gI/gE双基因缺失伪狂犬病病毒变异株的构建和免疫效力评价
发布时间：2021-07-05 12:21
伪狂犬病（Pseudorabies, PR）又名奥耶兹氏病,是由猪疱疹病毒1型（Suid herpesvirus1, SuHV-1）亦称伪狂犬病病毒（Pseudorabies virus, PRV）引起的猪、牛、羊等多种家畜及野生动物的一种烈性传染病,其主要特征为奇痒、发热、脑脊髓炎、呼吸系统和神经系统障碍。猪是其主要的宿主和传染源。目前,免疫接种经典PRV Bartha-K61弱毒疫苗是防控伪狂犬病的有效途径之一。然而,近年来在我国很多地区的伪狂犬病疫苗免疫猪群中接连爆发了新的伪狂犬病疫情。研究表明,现行的Bartha-K61疫苗株不能对当前流行的PRV变异株提供完全免疫保护,并且PRV变异株还在继续流行,感染和发病猪场将进一步增多。因此,研制针对PRV变异株的疫苗十分紧迫。本研究从天津某免疫过PR疫苗猪场的发病仔猪脑组织中分离到了一株PRV变异株（命名为PRV TJ株）。经序列比对分析,该毒株与近年来分离的PRV流行毒株位于进化树的一个独立分支,与经典强毒株PRV Kaplan株和Becker株的亲缘关系较远,其gE基因和gI基因序列均发生了氨基酸的突变、插入与缺失。猪和绵羊免疫攻...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRV的病毒粒子结构示意图（引自Pomeranzetal.,2005)
别扩增左右同源重组臂（L和R),然后将L、11片段通过^：00111和义^^^?1限制性酶切位点克隆pOK12载体上，再选用合适的限制性内切酶对其进行酵切鉴定，阳性质粒命名为pOK-LR (图2)?扩增左右同源重组臂的PCR反应参数为：95°C预变性5 min, 95°C变性30 s, 61.rC退火30 s,°C延伸90 s,进行30个循环后72°C再延伸10 min。
再选用合适的限制性内切酶对其进行酵切鉴定，阳性质粒命名为pOK-LR (图2.2)?扩增左右同源重组臂的PCR反应参数为：95°C预变性5 min, 95°C变性30 s, 61.rC退火30 s,72°C延伸90 s,进行30个循环后72°C再延伸10 min。^ ■ gD、 、 gE , Ug9 UsgPRV SC strain PRV Bartha-K61 strain图2.1PRVBartha-K61株基因组缺失片段的位置示意图（弓I自彭金美等，2008)Fig. 2.1 Schematic diagram of the deletion location in the genome of PRV Bartha-K61 strain(from Peng et al., 2008)12
【参考文献】：
期刊论文
[1]免疫后发病仔猪中伪狂犬病毒的分离和鉴定[J]. 童武,张青占,郑浩,刘飞,姜一峰,单同领,周艳君,童光志. 中国动物传染病学报. 2013(03)
[2]猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析[J]. 彭金美,安同庆,赵鸿远,刘益民,陈家锃,冷超粮,孙艳,常丹,田志军,童光志. 中国预防兽医学报. 2013(01)
[3]猪伪狂犬病不同佐剂灭活疫苗对兔免疫原性初探[J]. 舒银辉,黄文辉,饶清宜,郑良益,漆世华,王桂桂,吴玉石,祝春花,杨思谊,杨雷. 中国兽药杂志. 2011(12)
[4]猪伪狂犬病病毒双基因缺失gI-/gE-/PRV SA738灭活疫苗的安全性与免疫效力[J]. 董炳梅,郭广君,吕素芳,唐娜,魏凤,管宇,张松林,沈志强. 中国兽医学报. 2011(07)
[5]伪狂犬病毒Sa株gI-/gE-/YFP+基因缺失载体构建及突变株筛选[J]. 吕素芳,郭广君,管宇,魏凤,张松林,沈志强. 中国动物检疫. 2009(08)
[6]猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒Ⅱ型副猪嗜血杆菌和猪巴氏杆菌混合感染的诊治[J]. 黄小波,曹三杰,刘伍梅,陈朝红. 中国兽医杂志. 2009(01)
[7]伪狂犬病病毒Bartha K61株Us区缺失片段的鉴定[J]. 彭金美,陈瑾,田志军,王瑜,周艳君,安同庆,童光志. 中国兽医科学. 2008(08)
[8]猪瘟、猪伪狂犬病和链球菌病混合感染的诊疗[J]. 刘成. 养猪. 2006(06)
