江苏部分地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的分离鉴定及O24 ETEC分离株人工感染试验

发布时间：2021-07-01 16:02

　　产肠毒素大肠杆菌（ETEC）是引起新生仔猪腹泻的重要病原,一直是养猪业的困扰,给养猪业造成一定的经济损失。我们于2013-2014年在江苏部分养猪地区及其周边地区,从临诊上疑似致初生仔猪腹泻（黄、白痢）的直肠棉拭及病死猪的十二指肠、空肠和回肠共分离鉴定出397株大肠杆菌,并对其血清型、肠毒素类型及黏附素类型进行鉴定。1江苏部分地区及周边地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的分离鉴定本试验共分离出397株致初生仔猪腹泻大肠杆菌,其中64株未定型,5株自凝,328株大肠杆菌O血清型定型,定型菌株共覆盖了38种O血清型,其中以024、0101、0141、055、020和0149为主,共252株,占本研究定型菌株的76.83%（252/328）,为本研究致初生仔猪腹泻大肠杆菌的主要流行血清型。本研究分离鉴定出的主要血清型中的024、055和0105在以往报道的初生仔猪腹泻大肠杆菌常见血清型中很少出现,可见024、055和0105有成为江苏地区致仔猪腹泻大肠杆菌主要O血清型的趋势。采用多重PCR对397株大肠杆菌分离株进行五种毒素基因（sta、stb、lt、stx2e、eaeA）的检测。结果显示：397株... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
符号说明
文献综述
    1 致病性大肠杆菌引起的新生仔猪腹泻
        1.1 致病性大肠杆菌引起的仔猪黄痢
        1.2 致病性大肠杆菌引起的仔猪白痢
        1.3. 致仔猪腹泻大肠杆菌病的预防
        1.4 ETEC疫苗
    2 致初生仔猪腹泻的大肠杆菌病原生物特性
        2.1 大肠杆菌的一般特性
        2.2 大肠杆菌主要抗原及血清学特性
        2.3 大肠杆菌的分类及致病性
    3 致新生仔猪腹泻大肠杆菌的主要毒力因子
        3.1 肠毒素(ST、LT)
        3.2 大肠杆菌黏附素
        3.3 其他毒力因子
第一章 江苏部分地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的分离鉴定
    1 材料
        1.1 病猪直肠棉拭子和病料采集
        1.2 培养基
        1.3 主要试剂
        1.4 参考菌株
        1.5 单克隆抗体和细胞
        1.6 主要仪器
        1.7 实验动物
        1.8 引物
    2 方法
        2.1 细菌的分离鉴定
        2.2 染色镜检
        2.3 生化试验
        2.4 多重 PCR 检测毒素基因(sta、stb、It、eaeA、stxie)
        2.5 大肠杆菌O血清型的测定
        2.6 黏附素的测定
        2.7 大肠杆菌部分分离株毒素的检测
    3 结果
        3.1 细菌分离及生化试验
        3.2 生化试验
        3.3 大肠杆菌O血清型的鉴定
        3.4 5种毒力基因的检测
        3.5 黏附素的鉴定
        3.6 O血清型、毒素基因与黏附素型的相关性
        3.7 部分分离菌株致病性鉴定
    4 讨论
第二章 O24部分ETEC分离株人工感染试验
    摘要
    1 材料
        1.1 供试菌株
        1.2 实验动物
        1.3 标准血清
        1.4 试剂
        1.5 主要仪器设备
        1.6 培养基
    2 方法
        2.1 试验菌株处理
        2.2 引物设计
        2.3 仔猪饲养与采样
        2.4 剖检并分离鉴定
        2.5 病理学、组织病理学观察
    3 结果
        3.1 分离菌对1日龄仔猪人工感染观察
        3.2 细菌学检查
        3.3 肠道分离菌计数
        3.4 组织病理学
    4 讨论
全文小结
参考文献
附录：大肠杆菌样本资料
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]华南地区致病性猪大肠杆菌的鉴定和血清型分布[J]. 王文豪,苏丹萍,张丹琳,申翰钦,张显浩,陈瑞爱,贺东生.  中国兽医杂志. 2013(04)
[2]陕西仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性测定[J]. 高云英,李浩波,李琳,陈云杰,王增民,赵发苗,张景武.  中国农学通报. 2005(09)
[3]大肠杆菌VT2噬菌体的分离与溶源转染[J]. 严亚贤,陆承平.  中国病毒学. 2004(04)
[4]华东地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的O血清型和毒力因子[J]. 陈祥,高崧,王雷,焦新安,刘秀梵.  微生物学报. 2004(01)
[5]北京地区猪致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定[J]. 张永红,崔德凤,沈咏舟,康凯,田岚.  中国兽医科技. 1999(04)
[6]我国部分地区禽病原性大肠杆菌的分离与鉴定[J]. 高崧,刘秀梵,张如宽,焦新安,文其乙,吴长新,唐一鸣,朱晓波,李琮,陈娟,崔力兵,崔洪平.  畜牧兽医学报. 1999(02)
[7]一株能表达987P和F41两种粘附素的猪源性大肠杆菌的研究[J]. 高崧,刘秀梵,张如宽.  微生物学报. 1994(03)
[8]抗大肠埃希氏菌粘附素单克隆抗体诊断试剂的研制及其现场初步应用[J]. 高崧,刘秀梵.  畜牧兽医学报. 1993(03)
[9]贵州省仔猪黄痢病原的分离与鉴定[J]. 吴彤,李永明,何仲先,周碧君,温俊板.  贵州农学院学报. 1991(01)
[10]猪大肠杆菌病病原学研究概况[J]. 李永明.  贵州农业科学. 1990(04)

博士论文
[1]断奶仔猪源大肠杆菌毒力因子的分子流行病学及F18菌毛部分特性的研究[D]. 成大荣.扬州大学 2005

硕士论文
[1]江苏部分地区致初生、断奶仔猪腹泻/水肿病大肠杆菌的O血清型、毒素型和黏附素型的流行病学调查[D]. 唐树霄.扬州大学 2013



本文编号：3259439