H9N2禽流感病毒诱导抗病毒蛋白IFITM1和IFIT1在内皮细胞中表达模式及机制的研究

发布时间：2021-06-15 15:05

　　H9N2亚型禽流感病毒在家禽中广泛流行,宿主范围已从禽类扩大到了哺乳动物。内皮细胞被认为在病毒感染期间通过表达多种蛋白分子参与机体的固有免疫反应。具有广谱抗病毒功能的干扰素诱导蛋白IFITM1和IFIT1可以被病毒诱导表达,并通过多种机制抑制病毒的感染和复制。因此,探究H9N2禽流感病毒诱导内皮细胞表达IFITM1和IFIT1的模式及机制,以及诱导的蛋白分子对内皮细胞抗病毒状态的影响具有重要意义。目前,H9N2禽流感病毒诱导IFITM1和IFIT1在内皮细胞上表达的模式、机制,以及诱导的IFITM1、IFIT1对内皮细胞抗病毒反应的影响尚不清楚。为解决这些问题,本研究使用H9N2禽流感病毒A/Chicken/Hebei/4/2008（Ck/HB/4/08）)为试验毒株,并用该毒株制作灭活病毒颗粒。以人脐静脉内皮细胞（HUVECs）为主要研究对象来探讨IFITM1和IFIT1的表达情况、表达模式、表达机制以及对细胞抗病毒能力的影响,并选择人支气管上皮细胞（BEAS-2Bs）为对照细胞;以BALB/c小鼠为模型动物来探讨灭活H9N2禽流感病毒颗粒体内诱导IFITM1表达的情况。为探究IFI... 

【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：102 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图I-2病衡诱导ISGs衰达的棋式图(MichaelS.Diamond,ete1.Naturereviews,2013)

２．４．２?ＨＵＶＥＣｓ和ＢＥＡＳ－２Ｂｓ细胞月莫表面ＳＡ２－３Ｇａｌ表达情况??由于Ａ１Ｖ优先结合ＳＡ２－３Ｇａｌ，因此，我们使用免疫荧光的方法检测两种细胞膜表面ＳＡ２－３Ｇａｌ??的表达情况。如图２－２所示，ＨＵＶＥＣｓ和ＢＥＡＳ－２Ｂｓ细胞膜上均存在ＳＡ２－３Ｇａｈ由荧光阳性的面??积可以看出ＢＥＡＳ－２Ｂｓ细胞膜上ＳＡ２－３Ｇａ丨数量多于ＨＵＶＥＣｓ细胞膜（图２－２Ｃ）。??Ｍｌ＾ｌ?Ｌｉ??＾ｍｍｍ??图２－２?ＨＵＶＥＣｓ和ＢＥＡＳ－２Ｂｓ细朐膜表面ＳＡ２－３Ｇａ丨表达情况??Ａ为ＨＵＶＥＣｓ细胞膜ＳＡ２－３Ｇａｌ表达情况，Ｂ为ＢＥＡＳ－２Ｂｓ细胞膜表面ＳＡ２－３Ｇａ丨表达情况，Ｃ为荧光阳性面积占??图片总面积的百分比。??Ｆｉｇ．?２－２?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡ２－３Ｇａｌ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｓｕｒｆａｃｅ?ｏｆ?ＨＵＶＥＣｓ?ａｎｄ?ＢＥＡＳ－２Ｂｓ??Ａ：?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＳＡ２－３Ｇａｌ?ｏｎ?ＨＵＶＥＣｓ，?Ｂ：?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆＳＡ２－３ＧａＩ?ｏｎ?ＢＥＡＳ－２Ｂｓ．?Ｃ：?Ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ?ｏｆ?ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｓｔａｉｎｉｎｇ??ａｒｅａ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ａｒｅａ?ｏｆ?ｐｉｃｔｕｒｅ．??１９??

ＭＯＩ?（ＰＦＵ／ｃｅｌｌ）?Ｔｉｍｅ?（ｈｏｕｒ）??图２－５?Ｈ９Ｎ２?ＡＩＶ在ＢＥＡＳ－２Ｂｓ内的复制情况??Ａ为用不同ＭＯ丨的病毒接种２４?ｈ后细胞上清中的病毒滴度，Ｂ为用ＭＯ丨值为０．２和５的病毒接种后不同时间点??上清中的病毒滴度。??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｈ９Ｎ２?ＡＩＶ?ｉｎ?ＢＥＡＳ－２Ｂｓ??Ａ：?Ｖｉｒｕｓ?ｔｉｔｅｒｓ?ｉｎ?ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ?ａｔ?２４?ｈ?ｐｏｓｔｉｎｆｅｃｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ＭＯＩ，?Ｂ：?Ｖｉｒｕｓ?ｔｉｔｅｒｓ?ｉｎ?ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｔｉｍｅ??ｐｏｉｎｔｓ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｎ?ｗｉｔｈ?ａ?ＭＯＩ?ｏｆ?０．２?ａｎｄ?５．??２１??

【参考文献】：
期刊论文
[1]IFIT家族基因抑制A型流感病毒WSN毒株的复制和转录[J]. 侯力丹,李晶,瞿洪仁,杨利敏,陈亚军,杜茜茜,刘文军.  生物工程学报. 2015(01)



本文编号：3231280