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禽逆转录病毒与新城疫弱毒疫苗La Sota株对SPF鸡的协同致病作用

发布时间:2021-07-02 18:08
  禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)和禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)同属于家禽的逆转录病毒,两者均可致鸡群发生肿瘤和严重的免疫抑制并主要通过垂直传播方式感染鸡群。通过鸡胚垂直传播感染ALV和REV的鸡群,通常会产生严重的免疫抑制现象,一方面造成鸡群对其它疫苗的免疫应答水平下降,无法产生足够的保护效力,另一方面导致鸡对其他疾病的抵抗力降低,增加了其他继发性疾病感染的几率。为了防控鸡新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)等烈性病原,临床上需要大量免疫针对NDV的灭活疫苗和弱毒疫苗。临床实践发现,某些ALV和REV等潜伏感染的病毒显现症状发生在雏鸡免疫新城疫弱毒疫苗之后,推测La Sota疫苗的免疫会加速ALV和REV在体内的复制和致病。为此,本研究通过系统的动物实验,观察了J亚群ALV(ALV-J)和REV两种垂直传播性逆转录病毒通过鸡胚感染后的SPF雏鸡在接种新城疫弱毒疫苗La Sota株后的协同致病作用。从100枚SPF鸡胚中随机选择50枚SPF鸡胚通过卵黄囊接种ALV... 

【文章来源】:山东农业大学山东省

【文章页数】:51 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

禽逆转录病毒与新城疫弱毒疫苗La Sota株对SPF鸡的协同致病作用


ALV的基因组结构图(张青婵,2010)

结构图,生活周期,前病毒DNA


禽逆转录病毒与新城疫弱毒疫苗LaSota株对SPF鸡的协同致病作用2图1ALV的基因组结构图(张青婵,2010)Fig.1GenomeStructureofALV(Zhang,2010)ALV-J进入宿主细胞后,病毒RNA在反转录酶的作用下,先反转录生成前病毒DNA的负链。然后以负链为模板合成正链,最终形成双链前病毒DNA。前病毒DNA连接整合酶等病毒蛋白和一些宿主蛋白形成预整合复合物。在整合酶的作用下,前病毒DNA整合到宿主基因组中,转录形成新的RNA,作为mRNA翻译合成各种蛋白。合成的病毒蛋白在细胞膜上聚集,进行组装并形成芽状结构,出芽释放后形成新的病毒粒子(Bowersetal.,1996;Luciwetal.,1992;Ruddelletal.,1988)。如图2所示。图2ALV的生活周期(Verderameetal.,1996)Fig.2LifecycleofALV(Verderameetal.,1996)1.1.2ALV-J的流行病学自1989年ALV-J发现以来,给世界养禽业造成不可估量的经济损失。世界上多个国家报道过ALV-J,成为世界养禽业面临的重要问题之一(Fadlyetal.,1999;崔治中等,

示意图,示意图,蛋白,毒力


山东农业大学硕士专业学位论文9RNP复合物,在囊膜内呈螺旋对称。此外,具有细胞融合和溶血作用的F蛋白,与具有血凝素和神经氨酸酶活性的HN蛋白组成的两种病毒纤突,锚定在囊膜内表面的M蛋白上,NDV结构见图3。图3NDV结构示意图(Ganaretal,2014)Fig.3SchematicrepresentationofvirionstructureofNDV(Ganaretal,2014)NDV基因组为单分子负链单股RNA,长约15~16kb(Huangetal.,2004;Czeglédietal.,2006)。病毒全基因组由6个基因组成,顺序为3’-NP-P-M-F-HN-L-5’,分子量约为5*106道尔顿,占病毒粒子重量的0.5%(Kolakofskyetal.,1974)。基因组可编码6种结构蛋白,包括核衣壳蛋白(NP)、磷酸蛋白(P)、基质蛋白(M)、融合蛋白(F)、血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)和RNA依赖性RNA聚合酶(L)(Lambetal.,2005;许海旭,2016)。NDV基因组RNA不能直接参与复制和转录,因此本身不具有传染性。当RNA与NP蛋白、P蛋白以及L蛋白结合形成RNP复合物,在RNA聚合酶的参与下可以作为复制和转录的模板(Yuetal.,2017)。NDV毒株根据毒力从强到弱可分为三种:强毒株(Velogenic)、中等毒力株(Mesogenic)和弱毒株(Lentongenic)(Hodderetal.,1993;Samaletal.,2011)。目前,判断毒株毒力的标准有3个,分别是鸡胚平均死亡时间(MDT)、1日龄鸡脑内接种致病指数(ICPI)和6周龄鸡静脉接种致病指数(IVPI)(Kingetal.,1997)。以接种9-11日龄的鸡胚为例,强毒株通常在24~60h致死鸡胚,中等毒力株通常在60h~90h致死鸡胚,弱毒株通常90h以上致死鸡胚。除用鸡胚接种外,NDV可直接接种细胞进行复制,目前鸡胚成纤维细胞系(DF-1)及原代鸡胚胎成纤维细胞(CEF)在实际应用中最为常见。病毒表面的血凝素-神经氨酸酶蛋白(HN)与宿主细胞表面受体相结合,在融合蛋白的介导作用下,病毒粒子与细胞膜相融合,R

【参考文献】:
期刊论文
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博士论文
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[2]新城疫病毒F蛋白的裂解位点氨基酸序列多样性及其它区段对细胞膜融合活性的影响[D]. 王艳红.西北农林科技大学 2018
[3]新城疫病毒M蛋白功能性氨基酸突变和M蛋白与膜联蛋白A6互作影响病毒复制分子机制[D]. 许海旭.扬州大学 2016
[4]新城疫病毒HN蛋白纳米抗体的筛选及功能研究[D]. 高小龙.西北农林科技大学 2016
[5]A亚群禽白血病病毒不同分离株的基因组和生物学特性比较[D]. 张青婵.山东农业大学 2010



本文编号:3260963

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