鸭坦布苏病毒FSD1株的生物学特性研究及基因组序列分析
发布时间：2021-06-25 10:09
鸭坦布苏病毒病自2010年在我国首次爆发以来，由于其发病快、引起鸭群产蛋率下降显著，给我国养鸭业造成了巨大的经济损失。目前该病已成为我国主要鸭病之一。本文对鸭坦布苏病毒FSD1分离株的生物学特性进行了系统研究，并对其基因组序列进行了测定与进化分析。在2012年从山东发病的鸭群中分离到一株鸭坦布苏病毒，命名为FSD1。通过生物学特性分析，发现该病毒不能凝集鸡、鸭、鹅、鸽和猪的红细胞，对氯仿、酸等敏感，不耐热。电镜观察：病毒粒子呈圆形或椭圆形，直径大小约为50nm。鸭坦布苏病毒FSD1毒株在鸡胚、鸭胚上生长良好，都可出现病变；胚体毒盲传三代以后在DEF细胞上可以产生明显的CPE，但是在CEF细胞上不会产生CPE。雏鸭动物回归试验显示，通过颈部皮下注射能复制出该病典型的症状和病变。全基因组序列测定显示：FSD1毒株基因组全长均为10,990nt，其中包括一个长度142nt的5’非编码区、长度10,230nt的开放阅读框（ORF）和长度为618nt的3’非编码区；ORF区域编码3410个氨基酸，编码的多聚蛋白包括10个蛋白，三个结构蛋白（C、PrM、E），另外还包括七个非结构蛋白（NS1、NS...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
黄病毒基因组结构示意图
成了全基因组或聚蛋白基因序列分析。傅光华等对我国部分地区2010～2011年间的鸭坦布苏流感及分子变异进行研究，不同毒株NS5基因的同源性在98%异世，而与2010年前分离到的鸡源及蚊媒DTMUV的同源性介于83.8%～85.8%之间，所有的2010年后分离到的病毒位于同一进化分支上，这表明该病毒未发生明显变异（傅光华等，2012）。利用DNAstar分析软件对分离到的6株病毒的多聚蛋白进行氨基酸序列对比发现同源性都在99.0%以上，几乎没有发生变异。又用Beast软件对坦布苏病毒E基因与其他几种黄病毒进行进化发现，鸭坦布苏病毒不同毒株可分为2个基因型，2010年分离到的4个毒株均为Ⅰ型，Ⅱ型包括2010～2012年分离株。而基因Ⅱ型的DTMUV又可细分为 Ⅱ a和 Ⅱ b两个亚型（于可响等，2013）。
3.1 病毒分离从收集的所有疑似病料中分离到一株鸭坦布苏病毒，随将该分离毒株命名为该分离株背景信息为：2012 年 4 月取自山东某种鸭场发病鸭的输卵管病料。该日龄种鸭突然出现明显的产蛋下降，同时采食量下降，饮水明显减少，产蛋率从速下降，几乎绝产。一周后个别鸭伴有神经症状。死亡鸭剖检可见肝脏明显的密布有点或片状出血点和出血斑；脾脏坏死；胰腺出血坏死；卵巢和输卵管有病料处理后接种 SPF 鸡胚和鸭胚分离毒，传至第 2 代后表现规律性的死亡间比较集中，多于 96h～144h 死亡，均能导致鸡胚和鸭胚死亡，死亡胚体均出现缩，胚体出现水肿，绒毛尿囊膜水肿、增厚。大多数胚体肝部出血或花斑样坏死部分严重的胚体全身尤其是头颈部位有明显的出血点。（鸭胚病变见图 3-1）。血试验结果显示：死亡胚尿囊液与 ND、H5AIV、H9AIV 和 EDS 阳性血清均无交
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭坦布苏病毒E基因环介导等温扩增检测方法的建立与应用[J]. 欧全宾,刁有祥,唐熠,高绪慧,于春梅. 中国兽医学报. 2013(09)
[2]鸭坦布苏病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 靳宇田,黄显明,许秀梅,尹秀凤,徐延伟,朱鹏,张小飞. 中国动物传染病学报. 2013(04)
[3]鸭坦布苏病毒TaqMan荧光定量PCR方法的优化[J]. 彭珊,闫丽萍,李国新,李雪松,滕巧泱,肖亚莉,何文兴,李泽君. 中国预防兽医学报. 2013(04)
[4]鹅源坦布苏病毒SHYG株的分离与鉴定[J]. 潘金金,邹晓艳,李鑫,宿春虎,柴茂,姜逸,胡艳芬,赵国,王彦红,石火英,陈素娟,彭大新. 中国农业科学. 2013(05)
[5]鸭坦布苏病毒研究进展[J]. 刘志刚,孙青松,姚蓉,刘冰心,晁行周,邹忠,刘立峰,吴彦,郑爱芳,赵苏红,金梅林. 中国动物传染病学报. 2013(01)
[6]1株鸭坦布苏病毒人工感染雏鸭的病理学研究[J]. 王友令,袁小远,杨金兴,于可响,徐怀英,张玉霞,艾武,秦卓明,李玉峰. 畜牧兽医学报. 2013(01)
[7]鹅源坦布苏病毒的分离及初步鉴定[J]. 施少华,傅光华,万春和,程龙飞,陈红梅,黄振洲,黄瑜. 中国兽医杂志. 2012(12)
[8]鹅源黄病毒的分离和初步鉴定[J]. 袁生,李金平,王敏儒,白挨泉,蒲文珺,张济培,彭巧丽,王辉,陈志伟,张浩吉. 中国畜牧兽医. 2012(09)
[9]鹅黄病毒JS804株的生物学特性[J]. 钮慧敏,李银,黄欣梅,赵东敏,刘宇卓,张敬峰,刘飞,李彤彤,周晓波,李祥瑞. 江苏农业学报. 2012(02)
