布鲁氏菌的分型鉴定及其SOD蛋白的原核表达和多抗制备
发布时间:2021-06-11 21:51
布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的一种人畜共患的全身性传染病。布鲁氏菌的宿主范围主要包括家畜、野生动物和人等,该病的临床症状为长期发热、多汗、流产与不育、关节痛及肝脾肿大等。布鲁氏菌病的广泛流行,给世界各国的养殖业带来了巨大的经济损失,同时该病也给广大一线兽医和养殖者的健康带来了严重的威胁,因此了解该病的致病机制,做好该病的预防和监测工作是事关重要的。本实验通过PCR(polymerase chain reaction)分子生物学检测方法对16SrDNA、omp2b基因、Cu/Zn-SOD基因、omp28基因、omp10基因、omp25基因、virB10基因等的应用来对病料进行分离鉴定,又通过布鲁氏菌的分型方法AMOS–PCR对其进行分型。结果表明通过PCR方法检测的53份病料中,有50份检测结果为阴性,3份为阳性,检出率为5.66%,且经分型后发现2份为牛种布鲁氏菌,1份为羊种布鲁氏菌;而通过细菌分离培养的方法只分离到2份为阳性,检出率为3.77%;PCR方法比细菌分离方法的检出率高出1.89个百分点,细菌分离法和PCR检测方法的阳性符合率为1...
【文章来源】:浙江农林大学浙江省
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
牛奶样品中布鲁氏菌的分离培养
A PCR 的扩增结果,M 为 100bp 的 DNA marker,1、2、3、4、5 为部分需;B:AMOS-PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其:OMP2b PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需MP10 PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴P25 PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴定CR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴定菌为 PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴定菌为阴性结果,2、3、4 为鉴定阳性菌,1 为阴性对照,其它需鉴定菌为阴性;结果及序列比对分析将送上海英俊公司测序部测序的测序结果与 NCBI 数据库中已收录现,所有的 53 份病料中,16SrDNA PCR 方法可以鉴定出 3 株疑似图 1-2 各段目的基因的扩增Fig.1-2 Paragraphs purpose gene amplificationHG
图 2-1 Cu/Zn-SOD、OMP28 基因的扩增g.2-1 Amplification of Cu/Zn-SOD and OMP28 by PCRarker; 1: amplification of Cu/Zn-SOD by PCR using P1/P2; 2:amsing P3/P1 MM 2522bp7M 1 2 M 35300bp520500bp700bp600bp800bp
【参考文献】:
期刊论文
[1]布鲁氏菌比较基因组学研究进展[J]. 钟志军,于爽,徐杰,王玉飞,彭广能,陈燕芬,白耀霞,付思美,王同坤,汪舟佳,杜昕颖,黄克和,陈泽良. 中国人兽共患病学报. 2011(04)
[2]我国畜间布鲁氏菌病流行特点及原因分析[J]. 王功民,池丽娟,马世春,苏增华,陈泳,杨林. 中国动物检疫. 2010(07)
[3]布鲁氏菌外膜蛋白的研究进展[J]. 胡剑飞,崔步云,关平原,刘志国. 疾病监测. 2010(05)
[4]布鲁氏菌病的流行、发病原因及防治进展[J]. 周艳彬,柳晓琳. 辽宁医学院学报. 2010(01)
[5]布鲁氏菌病实验室诊断研究进展[J]. 高明华,张志琰,李跃,邓庆华,诺敏. 中国人兽共患病学报. 2010(01)
[6]中国布鲁氏菌病疫情形势及对策建议[J]. 殷文武,孙辉. 疾病监测. 2009(07)
[7]布鲁氏菌胞内生存机制研究进展[J]. 王玉飞,陈泽良,黄留玉. 微生物学通报. 2007(06)
[8]布鲁氏菌性脊柱炎的诊断和治疗[J]. 赵广民,李放,孙天胜,吴军,关凯,张志成. 中国脊柱脊髓杂志. 2007(06)
[9]布鲁氏菌病研究进展[J]. 毛开荣. 动物保健. 2006(09)
[10]布鲁氏菌bp26和OMP10基因的原核表达和鉴定[J]. 陈瑶,李明. 中国人兽共患病学报. 2006(04)
本文编号:3225347
【文章来源】:浙江农林大学浙江省
【文章页数】:59 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
牛奶样品中布鲁氏菌的分离培养
A PCR 的扩增结果,M 为 100bp 的 DNA marker,1、2、3、4、5 为部分需;B:AMOS-PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其:OMP2b PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需MP10 PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴P25 PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴定CR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴定菌为 PCR 的扩增结果,1、2、3 为鉴定阳性菌,4 为阴性对照,其它需鉴定菌为阴性结果,2、3、4 为鉴定阳性菌,1 为阴性对照,其它需鉴定菌为阴性;结果及序列比对分析将送上海英俊公司测序部测序的测序结果与 NCBI 数据库中已收录现,所有的 53 份病料中,16SrDNA PCR 方法可以鉴定出 3 株疑似图 1-2 各段目的基因的扩增Fig.1-2 Paragraphs purpose gene amplificationHG
图 2-1 Cu/Zn-SOD、OMP28 基因的扩增g.2-1 Amplification of Cu/Zn-SOD and OMP28 by PCRarker; 1: amplification of Cu/Zn-SOD by PCR using P1/P2; 2:amsing P3/P1 MM 2522bp7M 1 2 M 35300bp520500bp700bp600bp800bp
【参考文献】:
期刊论文
[1]布鲁氏菌比较基因组学研究进展[J]. 钟志军,于爽,徐杰,王玉飞,彭广能,陈燕芬,白耀霞,付思美,王同坤,汪舟佳,杜昕颖,黄克和,陈泽良. 中国人兽共患病学报. 2011(04)
[2]我国畜间布鲁氏菌病流行特点及原因分析[J]. 王功民,池丽娟,马世春,苏增华,陈泳,杨林. 中国动物检疫. 2010(07)
[3]布鲁氏菌外膜蛋白的研究进展[J]. 胡剑飞,崔步云,关平原,刘志国. 疾病监测. 2010(05)
[4]布鲁氏菌病的流行、发病原因及防治进展[J]. 周艳彬,柳晓琳. 辽宁医学院学报. 2010(01)
[5]布鲁氏菌病实验室诊断研究进展[J]. 高明华,张志琰,李跃,邓庆华,诺敏. 中国人兽共患病学报. 2010(01)
[6]中国布鲁氏菌病疫情形势及对策建议[J]. 殷文武,孙辉. 疾病监测. 2009(07)
[7]布鲁氏菌胞内生存机制研究进展[J]. 王玉飞,陈泽良,黄留玉. 微生物学通报. 2007(06)
[8]布鲁氏菌性脊柱炎的诊断和治疗[J]. 赵广民,李放,孙天胜,吴军,关凯,张志成. 中国脊柱脊髓杂志. 2007(06)
[9]布鲁氏菌病研究进展[J]. 毛开荣. 动物保健. 2006(09)
[10]布鲁氏菌bp26和OMP10基因的原核表达和鉴定[J]. 陈瑶,李明. 中国人兽共患病学报. 2006(04)
本文编号:3225347
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