山羊骨骼肌特异性基因α-actin启动子驱动的Fat-1表达载体及其构建方法

发布时间：2021-06-19 20:20

　　试验旨在构建山羊骨骼肌特异性基因α-actin启动子驱动的Fat-1表达载体。将Fat-1基因克隆入pEGFP-N1载体,构建成为pEGFPN1-Fat-1载体;插入CMV增强子和骨骼肌特异性基因α-actin启动子,构建成为α-actin promoter-pEGFPN1-Fat-1表达载体;最后通过流式细胞仪检测转Fat-1基因对山羊耳成纤维细胞周期和凋亡的影响。双酶切和测序证实,已成功构建了肌肉组织特异性表达载体α-actin promoter-pEGFPN1-Fat-1;与对照组相比,转Fat-1基因促进羊耳成纤维细胞增殖,抑制凋亡。试验结果为动物转基因工程的研究和应用提供了参考依据。 

【文章来源】：畜牧与兽医. 2020,52(12)北大核心

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【部分图文】：

骨骼肌特异性基因α-actin启动子驱动的Fat-1基因表达载体的构建示意图

将切胶回收后的Fat-1和线性化pEGFP-N1的cDNA末端补平,进行平末端连接。pEGFPN1-Fat-1中Fat-1基因序列与EGFP连接处正确(图4)。图3 BamHⅠ酶切pEGFP-N1质粒

BamHⅠ酶切pEGFP-N1质粒


本文编号：3238476