腺嘌呤诱导小鼠精原干细胞移植受体模型的建立

发布时间：2021-06-18 11:49

　　精原干细胞作为一类能够自我更新，并且能够分化为各级生精细胞的成体干细胞，移植到去除内源性生殖细胞的受体动物睾丸中，也具有继续分化的潜能。移植受体的制备是精原干细胞移植的关键，也是移植成功的条件和前提。腺嘌呤在医学上普遍应用于肿瘤的治疗，同时它也常作为诱发慢性肾衰竭动物模型的药物。近期，研究者发现腺嘌呤能够引起雄性动物精子数目的减少。本研究通过腺嘌呤灌胃给药的方式分别处理大鼠和小鼠，检测大鼠和小鼠的体重、睾丸和附睾指数以及组织形态学变化等，试图构建大鼠和小鼠的雄性不育动物模型，并通过小鼠精原干细胞移植的方式对不育模型进行验证，旨在通过腺嘌呤灌胃给药的方式建立小鼠精原干细胞移植的良好受体。主要研究结果如下：（1）腺嘌呤诱导雄性不育大鼠模型。将15只2-3月龄雄性大鼠随机分为三组，对照组、150mg/kg、300mg/kg腺嘌呤实验组。连续灌胃三周后取睾丸观察，发现实验组睾丸变小，300mg/kg实验组变化更明显。H.E.染色发现150mg/kg实验组睾丸间质细胞减少，但是大部分曲细精管存在精子。300mg/kg实验组大鼠睾丸曲细精管内精子和生精细胞大量减少，呈现空泡状，表明300mg/kg... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 腺嘌呤诱导雄性不育模型的研究进展
        1.1.1 腺嘌呤的生物学特性
        1.1.2 腺嘌呤诱导雄性不育模型及其作用机制
    1.2 精原干细胞的研究进展
        1.2.1 精原干细胞的生物学特性
        1.2.2 精原干细胞的分离、纯化、培养
        1.2.3 精原干细胞移植的研究进展
    1.3 本研究的目的及意义
第二章 腺嘌呤诱导雄性不育大鼠模型的建立
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验动物及细胞系
        2.1.2 实验试剂
        2.1.3 实验仪器
        2.1.4 腺嘌呤灌胃大鼠
        2.1.5 腺嘌呤灌胃后大鼠体重和脏器指数检测
        2.1.6 腺嘌呤灌胃后大鼠组织形态学鉴定
        2.1.7 质粒扩繁及慢病毒包装
        2.1.8 小鼠精原干细胞的分离纯化
        2.1.9 小鼠精原干细胞慢病毒转导
        2.1.10 小鼠精原干细胞的移植
        2.1.11 小鼠精原干细胞移植后受体大鼠检测
    2.2 结果
        2.2.1 大鼠体重变化
        2.2.2 大鼠睾丸体积变化
        2.2.3 大鼠脏器指数变化
        2.2.4 大鼠睾丸组织形态学鉴定
        2.2.5 小鼠精原干细胞的分离纯化
        2.2.6 慢病毒包装及转导小鼠精原干细胞
        2.2.7 小鼠精原干细胞的移植
        2.2.8 小鼠精原干细胞移植后受体检测
    2.3 讨论
        2.3.1 腺嘌呤诱导雄性不育大鼠模型
        2.3.2 慢病毒包装及转导精原干细胞
        2.3.3 精原干细胞的移植
    2.4 小结
第三章 腺嘌呤诱导雄性不育小鼠模型的建立
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 实验试剂
        3.1.3 实验仪器
        3.1.4 腺嘌呤灌胃小鼠
        3.1.5 腺嘌呤灌胃后小鼠体重和脏器指数检测
        3.1.6 腺嘌呤灌胃后小鼠组织形态学鉴定
        3.1.7 小鼠精原干细胞的分离纯化
        3.1.8 小鼠精原干细胞的移植
        3.1.9 小鼠精原干细胞移植后受体小鼠检测
    3.2 结果
        3.2.1 小鼠存活率
        3.2.2 小鼠体重变化
        3.2.3 小鼠睾丸体积变化
        3.2.4 小鼠脏器指数变化
        3.2.5 小鼠睾丸组织形态学鉴定
        3.2.6 小鼠睾丸曲细精管空管率
        3.2.7 小鼠精原干细胞的分离纯化
        3.2.8 小鼠精原干细胞的移植
        3.2.9 小鼠精原干细胞移植后受体检测
    3.3 讨论
    3.4 小结
结论
参考文献
缩略词表
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型实验研究[J]. 李蕊,刘曼丽,田心,马亮,南亚昀,周大伟,李臻,马静.  安徽中医学院学报. 2010(02)
[2]腺嘌呤致大鼠少精子症模型的实验研究[J]. 葛争艳,金龙,河福金,董小霞,李宏坤,刘建勋.  中国计划生育学杂志. 2009(11)
[3]大鼠灌胃给药方法的研究[J]. 冯雪建,卢占军,高登慧.  实验动物科学与管理. 2006(04)
[4]六味地黄汤对雄性大鼠生殖系统的影响[J]. 凌庆枝,敖宗华,许泓瑜,许正宏,尹光耀,陶文沂.  中成药. 2004(07)
[5]常用小型实验动物灌胃给药技术方法介绍[J]. 赵明德.  泸州医学院学报. 2004(03)
[6]补肾益精方对生精障碍模型小鼠的促生精作用机制研究[J]. 鲁维德,边应孝.  四川中医. 2004(06)
[7]Advances in mammalian spermatogonial stem cell transplantation[J]. ZHANG Xueming 1 *, LI Dexue 2, YUE Zhanpeng 1, LI Lingling 3 and YU Jiaao 4(1. Faculty of Military Veterinary,Quarter-Master University of PLA,Changchun 130062,China;2. Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100085,China;3. Qian Wei Hospital of Jilin Province,Changchun 130021,China;4. The First Hospital of Jilin University,Changchun 130021,China).  Progress in Natural Science. 2004(06)
[8]腺嘌呤致雄性不育和慢性肾衰大鼠模型的相关性研究[J]. 黄天伦,夏明珠,任开明.  中国男科学杂志. 2003(03)
[9]腺嘌呤制作肾阳虚型慢性肾功能衰竭大鼠模型的生化研究[J]. 傅晓晴,林若勤,武一曼,胡望平,陈敏,徐翔宇,吴绍銮,陈秀芳.  福建中医学院学报. 2003(01)
[10]补肾中药对肾阳虚大鼠垂体-睾丸超微结构的影响[J]. 宋春风,马洪骏,吕佩源,尹桂山.  中医药研究. 2001(04)



本文编号：3236609