禽腺病毒4型弱毒株ON1的生物学特性及其免疫效力初步评价
发布时间：2021-06-02 21:59
肝炎-心包积液综合征（Hepatitis Hydropericardium Syndrome,HHS）是由Ⅰ群禽腺病毒血清4型（Fowl adenovirus 4,FAdV-4）引起的主要侵害鸡的一种病毒性传染病。典型症状为3-9周龄鸡突然死亡,并伴随心包积液、包涵体肝炎,发病率和死亡率均高。1987年在巴基斯坦的卡拉奇附近的安卡拉地区首次报道本病,随后在墨西哥、印度、俄罗斯、韩国、日本等国家均有该病发生的报道。2015年以来,由FAdV-4新基因型导致的HHS在我国山东、河南、江苏等地出现流行,死亡率高达80%,给我国养禽业带来了较大的经济损失。目前,疫苗免疫仍是防控禽腺病毒感染的重要手段,但市场还没有预防该病较正规商品化的疫苗,研究针对FAdV-4新基因型的疫苗将有助于防控HHS在中国的流行。弱毒活疫苗能够模拟病毒侵染机体的全过程,能够诱导机体产生包括黏膜免疫反应在内的各级免疫反应。为了研发用于HHS防控的FAdV-4弱毒活疫苗,本研究对分离自健康鸡的FAdV-4毒株ON1的生物学特性和体外增殖规律以及对FAdV-4中国流行株强毒攻击的保护效果进行了研究,以期为进一步研发用于防控H...
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
FAdV-4ON1毒株感染LMH细胞后不同时间点的形态变化（100x）
图 1-2 FAdV-4 实时荧光定量 PCR 标准曲线Figure.1-2 The standard curve for Real-time PCR of FAdV-4-4 ON1 在 LMH 细胞上的增殖动态究 FAdV-4 ON1 毒株在鸡肝癌上皮细胞中的复制动态，病毒接毒后 12、2、84、96、108 和 120 h，分别收取细胞培养上清和全细胞裂解物，利清和细胞裂解物中的病毒滴度绘制病毒生长曲线，细胞培养上清中的-48h 逐渐增高，在接毒后 72h 达到峰值（107.0TCID50/0.1 ml），96h 后中的病毒滴度也在接毒后 12h 逐渐上升，在接毒后 72h 达到最高（107.5毒 84h 后，开始缓慢下降。利用 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR，测上清及细胞裂解物中 FAdV-4 ON1 的基因组拷贝数，并将其绘制成基可知，FAdV-4 在感染 LMH 细胞后上清中的病毒基因组复制动态与一致，病毒基因组拷贝数在感染后 12-36h 不断增加，在感染后 48-84h到 120h，细胞裂解物中的病毒基因组拷贝数在感染后的 12h 一直保持8-96h 上升缓慢，在 120h 达到最高（图 1-3、1-4）。
图 1-2 FAdV-4 实时荧光定量 PCR 标准曲线Figure.1-2 The standard curve for Real-time PCR of FAdV-4 ON1 在 LMH 细胞上的增殖动态FAdV-4 ON1 毒株在鸡肝癌上皮细胞中的复制动态，病毒接毒后 12、24、36、84、96、108 和 120 h，分别收取细胞培养上清和全细胞裂解物，利用测定的和细胞裂解物中的病毒滴度绘制病毒生长曲线，细胞培养上清中的病毒滴度在h 逐渐增高，在接毒后 72h 达到峰值（107.0TCID50/0.1 ml），96h 后逐渐下降；的病毒滴度也在接毒后 12h 逐渐上升，在接毒后 72h 达到最高（107.5TCID50/0.184h 后，开始缓慢下降。利用 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR，测定不同时间清及细胞裂解物中 FAdV-4 ON1 的基因组拷贝数，并将其绘制成基因组复制曲知，FAdV-4 在感染 LMH 细胞后上清中的病毒基因组复制动态与病毒滴度的，病毒基因组拷贝数在感染后 12-36h 不断增加，在感染后 48-84h 增幅变小， 120h，细胞裂解物中的病毒基因组拷贝数在感染后的 12h 一直保持平缓的上96h 上升缓慢，在 120h 达到最高（图 1-3、1-4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡心包积液-肝坏死综合征卵黄抗体的制备及应用效果观察[J]. 黄安群,陈理盾,李新正,肖曙光,靳双星,黄炎坤. 黑龙江畜牧兽医. 2017(02)
[2]Ⅰ型禽腺病毒在我国鸡群中的流行情况和防控措施[J]. 李敏,马玉峰,杨振. 兽医导刊. 2017(01)
[3]心包积水综合征流行现状及诊断防控[J]. 赵立宁. 中国动物保健. 2016(12)
[4]鸡腺病毒Ⅰ群血清4型的分离鉴定与防治[J]. 张玉霞,袁小远,徐怀英,李莉,王友令. 家禽科学. 2016(10)
[5]一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定[J]. 梁广成,高巍,谢泉,张建军,邵红霞,秦爱建,叶建强. 中国家禽. 2016(19)
[6]山东省血清4型禽腺病毒的分离鉴定[J]. 于可响,黄兵,凌红丽,庞运倩,王友令,李峰,亓丽红,宋敏训. 中国动物传染病学报. 2016(05)
[7]新发鸡心包积液综合征研究进展[J]. 李佳,文鹏程,韩振海,韩娥,肖红芝,郭永霞,褚军,张强,何诚. 中国兽医杂志. 2016(08)
[8]Ⅰ群禽腺病毒感染的流行情况与防控[J]. 刁有祥. 北方牧业. 2016(10)
