miR-275调控血红扇头蜱卵发育相关功能初步研究

发布时间：2021-05-12 12:08

　　本研究从已有血红扇头蜱miRNA数据库中筛选出与卵发育相关的miR-275基因,寻找调控靶基因的启动子等转录调控区域,预测靶标基因,采用RNA干扰及qRT-PCR方法对其真实性进行验证;PCR扩增靶标基因进行序列分析;选择功能区构建重组表达载体,进行体外原核表达及免疫反应的研究。miR-275作为重要的基因调控因子,分析其在血红扇头蜱不同发育阶段的表达水平具有重要意义。利用RNA干扰、实时荧光定量（qRT-PCR）、动物实验等方法共同分析miR-275调控靶标基因的作用机制。结果显示,卵黄原蛋白（vitellogenin,Vg）基因是miR-275重要的靶标基因。参考GenBank中微小扇头蜱（Rhipicephalus microplus）（登录号:EU086096）卵黄原蛋白核苷酸序列,设计特异性引物,扩增获得基因全长为1218bp的血红扇头蜱Vg基因序列,该基因与微小扇头蜱同类基因具有较高的同源性,达到93%;其次与变异革蜱、希伯来花蜱、肩突硬蜱同源性分别为85%、78%、62%。值得注意的是Vg基因包含一个221个氨基酸的Von Willebrand Factor tyeD（V... 

【文章来源】：中国畜牧兽医学会动物解剖及组织胚胎学分会第十九次学术研讨会论文集中国畜牧兽医学会会议论文集

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本文编号：3183387