小花棘豆生物碱对小白鼠免疫功能及α-甘露糖苷酶基因表达的影响

发布时间：2021-06-13 16:05

　　研究小花棘豆的中毒机理,用索氏提取法从小花棘豆中提取出了苦马豆素（SW）和喹诺里西啶类生物碱,并通过气相色谱仪鉴定了SW的纯度,用SW、喹诺里西啶类生物碱及两类生物碱的混合物对小白鼠进行攻毒,通过临床症状观察,免疫器官脏器指数检查,血液常规指标检查（红细胞、白细胞、粒细胞、淋巴细胞、血红蛋白）,病理组织学观察,淋巴细胞增殖功能、T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+表达率及CD4+/CD8+比值的测定,血清α-甘露糖苷酶活性及肝脏a-甘露糖苷酶基因相对表达量的测定,综合评价小花棘豆的中毒机理,获得如下结果：（1）通过索氏提取法从小花棘豆中提取出了SW和喹诺里西啶类生物碱,得到1.47gSW的结晶,经过气相色谱检测结晶中SW的含量为96.25%,可供试验使用。（2）给小鼠灌服不同剂量SW、喹诺里西啶类生物碱及其混合生物碱,低剂量的SW能够不同程度的提高小白鼠外周血液中红细胞、白细胞、粒细胞、淋巴细胞数目及血红蛋白的含量,高剂量的SW和喹诺里西啶类生物碱能够显著的降低这些细胞的数目。病理组织学检查发现,各生物碱组小白鼠的肝脏、脾脏、脑、肾脏均出现了不同程度的病变。（3）低剂量的SW能够提高动物机... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
1 引言
    1.1 小花棘豆的研究现状
        1.1.1 小花棘豆的分布范围
        1.1.2 小花棘豆中毒的临床症状及病理变化
        1.1.3 小花棘豆毒性成分的探究
        1.1.4 小花棘豆中毒的治疗
    1.2 小花棘豆生物碱的研究现状
        1.2.1 苦马豆素的研究现状
        1.2.2 喹诺里西啶类生物碱的研究现状
    1.3 α-甘露糖苷酶的研究进展
        1.3.1 α-甘露糖苷酶的分类
        1.3.2 α-甘露糖苷酶在糖基化过程中的作用
        1.3.3 α-甘露糖苷酶在成熟阶段的作用
    1.4 本研究的目的和意义
2 小花棘豆生物碱的提取及其检测
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果
        2.2.1 小花棘豆生物碱的提取结果
        2.2.2 薄层层析检测结果
        2.2.3 气相色谱检查结果
    2.3 讨论
        2.3.1 小花棘豆生物碱的提取
        2.3.2 薄层层析检测
        2.3.3 气相色谱检测
    2.4 小结
3 小花棘豆生物碱对小白鼠免疫毒性的研究
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料
        3.1.2 试验方法
        3.1.3 数据处理
    3.2 结果
        3.2.1 临床症状观察
        3.2.2 免疫器官脏器指数结果
        3.2.3 血液常规指标检测结果
        3.2.4 病理组织形态学观察结果
    3.3 讨论
        3.3.1 小花棘豆生物碱剂量的确定
        3.3.2 临床症状
        3.3.3 小花棘豆生物碱对小白鼠脏器指数的影响
        3.3.4 小花棘豆生物碱对血常规指标的影响
        3.3.5 病理组织学检测
    3.4 小结
4 小花棘豆生物碱对小白鼠特异性细胞免疫功能的影响
    4.1 材料与方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验方法
        4.1.3 数据处理
    4.2 结果
        4.2.1 小白鼠血液淋巴细胞的收集及培养结果
        4.2.2 T淋巴细胞增殖的测定结果
        4.2.3 T淋巴细胞亚群CD_4~+、CD_8~+表达率及CD_4~+/CD_8~+的比值测定结果
    4.3 讨论
        4.3.1 对T淋巴细胞增殖性反应的影响
        4.3.2 对T淋巴细胞亚群的影响
    4.4 小结
5 小花棘豆生物碱对小白鼠α-甘露糖苷酶活性及其肝脏α-甘露糖苷酶基因相对表达量的影响
    5.1 材料与方法
        5.1.1 试验材料
        5.1.2 试验方法
        5.1.3 数据处理
    5.2 结果
        5.2.1 α-甘露糖苷酶活性的测定结果
        5.2.2 普通PCR扩增电泳结果
        5.2.3 α-甘露糖苷酶基因表达的结果
        5.2.4 基因测序结果
    5.3 讨论
    5.4 小结
6 结论
致谢
参考文献
附录
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]苦马豆素抑制α-甘露糖苷酶的剂量效应关系[J]. 孔祥雅,荆新堂,张丽慧,李勤凡,郭伟.  动物医学进展. 2011(01)
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[3]气相色谱-甲基化-α-D-甘露糖苷内标法测定变异黄芪中的苦马豆素[J]. 赵兴华,崔忠华,耿果霞,王建华,张志敏,宋毓民,刘志滨.  色谱. 2007(05)
[4]抗菌肽对肉鸡外周血T淋巴细胞转化的影响[J]. 王静,李同树.  家畜生态学报. 2007(03)
[5]冬虫夏草提取液对实验性病毒性心肌炎小鼠免疫功能的影响[J]. 李锋,高兴玉,饶邦复,刘利,董波,崔连群.  细胞与分子免疫学杂志. 2006(03)
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[10]冰川棘豆对家兔的毒性研究[J]. 李勤凡,王建华,耿果霞,闫小兵,王筱婷.  畜牧兽医学报. 2004(06)

硕士论文
[1]山羊小花棘豆中毒的药物预防试验[D]. 亢和平.内蒙古农业大学 2011
[2]小花棘豆主要有毒成分对小白鼠中枢神经系统中毒机理的研究[D]. 耿久荣.内蒙古农业大学 2005
[3]小花棘豆生物碱成分系统分析及其活性研究[D]. 陈绍淑.西北农林科技大学 2004



本文编号：3227853