稀释液中添加DMF、EG和不同糖对梅花鹿精液冷冻保存效果的影响

发布时间：2021-05-19 21:04

　　本试验对目前常用的梅花鹿精液冷冻稀释液进行了优化研究，探讨了适于梅花鹿精液冷冻保存的平衡时间及解冻方法。试验利用精子动力分析仪、低渗肿胀试验（HOST）、姬姆萨染色法分别测定精子活率、运动参数、质膜完整率和顶体完整率。试验结果如下：1.为筛选梅花鹿精液冷冻稀释液最佳甘油浓度，本试验在梅花鹿常用冷冻稀释液的基础上设计4%、6%、8%三个甘油浓度梯度，分析不同浓度甘油对精子的冷冻保存效果。结果表明，稀释液中添加6%甘油精子解冻后活率为62.00%，直线运动百分比为44.22%，质膜完整率为40.00%，顶体完整率为59.50%，VCL为116.86μm/s，均显著高于其他处理组（P<0.05）。2.甘油作为冷冻保护剂对精子有一定毒害作用，很多研究也在探讨其他冷冻保护剂对精子的保护作用，以求找出新的低毒保护剂。本试验用DMF（二甲基甲酰胺）、EG（乙二醇）两种冷冻保护剂部分替代和全部替代甘油，甘油添加组为对照组，分析这两种保护剂对梅花鹿精液的冷冻保护效果。结果表明，4%EG可以完全替代甘油，精子解冻后活率为42.33%，质膜完整率为39.83%，顶体完整率为35.00%，存活指数为92... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略表
第一章 绪论
    1.1 家畜精液冷冻保存历史及研究现状
    1.2 鹿科动物精液冷冻保存研究进展
        1.2.1 国内鹿科动物精液冷冻保存研究进展
        1.2.2 国外鹿科动物精液冷冻保存研究进展
    1.3 精子冷冻损伤
        1.3.1 冰晶损伤
        1.3.2 细胞膜损伤
        1.3.3 细胞冷休克
    1.4 精液稀释液的成分及其作用
        1.4.1 冷冻保护剂
        1.4.2 低温保护剂
        1.4.3 维持渗透压物质
        1.4.4 抑菌物质
    1.5 精液冷冻形式
    1.6 精子质量评价
        1.6.1 理化性质
        1.6.2 精子活率
        1.6.3 质膜完整率
        1.6.4 顶体完整率
        1.6.5 线粒体活性
        1.6.6 DNA 完整性
        1.6.7 受精能力
    1.7 本试验的意义
第二章 不同甘油浓度对梅花鹿精液冷冻效果的影响
    2.1 前言
    2.2 材料及方法
        2.2.1 试验动物
        2.2.2 主要药品与试剂
        2.2.3 仪器设备
        2.2.4 溶液配制
    2.3 试验方法
        2.3.1 冷冻稀释液的配制
        2.3.2 精液采集与稀释
        2.3.3 精液分装、冷冻
        2.3.4 冻后精子质量评价
        2.3.5 数据处理
    2.4 结果及分析
        2.4.1 不同甘油浓度对精子解冻后生理指标的影响
        2.4.2 不同甘油浓度对精子解冻后运动参数的影响
        2.4.3 不同甘油浓度对精子解冻后存活时间的影响
    2.5 讨论
第三章 DMF、EG 对梅花鹿精液冷冻效果的影响
    3.1 前言
    3.2 材料及方法
        3.2.1 试验动物
        3.2.2 主要药品与试剂
    3.3 试验方法
        3.3.1 冷冻稀释液的配制
        3.3.2 精液采集与稀释
        3.3.3 精液分装、冷冻
        3.3.4 冻后精子质量评价
        3.3.5 数据处理
    3.4 结果及分析
        3.4.1 EG 全部替代甘油对精子解冻后生理指标的影响
        3.4.2 EG 全部替代甘油对精子解冻后运动参数的影响
        3.4.3 EG 全部替代甘油对精子解冻后存活时间的影响
        3.4.4 DMF 部分替代甘油对精子解冻后生理指标的影响
        3.4.5 DMF 部分替代甘油对精子解冻后运动参数的影响
        3.4.6 DMF 部分替代甘油对精子解冻后存活时间的影响
    3.5 讨论
第四章 不同糖对梅花鹿精液冷冻效果的影响
    4.1 前言
    4.2 材料及方法
