山东省潍坊市鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定和单因子血清制备
发布时间：2021-06-29 14:33
鸭传染性浆膜炎（Duck infectious serositis）是一种由鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）引起的传染病,常呈急性、败血性,曾经被称为新鸭病（New ducks syndrom）、鸭败血症（nuekseptieemia）和鸭疫综合症（Anatipestifer syndrome）等,家鸭、野鸭、雏鹅、火鸡和野鸡及多种其他鸟类易感。病变主要特征为纤维素性心包炎、肝周炎、纤维素性肺炎,俗称“三包”。另外,病变中也常见气囊炎、关节炎、结膜炎、脑膜炎等症状。目前,疫苗预防和抗菌药治疗是防治该病的主要手段。因此,对临床收集的疑似病例进行RA的分离鉴定、耐药性检测、病原血清型的分型对临床养殖过程中选择高敏感度药物、合适疫苗等具重要指导意义。本研究主要分以下三个部分:一、RA单因子血清的制备该试验选用7株山东省主要流行血清型RA标准品制备了7种免疫原,对14只2Kg左右的雄性家兔进行免疫后心脏采血制备抗血清。经检测,抗血清与本血清型菌体的凝集效价结果均可达到1:4800。多次交叉吸收试验后,得到1型、2型、6型、7型、10型、11型、13型7种...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
革兰氏染色图片
山东农业大学硕士专业学位论文27将临床分离到的23株RA和实验室保存的大肠杆菌、沙门氏菌提取DNA作为模板进行PCR扩增。结果显示：临床分离纯化的23株菌均扩增出大小为809bp的目的片段，而大肠杆菌、沙门氏菌没有扩出片段（图3-2）。图3-2部分RA分离株的PCR扩增图M,DNAMarkerDL-2000;1,大肠杆菌;2,沙门氏菌;3-11.RA临床分离株Fig.3-2PCRamplificationfromRAM,DNAMarkerDL-2000;1.E.coli;2.Salmonella;3-11,RAstrains3.4.2扩增产物克隆质粒的双酶切结果将临床分离的23株菌扩增出大小为809bp的目的片段回收连接转化，BamHI和HindIII双酶切阳性质粒，得到目的条带大小为2692bp和809bp左右，与预期相符（图3-3）。图3-3部分重组质粒的酶切鉴定M:DNAMarker;1-2:阳性质粒/BamHI+HindIIIFig.3-3IdentificationofrecombinantplasmidbyenzymedigestionM:DNAMarker(DL5000);1-2:Positiveplasmid/BamHI+HindII3.4.3扩增产物测序结果与分析
山东农业大学硕士专业学位论文27将临床分离到的23株RA和实验室保存的大肠杆菌、沙门氏菌提取DNA作为模板进行PCR扩增。结果显示：临床分离纯化的23株菌均扩增出大小为809bp的目的片段，而大肠杆菌、沙门氏菌没有扩出片段（图3-2）。图3-2部分RA分离株的PCR扩增图M,DNAMarkerDL-2000;1,大肠杆菌;2,沙门氏菌;3-11.RA临床分离株Fig.3-2PCRamplificationfromRAM,DNAMarkerDL-2000;1.E.coli;2.Salmonella;3-11,RAstrains3.4.2扩增产物克隆质粒的双酶切结果将临床分离的23株菌扩增出大小为809bp的目的片段回收连接转化，BamHI和HindIII双酶切阳性质粒，得到目的条带大小为2692bp和809bp左右，与预期相符（图3-3）。图3-3部分重组质粒的酶切鉴定M:DNAMarker;1-2:阳性质粒/BamHI+HindIIIFig.3-3IdentificationofrecombinantplasmidbyenzymedigestionM:DNAMarker(DL5000);1-2:Positiveplasmid/BamHI+HindII3.4.3扩增产物测序结果与分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]山东省鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定和血清型分析[J]. 林树乾,何元龙,赵增成,李峰. 山东农业科学. 2010(12)
[2]鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及耐药性研究[J]. 谢永平,陈泽祥,许力干,胡帅,徐光霞,禤雄标,杨威. 广西农业科学. 2010(07)
[3]氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶的研究进展[J]. 焦显芹,肖方,刘河冰,李新生,杜向党. 中国畜牧兽医. 2009(06)
[4]Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定[J]. 单艳菊,龚建森,施祖灏,刘学贤. 吉林畜牧兽医. 2009(02)
[5]天津地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 李秀丽,王英珍,任卫科,王东,张莉,韩伟. 天津农业科学. 2008(06)
[6]鸭疫里默氏杆菌中国分离株的外膜蛋白A基因的克隆与序列分析[J]. 魏秀丽,孙亚妮,姜世金,孔义波,张兴晓. 西北农业学报. 2008(03)
