牧草及草产品中有害生物碱LC-MS/MS检测方法及分布特点研究
发布时间：2021-06-25 13:41
生物碱是一类存在于生物体内的一类含氮原子的有机化合物。吡咯烷类生物碱是由某些植物产生的一类生物碱，可引起动物以肝脏损害为主的疾病。麦角类生物碱是一大类复杂的霉菌毒素家族，可引发家畜坏疽、呕吐、抽搐、流产和死胎等不良反应。因此，建立牧草中生物碱的检测方法对保障我国饲料安全尤为重要。本论文重点开展了双氢麦角汀、麦角柯宁碱、麦角异柯宁碱、麦角克碱、麦角异克碱、麦角隐亭、麦角异卡里碱、麦角辛、阿托品、惹卓碱、肾形千里光碱、千里光非灵、野百合碱、千里光宁和东莨菪碱15种生物碱的检测方法研究，并利用建立的方法对实际样品进行检测，主要研究内容及结果如下：（1）建立牧草中15种生物碱的液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。15种生物碱在0.004g/mL-1.0g/mL浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数均>0.9944。添加浓度在0.01-0.2mg/kg之间时，回收率均在60%-110%之间，回收率相对标准偏差结果均<6.39％。方法的检测限为5g/kg，定量限为10g/kg。（2）利用建立的检测方法，对内蒙古自治区和四川省送检的70个牧草及草产品样品进行了检测，得到的主要结果...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
麦角克碱ergocristine/麦角异克碱ergocristinine提取离子
21东莨菪碱 Scopolamine 提取离子色谱图图 2-3 15 种生物碱的提取离子色谱图Fig 2-3 The chromatogram gram of standard sample of 15 alkaloids (0.025 mg/kg)2.3.3 前处理条件的优化2.3.3.1 称样量的确定本试验参考欧盟食品安全局（European Food Safety Authority, EFSA）发布的关于检测谷物中麦角类生物碱的报告和 QuEChERS 快速前处理方法的称样量，确定称样量范围为 1-5g。欧盟食品安全局颁布的 HPLC-MS/MS 检测谷物中有害生物碱的方法，称样量为 5g，提取溶剂的体积为
醇-0.25%磷酸和乙腈-乙酸铵对 15 种生物碱的提取效果。生物碱为碱性物质，提取效果受溶剂的PH 环境影响较大，因此，三种提取溶液的提取效果也差异较大。当以甲醇-0.25%磷酸为提取溶液时，麦角类生物碱回收率只有 10.6%-43.7%。当以乙腈-乙酸铵溶液为提取液时，麦角类生物碱和吡咯烷类生物碱这两类生物碱的回收率为 32.7%-78.9%。通过考察不同的提取溶剂对 15 种生物碱的提取效果的影响（图 2-4），结果发现，以乙腈和 200mg/L 碳酸铵溶液（比例为 84:16）为提取溶液对牧草基质中的生物碱提取效率最高，回收率结果较为理想。因此，实验确定以乙腈-200mg/L 碳酸铵溶液为提取溶液。不同提取溶剂对麦角类生物碱回收率的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]生物碱的药理作用及机制研究[J]. 柏云娇,于淼,赵思伟,陈鹰翔,常铠麟. 哈尔滨商业大学学报(自然科学版). 2013(01)
[2]超临界流体色谱纯化青蒿素的研究[J]. 庞斐,吕惠生,刘岩,张敏华. 高校化学工程学报. 2010(04)
[3]麦角生物碱的研究进展[J]. 卢春霞,王洪新. 食品科学. 2010(11)
[4]奶牛业中霉菌和霉菌毒素的问题(二)[J]. 王银东,L W Whitlow,W M Hagler. 中国畜牧杂志. 2010(04)
[5]天然生物碱的研究与应用[J]. 梁丹,李志伟,李明,张建夫. 安徽农业科学. 2007(35)