        4.2.1 试验动物
        4.2.2 主要药品与试剂
    4.3 试验方法
        4.3.1 冷冻稀释液的配制
        4.3.2 精液采集与稀释
        4.3.3 精液分装、冷冻
        4.3.4 冻后精子质量评价
        4.3.5 数据处理
    4.4 结果及分析
        4.4.1 不同糖对精子解冻后生理指标的影响
        4.4.2 不同糖对精子解冻后运动参数的影响
        4.4.3 不同糖对精子解冻后存活时间的影响
    4.5 讨论
第五章 平衡时间对梅花鹿精液冷冻效果的影响
    5.1 前言
    5.2 材料及方法
        5.2.1 试验动物
        5.2.2 主要药品与试剂
    5.3 试验方法
        5.3.1 冷冻稀释液的配制
        5.3.2 精液采集与稀释
        5.3.3 精液平衡
        5.3.4 精液分装、冷冻
        5.3.5 冻后精子质量评价
        5.3.6 数据处理
    5.4 结果及分析
        5.4.1 不同平衡时间对精子解冻后生理指标的影响
        5.4.2 不同平衡时间对精子解冻后运动参数的影响
        5.4.3 不同平衡时间对精子解冻后存活时间的影响
    5.5 讨论
第六章 不同解冻方法对梅花鹿精液冷冻效果的影响
    6.1 前言
    6.2 材料及方法
        6.2.1 试验动物
        6.2.2 主要药品与试剂
    6.3 试验方法
        6.3.1 冷冻稀释液的配制
        6.3.2 精液采集与稀释
        6.3.3 精液分装、冷冻
        6.3.4 精液解冻
        6.3.5 冻后精子质量评价
        6.3.6 数据处理
    6.4 结果及分析
        6.4.1 不同解冻方法对精子解冻后生理指标的影响
        6.4.2 不同解冻方法对精子解冻后运动参数的影响
        6.4.3 不同解冻方法对精子解冻后存活时间的影响
    6.5 讨论
第七章 结论
参考文献
附录
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]不同浓度乙二醇和甘油对犬精液冷冻效果的影响[J]. 高雅,罗桂河,李卫东,李复煌,孟丹娜,康蕊,秦秀蕊,倪和民.  中国农学通报. 2010(08)
[2]N,N-二甲基甲酰胺（DMF）对猪精液冷冻效果的影响[J]. 张树山,李青旺,胡建宏,江中良,刘宏,王立强.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2009(11)
[3]解冻速度对马鹿精子参数的影响[J]. 周佳勃,岳顺利,朱赫,毛冠平,付春晖,高利.  黑龙江畜牧兽医. 2008(08)
[4]天山马鹿细管冻精的制备和应用[J]. 高庆华,韩春梅,魏海军,周虚.  中国兽医学报. 2008(07)
[5]塔里木马鹿冷冻精液稀释液的试验报告[J]. 李建梅,宫国令,苗德成.  当代畜牧. 2007(06)
[6]马鹿电刺激采精及精液冷冻保存[J]. 李昊帮,李武.  养殖技术顾问. 2006(02)
[7]影响山羊体外受精的因素[J]. 周佳勃,吴延光,罗明久,韩东,刘丽清,常仲乐,谭景和.  动物学报. 2004(02)
[8]梅花鹿人工授精配套新技术研究[J]. 王柏林,赵裕方,张殿宇,李占武,杨立祥,马殿臣,艾永利.  特产研究. 2002(04)
[9]乙二醇对绵羊冻精效果的研究[J]. 刘玉峰,李武,兰翠.  中国草食动物. 2002(06)
[10]中国梅花鹿地史分布、种和亚种的划分及演化历史[J]. 郭延蜀,郑惠珍.  兽类学报. 2000(03)

博士论文
[1]猪精液冷冻保存研究[D]. 胡建宏.西北农林科技大学 2006

硕士论文
[1]低密度脂蛋白、大豆卵磷脂和海藻糖对猪精液冷冻保存效果的影响[D]. 吕瑞凯.西北农林科技大学 2011
[2]二甲基甲酰胺与两种多糖对猪精液冷冻保存效果的研究[D]. 刘宏.西北农林科技大学 2010
[3]两种多糖和低密度脂蛋白对牛精液冷冻保存效果的研究[D]. 周圣贤.西北农林科技大学 2009
[4]三种糖类和抗氧化剂对猪精子冷冻保存效果的研究[D]. 李文烨.西北农林科技大学 2007



本文编号：3196439