[9]近期鸡群I群禽腺病毒的流行与防治[J]. 王慧,程小果,郭建友,陈申秒,程宁. 上海畜牧兽医通讯. 2016(02)
[10]不同接种途径对禽腺病毒在鸡胚中增殖的影响[J]. 邱丽叶,李慧昕,王娟,刘胜旺. 中国预防兽医学报. 2016(04)
硕士论文
[1]鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其流行病学调查[D]. 董婷婷.扬州大学 2011
[2]Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及其生物学特性研究[D]. 王小辉.扬州大学 2008
本文编号：3210828
【文章来源】：河南农业大学河南省
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
FAdV-4ON1毒株感染LMH细胞后不同时间点的形态变化（100x）
图 1-2 FAdV-4 实时荧光定量 PCR 标准曲线Figure.1-2 The standard curve for Real-time PCR of FAdV-4-4 ON1 在 LMH 细胞上的增殖动态究 FAdV-4 ON1 毒株在鸡肝癌上皮细胞中的复制动态，病毒接毒后 12、2、84、96、108 和 120 h，分别收取细胞培养上清和全细胞裂解物，利清和细胞裂解物中的病毒滴度绘制病毒生长曲线，细胞培养上清中的-48h 逐渐增高，在接毒后 72h 达到峰值（107.0TCID50/0.1 ml），96h 后中的病毒滴度也在接毒后 12h 逐渐上升，在接毒后 72h 达到最高（107.5毒 84h 后，开始缓慢下降。利用 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR，测上清及细胞裂解物中 FAdV-4 ON1 的基因组拷贝数，并将其绘制成基可知，FAdV-4 在感染 LMH 细胞后上清中的病毒基因组复制动态与一致，病毒基因组拷贝数在感染后 12-36h 不断增加，在感染后 48-84h到 120h，细胞裂解物中的病毒基因组拷贝数在感染后的 12h 一直保持8-96h 上升缓慢，在 120h 达到最高（图 1-3、1-4）。
图 1-2 FAdV-4 实时荧光定量 PCR 标准曲线Figure.1-2 The standard curve for Real-time PCR of FAdV-4 ON1 在 LMH 细胞上的增殖动态FAdV-4 ON1 毒株在鸡肝癌上皮细胞中的复制动态，病毒接毒后 12、24、36、84、96、108 和 120 h，分别收取细胞培养上清和全细胞裂解物，利用测定的和细胞裂解物中的病毒滴度绘制病毒生长曲线，细胞培养上清中的病毒滴度在h 逐渐增高，在接毒后 72h 达到峰值（107.0TCID50/0.1 ml），96h 后逐渐下降；的病毒滴度也在接毒后 12h 逐渐上升，在接毒后 72h 达到最高（107.5TCID50/0.184h 后，开始缓慢下降。利用 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR，测定不同时间清及细胞裂解物中 FAdV-4 ON1 的基因组拷贝数，并将其绘制成基因组复制曲知，FAdV-4 在感染 LMH 细胞后上清中的病毒基因组复制动态与病毒滴度的，病毒基因组拷贝数在感染后 12-36h 不断增加，在感染后 48-84h 增幅变小， 120h，细胞裂解物中的病毒基因组拷贝数在感染后的 12h 一直保持平缓的上96h 上升缓慢，在 120h 达到最高（图 1-3、1-4）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡心包积液-肝坏死综合征卵黄抗体的制备及应用效果观察[J]. 黄安群,陈理盾,李新正,肖曙光,靳双星,黄炎坤. 黑龙江畜牧兽医. 2017(02)
[2]Ⅰ型禽腺病毒在我国鸡群中的流行情况和防控措施[J]. 李敏,马玉峰,杨振. 兽医导刊. 2017(01)
[3]心包积水综合征流行现状及诊断防控[J]. 赵立宁. 中国动物保健. 2016(12)
[4]鸡腺病毒Ⅰ群血清4型的分离鉴定与防治[J]. 张玉霞,袁小远,徐怀英,李莉,王友令. 家禽科学. 2016(10)
[5]一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定[J]. 梁广成,高巍,谢泉,张建军,邵红霞,秦爱建,叶建强. 中国家禽. 2016(19)
[6]山东省血清4型禽腺病毒的分离鉴定[J]. 于可响,黄兵,凌红丽,庞运倩,王友令,李峰,亓丽红,宋敏训. 中国动物传染病学报. 2016(05)
[7]新发鸡心包积液综合征研究进展[J]. 李佳,文鹏程,韩振海,韩娥,肖红芝,郭永霞,褚军,张强,何诚. 中国兽医杂志. 2016(08)
[8]Ⅰ群禽腺病毒感染的流行情况与防控[J]. 刁有祥. 北方牧业. 2016(10)
[9]近期鸡群I群禽腺病毒的流行与防治[J]. 王慧,程小果,郭建友,陈申秒,程宁. 上海畜牧兽医通讯. 2016(02)
[10]不同接种途径对禽腺病毒在鸡胚中增殖的影响[J]. 邱丽叶,李慧昕,王娟,刘胜旺. 中国预防兽医学报. 2016(04)
硕士论文
[1]鸡包涵体肝炎病毒DNA探针的制备及其流行病学调查[D]. 董婷婷.扬州大学 2011
[2]Ⅰ群禽腺病毒的分离鉴定及其生物学特性研究[D]. 王小辉.扬州大学 2008
本文编号：3210828
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