[6]高效液相色谱法同时测定甲磺酸双氢麦角碱注射液中3种单碱和总碱的含量[J]. 石庆平,许善初,丁峰,王震. 中国医院药学杂志. 2007(06)
[7]禾草内生真菌生物碱的研究进展[J]. 高嘉卉,南志标. 生态学报. 2007(06)
[8]植物中吡咯里西啶生物碱的检测与分析[J]. 张芳,王长虹,王峥涛. 天然产物研究与开发. 2006(06)
[9]高效毛细管电泳法在中药化学成分分析中的应用[J]. 曹瑞敏,苏玮,苏庆. 中华中医药杂志. 2005(04)
[10]麦角菌发酵物中α麦角隐亭的RP-HPLC测定方法[J]. 朱平,赵鸿莲,朱慧欣,王全,何惠霞. 中国药学杂志. 2000(04)
本文编号：3249309
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
麦角克碱ergocristine/麦角异克碱ergocristinine提取离子
21东莨菪碱 Scopolamine 提取离子色谱图图 2-3 15 种生物碱的提取离子色谱图Fig 2-3 The chromatogram gram of standard sample of 15 alkaloids (0.025 mg/kg)2.3.3 前处理条件的优化2.3.3.1 称样量的确定本试验参考欧盟食品安全局（European Food Safety Authority, EFSA）发布的关于检测谷物中麦角类生物碱的报告和 QuEChERS 快速前处理方法的称样量，确定称样量范围为 1-5g。欧盟食品安全局颁布的 HPLC-MS/MS 检测谷物中有害生物碱的方法，称样量为 5g，提取溶剂的体积为
醇-0.25%磷酸和乙腈-乙酸铵对 15 种生物碱的提取效果。生物碱为碱性物质，提取效果受溶剂的PH 环境影响较大，因此，三种提取溶液的提取效果也差异较大。当以甲醇-0.25%磷酸为提取溶液时，麦角类生物碱回收率只有 10.6%-43.7%。当以乙腈-乙酸铵溶液为提取液时，麦角类生物碱和吡咯烷类生物碱这两类生物碱的回收率为 32.7%-78.9%。通过考察不同的提取溶剂对 15 种生物碱的提取效果的影响（图 2-4），结果发现，以乙腈和 200mg/L 碳酸铵溶液（比例为 84:16）为提取溶液对牧草基质中的生物碱提取效率最高，回收率结果较为理想。因此，实验确定以乙腈-200mg/L 碳酸铵溶液为提取溶液。不同提取溶剂对麦角类生物碱回收率的影响
【参考文献】：
期刊论文
[1]生物碱的药理作用及机制研究[J]. 柏云娇,于淼,赵思伟,陈鹰翔,常铠麟. 哈尔滨商业大学学报(自然科学版). 2013(01)
[2]超临界流体色谱纯化青蒿素的研究[J]. 庞斐,吕惠生,刘岩,张敏华. 高校化学工程学报. 2010(04)
[3]麦角生物碱的研究进展[J]. 卢春霞,王洪新. 食品科学. 2010(11)
[4]奶牛业中霉菌和霉菌毒素的问题(二)[J]. 王银东,L W Whitlow,W M Hagler. 中国畜牧杂志. 2010(04)
[5]天然生物碱的研究与应用[J]. 梁丹,李志伟,李明,张建夫. 安徽农业科学. 2007(35)
[6]高效液相色谱法同时测定甲磺酸双氢麦角碱注射液中3种单碱和总碱的含量[J]. 石庆平,许善初,丁峰,王震. 中国医院药学杂志. 2007(06)
[7]禾草内生真菌生物碱的研究进展[J]. 高嘉卉,南志标. 生态学报. 2007(06)
[8]植物中吡咯里西啶生物碱的检测与分析[J]. 张芳,王长虹,王峥涛. 天然产物研究与开发. 2006(06)
[9]高效毛细管电泳法在中药化学成分分析中的应用[J]. 曹瑞敏,苏玮,苏庆. 中华中医药杂志. 2005(04)
[10]麦角菌发酵物中α麦角隐亭的RP-HPLC测定方法[J]. 朱平,赵鸿莲,朱慧欣,王全,何惠霞. 中国药学杂志. 2000(04)
本文编号：3249309
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