不同冷冻保护剂对犊牛睾丸组织冷冻保存效果的研究

发布时间：2021-06-15 18:33

　　睾丸组织的冷冻保存为雄性生殖细胞的保存、珍稀濒危物种的保护以及人类辅助生殖技术等提供了新的途径。冷冻睾丸组织能够避免酶解造成细胞存活率降低，机械分离破坏细胞间连接造成细胞缺氧加重等影响。但与常见的细胞冷冻保存相比较，冷冻保存睾丸组织结构和功能复杂，技术难度较大。为探索不同冷冻保护剂对犊牛睾丸组织的冷冻保护效果，筛选犊牛睾丸组织冷冻保存合适的冷冻保护剂，本试验选择二甲基亚砜、甘油、丙二醇、蔗糖和葡萄糖原花青素作为犊牛睾丸组织冷冻保存的保护剂，对8月龄犊牛睾丸组织进行冷冻保存，检测冷冻前后犊牛睾丸组织内一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和睾酮等生化指标的变化以及细胞活率，揭示影响睾丸组织冷冻保存效果的关键因素，旨在初步建立犊牛睾丸组织低损伤冷冻保存体系，为犊牛睾丸组织冷冻保存的进一步研究提供依据。主要研究结果如下：1.新鲜犊牛睾丸组织中NO含量为0.45±0.02μmol/mg，NOS活性为0.86±0.05U/mg，SOD活性为8.85±0.3U/mg，MDA含量为1.95±0.1nmol/mg，睾酮释放量为10.37±1.2nmol/l... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
文献综述
    第一章 睾丸组织冷冻保存概述
        1.1 睾丸组织冷冻保存的意义
        1.2 国内外睾丸组织冷冻的研究进展
        1.3 冷冻保护剂的研究进展
        1.4 冷冻保护剂的保护机制
        1.5 睾丸组织冷冻效果评估的研究进展
        1.6 睾丸组织冷冻保存技术的应用前景
        1.7 本研究的目的和意义
试验研究
    第二章 不同冷冻保护剂对睾丸组织冷冻-解冻后细胞活率的影响
        2.1 材料和方法
            2.1.1 材料
            2.1.2 方法
        2.2 结果与分析
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第三章 不同冷冻保护剂对睾丸组织冷冻解冻后 NO、NOS 的影响
        3.1 材料与方法
            3.1.1 材料
            3.1.2 方法
        3.2 结果与分析
            3.2.1 新鲜睾丸组织内 NO 含量和 NOS 活性
            3.2.2 不同冷冻保护剂对睾丸组织中 NO 含量的影响
            3.2.3 不同冷冻保护剂对睾丸组织中 NOS 活性的影响
        3.3 讨论
        3.4 小结
    第四章 不同冷冻保护剂对睾丸组织冷冻-解冻后 SOD、MDA 的影响
        4.1 材料与方法
            4.1.1 材料
            4.1.2 方法
        4.2 结果与分析
            4.2.1 新鲜睾丸组织中 SOD 活性和 MDA 含量
            4.2.2 不同冷冻保护剂对犊牛睾丸组织中 SOD 活性的影响
            4.2.3 不同冷冻保护剂对犊牛睾丸组织中 MDA 的影响
        4.3 讨论
        4.4 小结
    第五章 不同冷冻保护剂对犊牛睾丸组织冷冻解冻后睾酮释放量的影响
        5.1 材料与方法
            5.1.1 材料
            5.1.2 试验方法
        5.2 结果与分析
            5.2.1 新鲜睾丸组织匀浆液中睾酮释放量的测定
            5.2.2 解冻后睾丸组织中睾酮释放量的测定
        5.3 讨论
        5.4 小结
结论
进一步研究内容
参考文献
附录Ⅰ 主要溶液的配制
附录Ⅱ 犊牛睾丸组织的冷冻保存方法
附录Ⅲ 犊牛睾丸单细胞悬液的制备
附录Ⅳ 组织匀浆液制备
缩略词
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
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[2]原花青素对氨基脲染毒小鼠睾丸组织损伤的修复作用[J]. 袁萍,邹学敏,朱乐玫,肖红.  微量元素与健康研究. 2013(05)
[3]葡萄籽原花青素对小鼠睾丸扭转复位后生精功能的保护作用[J]. 尚瑞,郑新民,夏志平,张琳,郑雪皎.  中华男科学杂志. 2013(05)
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[5]雷公藤多苷对青春期大鼠睾丸超微结构及睾酮的影响[J]. 陆彪,崔瑞琴,冷倩.  时珍国医国药. 2012(12)
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[9]黄酮类化合物抗氧化及其作用机制的研究进展[J]. 曹志超,顾翔,苏佩清.  实用临床医药杂志. 2009(13)
[10]比较四种冷冻保护剂对大鼠睾丸组织结构的保护作用[J]. 唐立新,江芳,范双喜,蒋汉琼,王奇玲,马春杰,邓顺美,文任乾.  中国男科学杂志. 2009(04)

硕士论文
[1]不同冷冻保护剂对未成熟小鼠睾丸组织的保护作用[D]. 王晓英.河北医科大学 2010



本文编号：3231564