[7]2型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用[J]. 程龙飞,施少华,傅光华,李文杨,彭春香,黄瑜,陈溥言. 福建农业学报. 2006(02)
[8]利用16S rDNA建立种特异性PCR快速检测鸭疫里默氏菌[J]. 曲丰发,蔡畅,郑献进,张大丙. 微生物学报. 2006(01)
[9]间接免疫组化法检测鸭疫里默氏杆菌感染和抗原定位[J]. 刘维平,程安春,汪铭书,陈孝跃,周毅,朱德康,刘菲,孟琼华,黄诚,宋涌. 中国兽医学报. 2005(04)
[10]细菌外排泵介导耐药性研究进展[J]. 王青松,崔淑芹,张舒. 国外医药(抗生素分册). 2005(03)
本文编号：3256617
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：51 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
革兰氏染色图片
山东农业大学硕士专业学位论文27将临床分离到的23株RA和实验室保存的大肠杆菌、沙门氏菌提取DNA作为模板进行PCR扩增。结果显示：临床分离纯化的23株菌均扩增出大小为809bp的目的片段，而大肠杆菌、沙门氏菌没有扩出片段（图3-2）。图3-2部分RA分离株的PCR扩增图M,DNAMarkerDL-2000;1,大肠杆菌;2,沙门氏菌;3-11.RA临床分离株Fig.3-2PCRamplificationfromRAM,DNAMarkerDL-2000;1.E.coli;2.Salmonella;3-11,RAstrains3.4.2扩增产物克隆质粒的双酶切结果将临床分离的23株菌扩增出大小为809bp的目的片段回收连接转化，BamHI和HindIII双酶切阳性质粒，得到目的条带大小为2692bp和809bp左右，与预期相符（图3-3）。图3-3部分重组质粒的酶切鉴定M:DNAMarker;1-2:阳性质粒/BamHI+HindIIIFig.3-3IdentificationofrecombinantplasmidbyenzymedigestionM:DNAMarker(DL5000);1-2:Positiveplasmid/BamHI+HindII3.4.3扩增产物测序结果与分析
山东农业大学硕士专业学位论文27将临床分离到的23株RA和实验室保存的大肠杆菌、沙门氏菌提取DNA作为模板进行PCR扩增。结果显示：临床分离纯化的23株菌均扩增出大小为809bp的目的片段，而大肠杆菌、沙门氏菌没有扩出片段（图3-2）。图3-2部分RA分离株的PCR扩增图M,DNAMarkerDL-2000;1,大肠杆菌;2,沙门氏菌;3-11.RA临床分离株Fig.3-2PCRamplificationfromRAM,DNAMarkerDL-2000;1.E.coli;2.Salmonella;3-11,RAstrains3.4.2扩增产物克隆质粒的双酶切结果将临床分离的23株菌扩增出大小为809bp的目的片段回收连接转化，BamHI和HindIII双酶切阳性质粒，得到目的条带大小为2692bp和809bp左右，与预期相符（图3-3）。图3-3部分重组质粒的酶切鉴定M:DNAMarker;1-2:阳性质粒/BamHI+HindIIIFig.3-3IdentificationofrecombinantplasmidbyenzymedigestionM:DNAMarker(DL5000);1-2:Positiveplasmid/BamHI+HindII3.4.3扩增产物测序结果与分析
【参考文献】：
期刊论文
[1]山东省鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定和血清型分析[J]. 林树乾,何元龙,赵增成,李峰. 山东农业科学. 2010(12)
[2]鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及耐药性研究[J]. 谢永平,陈泽祥,许力干,胡帅,徐光霞,禤雄标,杨威. 广西农业科学. 2010(07)
[3]氨基糖苷类药物高水平耐药16S rRNA甲基化酶的研究进展[J]. 焦显芹,肖方,刘河冰,李新生,杜向党. 中国畜牧兽医. 2009(06)
[4]Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定[J]. 单艳菊,龚建森,施祖灏,刘学贤. 吉林畜牧兽医. 2009(02)
[5]天津地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药敏试验[J]. 李秀丽,王英珍,任卫科,王东,张莉,韩伟. 天津农业科学. 2008(06)
[6]鸭疫里默氏杆菌中国分离株的外膜蛋白A基因的克隆与序列分析[J]. 魏秀丽,孙亚妮,姜世金,孔义波,张兴晓. 西北农业学报. 2008(03)
[7]2型鸭疫里氏杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用[J]. 程龙飞,施少华,傅光华,李文杨,彭春香,黄瑜,陈溥言. 福建农业学报. 2006(02)
[8]利用16S rDNA建立种特异性PCR快速检测鸭疫里默氏菌[J]. 曲丰发,蔡畅,郑献进,张大丙. 微生物学报. 2006(01)
[9]间接免疫组化法检测鸭疫里默氏杆菌感染和抗原定位[J]. 刘维平,程安春,汪铭书,陈孝跃,周毅,朱德康,刘菲,孟琼华,黄诚,宋涌. 中国兽医学报. 2005(04)
[10]细菌外排泵介导耐药性研究进展[J]. 王青松,崔淑芹,张舒. 国外医药(抗生素分册). 2005(03)
本文编号：3256617
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