[10]虫媒黄病毒NS5蛋白的生物学功能研究进展[J]. 周希珍,赵慧,高岚,秦成峰. 军事医学. 2012(01)
硕士论文
[1]鸭坦布苏病毒的分子生物学快速诊断与E蛋白基因变异性分析[D]. 张帅.山东农业大学 2012
[2]鸭坦布苏病毒巢式PCR检测方式及其重组E蛋白间接ELISA诊断方法的研究[D]. 郝明飞.山东农业大学 2012
[3]黄病毒通用引物RT-PCR以及Real-Time PCR方法的建立并应用于蚊虫检测[D]. 周晓俊.第二军医大学 2007
本文编号：3249017
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
黄病毒基因组结构示意图
成了全基因组或聚蛋白基因序列分析。傅光华等对我国部分地区2010～2011年间的鸭坦布苏流感及分子变异进行研究，不同毒株NS5基因的同源性在98%异世，而与2010年前分离到的鸡源及蚊媒DTMUV的同源性介于83.8%～85.8%之间，所有的2010年后分离到的病毒位于同一进化分支上，这表明该病毒未发生明显变异（傅光华等，2012）。利用DNAstar分析软件对分离到的6株病毒的多聚蛋白进行氨基酸序列对比发现同源性都在99.0%以上，几乎没有发生变异。又用Beast软件对坦布苏病毒E基因与其他几种黄病毒进行进化发现，鸭坦布苏病毒不同毒株可分为2个基因型，2010年分离到的4个毒株均为Ⅰ型，Ⅱ型包括2010～2012年分离株。而基因Ⅱ型的DTMUV又可细分为 Ⅱ a和 Ⅱ b两个亚型（于可响等，2013）。
3.1 病毒分离从收集的所有疑似病料中分离到一株鸭坦布苏病毒，随将该分离毒株命名为该分离株背景信息为：2012 年 4 月取自山东某种鸭场发病鸭的输卵管病料。该日龄种鸭突然出现明显的产蛋下降，同时采食量下降，饮水明显减少，产蛋率从速下降，几乎绝产。一周后个别鸭伴有神经症状。死亡鸭剖检可见肝脏明显的密布有点或片状出血点和出血斑；脾脏坏死；胰腺出血坏死；卵巢和输卵管有病料处理后接种 SPF 鸡胚和鸭胚分离毒，传至第 2 代后表现规律性的死亡间比较集中，多于 96h～144h 死亡，均能导致鸡胚和鸭胚死亡，死亡胚体均出现缩，胚体出现水肿，绒毛尿囊膜水肿、增厚。大多数胚体肝部出血或花斑样坏死部分严重的胚体全身尤其是头颈部位有明显的出血点。（鸭胚病变见图 3-1）。血试验结果显示：死亡胚尿囊液与 ND、H5AIV、H9AIV 和 EDS 阳性血清均无交
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭坦布苏病毒E基因环介导等温扩增检测方法的建立与应用[J]. 欧全宾,刁有祥,唐熠,高绪慧,于春梅. 中国兽医学报. 2013(09)
[2]鸭坦布苏病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 靳宇田,黄显明,许秀梅,尹秀凤,徐延伟,朱鹏,张小飞. 中国动物传染病学报. 2013(04)
[3]鸭坦布苏病毒TaqMan荧光定量PCR方法的优化[J]. 彭珊,闫丽萍,李国新,李雪松,滕巧泱,肖亚莉,何文兴,李泽君. 中国预防兽医学报. 2013(04)
[4]鹅源坦布苏病毒SHYG株的分离与鉴定[J]. 潘金金,邹晓艳,李鑫,宿春虎,柴茂,姜逸,胡艳芬,赵国,王彦红,石火英,陈素娟,彭大新. 中国农业科学. 2013(05)
[5]鸭坦布苏病毒研究进展[J]. 刘志刚,孙青松,姚蓉,刘冰心,晁行周,邹忠,刘立峰,吴彦,郑爱芳,赵苏红,金梅林. 中国动物传染病学报. 2013(01)
[6]1株鸭坦布苏病毒人工感染雏鸭的病理学研究[J]. 王友令,袁小远,杨金兴,于可响,徐怀英,张玉霞,艾武,秦卓明,李玉峰. 畜牧兽医学报. 2013(01)
[7]鹅源坦布苏病毒的分离及初步鉴定[J]. 施少华,傅光华,万春和,程龙飞,陈红梅,黄振洲,黄瑜. 中国兽医杂志. 2012(12)
[8]鹅源黄病毒的分离和初步鉴定[J]. 袁生,李金平,王敏儒,白挨泉,蒲文珺,张济培,彭巧丽,王辉,陈志伟,张浩吉. 中国畜牧兽医. 2012(09)
[9]鹅黄病毒JS804株的生物学特性[J]. 钮慧敏,李银,黄欣梅,赵东敏,刘宇卓,张敬峰,刘飞,李彤彤,周晓波,李祥瑞. 江苏农业学报. 2012(02)
[10]虫媒黄病毒NS5蛋白的生物学功能研究进展[J]. 周希珍,赵慧,高岚,秦成峰. 军事医学. 2012(01)
硕士论文
[1]鸭坦布苏病毒的分子生物学快速诊断与E蛋白基因变异性分析[D]. 张帅.山东农业大学 2012
[2]鸭坦布苏病毒巢式PCR检测方式及其重组E蛋白间接ELISA诊断方法的研究[D]. 郝明飞.山东农业大学 2012
[3]黄病毒通用引物RT-PCR以及Real-Time PCR方法的建立并应用于蚊虫检测[D]. 周晓俊.第二军医大学 2007
本文编号：3249017
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