[9]仔猪伪狂犬病与弓形体病混合感染的诊断和防制[J]. 许中山. 福建畜牧兽医. 2005(05)
[10]猪伪狂犬病和圆环病毒病混合感染的诊治[J]. 郭承建,李新亭,周洪学. 养殖与饲料. 2003(10)
硕士论文
[1]变异猪伪狂犬病毒的分离鉴定及生物学特性分析[D]. 张青占.中国农业科学院 2013
[2]含GFP报告基因的伪狂犬病病毒Ea株gG基因缺失重组病毒的构建[D]. 王鑫.河南农业大学 2008
[3]伪狂犬病病毒上海株TK基因缺失株的构建及其生物学特性初步研究[D]. 苏鑫铭.南京农业大学 2003
本文编号：3266064
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
PRV的病毒粒子结构示意图（引自Pomeranzetal.,2005)
别扩增左右同源重组臂（L和R),然后将L、11片段通过^：00111和义^^^?1限制性酶切位点克隆pOK12载体上，再选用合适的限制性内切酶对其进行酵切鉴定，阳性质粒命名为pOK-LR (图2)?扩增左右同源重组臂的PCR反应参数为：95°C预变性5 min, 95°C变性30 s, 61.rC退火30 s,°C延伸90 s,进行30个循环后72°C再延伸10 min。
再选用合适的限制性内切酶对其进行酵切鉴定，阳性质粒命名为pOK-LR (图2.2)?扩增左右同源重组臂的PCR反应参数为：95°C预变性5 min, 95°C变性30 s, 61.rC退火30 s,72°C延伸90 s,进行30个循环后72°C再延伸10 min。^ ■ gD、 、 gE , Ug9 UsgPRV SC strain PRV Bartha-K61 strain图2.1PRVBartha-K61株基因组缺失片段的位置示意图（弓I自彭金美等，2008)Fig. 2.1 Schematic diagram of the deletion location in the genome of PRV Bartha-K61 strain(from Peng et al., 2008)12
【参考文献】：
期刊论文
[1]免疫后发病仔猪中伪狂犬病毒的分离和鉴定[J]. 童武,张青占,郑浩,刘飞,姜一峰,单同领,周艳君,童光志. 中国动物传染病学报. 2013(03)
[2]猪伪狂犬病病毒新流行株的分离鉴定及抗原差异性分析[J]. 彭金美,安同庆,赵鸿远,刘益民,陈家锃,冷超粮,孙艳,常丹,田志军,童光志. 中国预防兽医学报. 2013(01)
[3]猪伪狂犬病不同佐剂灭活疫苗对兔免疫原性初探[J]. 舒银辉,黄文辉,饶清宜,郑良益,漆世华,王桂桂,吴玉石,祝春花,杨思谊,杨雷. 中国兽药杂志. 2011(12)
[4]猪伪狂犬病病毒双基因缺失gI-/gE-/PRV SA738灭活疫苗的安全性与免疫效力[J]. 董炳梅,郭广君,吕素芳,唐娜,魏凤,管宇,张松林,沈志强. 中国兽医学报. 2011(07)
[5]伪狂犬病毒Sa株gI-/gE-/YFP+基因缺失载体构建及突变株筛选[J]. 吕素芳,郭广君,管宇,魏凤,张松林,沈志强. 中国动物检疫. 2009(08)
[6]猪伪狂犬病病毒猪圆环病毒Ⅱ型副猪嗜血杆菌和猪巴氏杆菌混合感染的诊治[J]. 黄小波,曹三杰,刘伍梅,陈朝红. 中国兽医杂志. 2009(01)
[7]伪狂犬病病毒Bartha K61株Us区缺失片段的鉴定[J]. 彭金美,陈瑾,田志军,王瑜,周艳君,安同庆,童光志. 中国兽医科学. 2008(08)
[8]猪瘟、猪伪狂犬病和链球菌病混合感染的诊疗[J]. 刘成. 养猪. 2006(06)
[9]仔猪伪狂犬病与弓形体病混合感染的诊断和防制[J]. 许中山. 福建畜牧兽医. 2005(05)
[10]猪伪狂犬病和圆环病毒病混合感染的诊治[J]. 郭承建,李新亭,周洪学. 养殖与饲料. 2003(10)
硕士论文
[1]变异猪伪狂犬病毒的分离鉴定及生物学特性分析[D]. 张青占.中国农业科学院 2013
[2]含GFP报告基因的伪狂犬病病毒Ea株gG基因缺失重组病毒的构建[D]. 王鑫.河南农业大学 2008
[3]伪狂犬病病毒上海株TK基因缺失株的构建及其生物学特性初步研究[D]. 苏鑫铭.南京农业大学 2003
本文编号：3266064
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