邻苯二甲酸二乙基己酯诱导的过氧化损伤对认知相关蛋白的影响

发布时间：2021-06-14 22:38

　　邻苯二甲酸二乙基己酯（diethylhexyl phthalate, DEHP）是目前使用最为广泛,年产量最大的一种塑化剂。研究表明,DEHP能通过吞咽、呼吸和皮肤直接接触等方式进入人体和动物体内,并可对生殖系统、血液、肾脏、肝脏等造成损害。此外,DEHP对神经系统的结构和功能的影响也有研究,一项针对学龄儿童的调查研究表明,儿童尿液中邻苯二甲酸酯代谢物含量与其智力的水平呈负相关；但是DEHP影响神经系统认知功能的具体机制并不清楚。本文以小鼠的神经瘤细胞为研究对象,在细胞水平上探究了DEHP诱导的过氧化损伤对微管相关蛋白tau、蛋白激酶A（Protein kinase A, PKA）、环腺苷酸反应原件结合蛋白（cAMP response elementbinding protein,CREB）等认知功能相关蛋白水平和功能的影响,以期为DEHP对学习认知功能影响的机制性研究提供一些借鉴和参考。本实验中,我们用500μM DEHP处理小鼠的神经瘤细胞（N2a）24小时,或者用维生素E（Vitamin E,VitE）（25、50μM）预处理细胞1小时后,再用DEHP （500μM）处理细胞24... 

【文章来源】：华中师范大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 引言
    1.1 邻苯二甲酸二乙基己酯(diethylhexyl phthalate,DEHP)的简介
    1.2 DEHP与过氧化损伤的关系
    1.3 过氧化损伤与认知功能的关系
    1.4 微管相关蛋白tau及其生物学功能与认知功能的关系
    1.5 突触前蛋白(Synapsin-1)和突触后致密蛋白(PSD95)在认知功能中的作用
    1.6 PKA-CREB信号通路在认知功能中的作用
    1.7 研究的目的和意义
2 材料和方法
    2.1 主要试剂
    2.2 主要仪器
    2.3 小鼠神经瘤细胞(N2a)的传代培养和药物处理
    2.4 收集样品
    2.5 BCA法测定蛋白浓度
    2.6 检测DEHP对细胞过氧化损伤的作用
        2.6.1 细胞内总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力的测定
        2.6.2 细胞内丙二醛(MDA)含量的测定
        2.6.3 细胞内活性氧(ROS)含量的测定(DCF法)
    2.7 免疫印迹(Western blotting)
    2.8 统计学分析
3 结果
    3.1 不同浓度的DEHP对N2a细胞过氧化损伤的影响
    3.2 VitE对DEHP诱导的N2a细胞过氧化损伤的阻止作用
    3.3 DEHP对N2a细胞形态的影响
    3.4 DEHP对N2a细胞内微管相关蛋白tau磷酸化修饰的影响
    3.5 DEHP对微管相关蛋白tau与微管结合功能的影响
    3.6 DEHP对细胞内GSK-3β总量及活性的影响
    3.7 DEHP对突触前蛋白(Synapsin-1)和突触后致密蛋白(PSD95)水平的影响
    3.8 DEHP对cAMP反应元件结合蛋白(CREB)含量和活性的影响
    3.9 DEHP对细胞内蛋白激酶A(PKA)活性的影响
4 讨论
    4.1 DEHP能诱导过氧化损伤的发生以及对神经元形态的影响
    4.2 DEHP诱导的过氧化损伤对tau蛋白磷酸化水平和生理功能的影响及其机制
    4.3 DEHP诱导的过氧化损伤对突触蛋白(Synapsin-1和PSD95)的影响
    4.4 DEHP诱导的过氧化损伤对PKA-CREB信号通路的影响
5 结论
参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]雌激素神经保护作用机制:线粒体功能的调节[J]. 郭家彬,铁璐,Diana N Krause,Sue P Duckles,李学军.  生理科学进展. 2010(03)



本文编号：3230354