色、扫描电镜等方法,确认空肠弯曲杆菌是否具有在体外形成生物膜的能力,建立其生物膜体外模型,并对其形成的过程进行了观察;正交实验法检测空气条件,环境温度以及培养基类型3个因素对空肠弯曲杆菌生物膜形成的影响。结果表明:用厌氧罐与焦性没食子酸结合的方法分离空肠弯曲杆菌是经济有效的;PCR法鉴定空肠弯曲杆菌,相对常规生化方法来说具有省时省力且灵敏准确的优点;分离所得到的空肠弯曲杆菌具有在体外形成生物膜的能力;空肠弯曲杆菌生物膜形成的的最佳条件为常规空气条件,即37℃以及MHB培养基。生物膜菌在其生存方式、胞... 

【文章来源】:东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】:88 页

【学位级别】:博士

【文章目录】:
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 空肠弯曲杆菌的病原学特征
        1.1.1 生物学
        1.1.2 致病性及致病机理
    1.2 空肠弯曲杆菌的流行病学
        1.2.1 流行的基本状况
        1.2.2 传染源、传播途径、易感动物
    1.3 空肠弯曲杆菌耐药性
    1.4 空肠弯曲杆菌的诊断方法的研究
    1.5 细菌生物膜概述
        1.5.1 生物膜的形成以及影响因素
        1.5.2 细菌生物膜的致病机理
        1.5.3 细菌生物膜的耐药性及耐药机制
        1.5.4 细菌生物膜鉴定方法的研究进展
        1.5.5 生物膜菌对机体免疫功能的影响
    1.6 细胞因子与抗氧化系统
        1.6.1 细胞因子
        1.6.2 抗氧化系统与自由基
    1.7 空肠弯曲杆菌生物膜的研究进展
    1.8 研究的目的和意义
2 试验材料
    2.1 试验仪器
    2.2 试验材料及培养基
3 试验方法
    3.1 空肠弯曲杆菌的分离、鉴定
        3.1.1 空肠弯曲杆菌的分离纯化
        3.1.2 鉴定
        3.1.3 细菌保存
    3.2 生物膜体外模型建立
        3.2.1 生物膜形成能力的分析
        3.2.2 光镜及扫描电镜观察
    3.3 空肠弯曲杆菌生物膜的相关特性的研究
        3.3.1 环境因素对生物膜形成的影响
        3.3.2 生物膜菌与浮游菌在合成胞外物质的差异
    3.4 浮游细菌和粘附细菌对动物致病性的研究
        3.4.1 菌株处理
        3.4.2 实验动物的处理
        3.4.3 宿主肝脏内细菌清除的研究
        3.4.4 小鼠血浆中细胞因子及氧化抗氧化指标的检测
4 结果
    4.1 病原菌分离及鉴定
        4.1.1 空肠弯曲杆菌分离
        4.1.2 空肠弯杆菌的鉴定
    4.2 空弯生物膜体外模型的建立结果
        4.2.1 空肠弯曲杆菌可形成生物膜能力的分析结果
    4.3 空弯生物膜相关特性的研究结果
        4.3.1 环境因素对空肠弯曲杆菌生物膜形成的影响
        4.3.2 两种细菌胞外多糖和菌体总蛋白的测定
        4.3.3 菌体总蛋白含量的测定
    4.4 两种空肠弯曲杆菌对感染动物机体的影响
        4.4.1 实验动物感染
        4.4.2 两种状态空肠弯曲杆菌对动物的致病性
        4.4.3 两种细菌在实验动物体内的清除情况
        4.4.4 感染小鼠血浆中炎性因子和氧化抗氧化指标的检测
        4.4.5 感染小鼠抗氧化指标的检测
5 讨论
    5.1 病原菌分离及鉴定
    5.2 C.jejuni生物膜体外模型的建立
    5.3 空弯生物膜相关特性的研究结果
        5.3.1 环境因素对空肠弯曲杆菌生物膜形成的影响
        5.3.2 两种细菌胞外多糖和菌体总蛋白的测定
    5.4 两种空肠弯曲杆菌对动物的致病性
        5.4.1 实验动物的处理
        5.4.2 两种空肠弯曲杆菌对动物的致病性
        5.4.3 两种细菌在感染动物肝脏内的清除情况
        5.4.4 对感染动物细胞因子和氧化抗氧化指标的检测
6 结论
致谢
参考文献
攻读博士学位期间发表的学术论文



本文编号:3176322

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