Fas/FasL信号转导通路在镉致神经细胞凋亡中的作用及NAC的保护效应

发布时间：2021-07-07 14:27

　　镉（Cd）是环境中常见的蓄积性重金属毒物,能造成机体多系统和多器官的损伤。大脑是Cd毒性作用的重要靶器官之一,Cd可以引起血脑屏障功能障碍,进入脑组织引起神经元凋亡。死亡受体通路是细胞经典凋亡通路之一,Fas/FasL信号转导通路是主要死亡受体通路之一。有研究表明,Fas/FasL信号转导通路可介导线粒体通路引起细胞凋亡。本课题组前期研究结果表明,Cd可经线粒体通路引起细胞凋亡,但Fas/FasL信号转导通路在Cd致神经细胞凋亡中的作用及对线粒体通路调控机制尚未阐明。本研究以原代大鼠大脑皮质神经元和PC-12细胞为模型,通过体外试验探讨了Fas/FasL信号转导通路在Cd诱导神经细胞凋亡中的作用及对线粒体凋亡通路的调控机制,并研究了N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）在上述过程中的保护作用。1. Fas/FasL信号转导通路在镉致神经细胞凋亡中的作用为研究Cd对神经细胞Fas/FasL信号转导通路的影响,本试验以原代大鼠大脑皮质神经元和PC-12细胞为模型,用不同浓度（0、5、10、20μmol/L）醋酸镉（CdAc2）处理原代大鼠大脑皮质神经元和PC-12细胞不同时间（0、6、12、24... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语
第一部分 文献综述
    第一章 镉神经毒性研究进展
        1 镉的危害
        2 镉的神经毒性
    第二章 Fas/FasL信号转导通路研究进展
        1 Fas/FasL信号转导通路
            1.1 FasL
            1.2 Fas
            1.3 FADD
            1.4 半胱氨酸天冬酶-8
        2 Fas/FasL信号转导通路与线粒体通路
    第三章 NAC与细胞凋亡
        1 NAC的特性及抗氧化作用机制
        2 NAC对凋亡的保护效应
    本研究的目的和意义
第二部分 试验研究
    第一章 Fas/FasL信号转导通路在镉致神经细胞凋亡中的作用
        1 材料与方法
            1.1 实验动物
            1.2 实验细胞株
            1.3 主要试剂
            1.4 主要仪器
            1.5 主要溶液的配置
            1.6 大鼠大脑皮质神经元(原代神经细胞)的分离与培养
            1.7 PC-12细胞的培养
            1.8 流式细胞仪测定
            1.9 Hochest33258染色
            1.10 AnnexinV-FITC荧光染色
            1.11 western blot检测
            1.12 统计学分析
        2 结果
            2.1 镉处理神经细胞不同时间对Fas/FasL信号转导通路相关蛋白的影响
            2.2 不同浓度镉处理神经细胞对Fas/FasL信号转导通路相关蛋白的影响
            2.3 镉与Z-IETD-FMK对神经细胞凋亡率的影响
            2.4 镉与Anti-FasL对神经细胞凋亡率的影响
        3 讨论
    第二章 Fas/FasL信号转导通路在镉致神经细胞凋亡线粒体通路中的作用
        1 材料与方法
            1.1 实验动物
            1.2 实验细胞株
            1.3 主要试剂
            1.4 主要仪器
            1.5 大鼠大脑皮质神经元(原代神经细胞)的分离与培养
            1.6 PC-12细胞的培养
            1.7 线粒体膜电位检测
            1.8 线粒体与胞浆蛋白的制备
            1.9 western blot检测
        2 结果
            2.1 镉与Z-IETD-FMK对神经细胞BID活化的影响
            2.2 镉与Z-IETD-FMK对神经细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响
            2.3 镉与Z-IETD-FMK对神经细胞线粒体膜电位的影响
            2.4 镉与Z-IETD-FMK对神经细胞cyt c释放的影响
            2.5 镉与Z-IETD-FMK对神经细胞caspase-9、caspase-3和PARP蛋白活化的影响
            2.6 镉与Anti-FasL对神经细胞caspase-9、caspase-3和PARP蛋白活化的影响
        3 讨论
    第三章 NAC对镉诱导神经细胞凋亡Fas/FasL信号转导通路的保护作用
        1 材料与方法
            1.1 实验动物
            1.2 实验细胞株
            1.3 主要试剂
            1.4 主要仪器
            1.5 主要溶液的配置
            1.6 PC-12细胞的培养
            1.7 流式细胞仪
            1.8 Hochest 33258染色
            1.9 western blot检测
            1.10 统计学分析
        2 结果
            2.1 镉与NAC对神经细胞凋亡率的影响
            2.2 NAC对镉致神经细胞凋亡Fas/FasL信号转导通路相关蛋白的保护作用
        3 讨论
全文结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]镉对大鼠大脑皮质神经细胞的氧化损伤及N-乙酰半胱氨酸的保护效应[J]. 袁燕,刘学忠,卞建春,张英,孙娅,柴文娴,闫汶,刘宗平.  中国兽医学报. 2011(03)
[2]镉致大鼠大脑皮质神经细胞凋亡的机理及N-乙酰半胱氨酸的保护作用[J]. 袁燕,张英,卞建春,刘学忠,李丹,孙娅,刘宗平.  中国兽医学报. 2010(08)
[3]铅镉联合染毒对大鼠大脑皮质神经细胞的氧化损伤及NAC的保护效应[J]. 卞建春,路浩,梅莉,达剑森,张英,刘宗平.  中国兽医科学. 2008(09)
[4]母鼠妊娠期铅镉联合暴露对仔鼠脑组织的氧化损伤及乙酰半胱氨酸的保护效应[J]. 路浩,达剑森,梅莉,张英,王林,卓丽玲,刘宗平.  中国兽医科学. 2008(01)
[5]N-乙酰半胱氨酸对慢性间歇缺氧大鼠海马神经元凋亡及氧化应激的影响[J]. 刘辉国,张志锋,高永平,张珍祥,牛汝楫.  中国病理生理杂志. 2008(01)
[6]N-乙酰半胱氨酸对缺氧缺血性脑病新生鼠脑细胞凋亡的干预效果[J]. 罗有同,肖昕.  武警医学. 2004(09)
[7]PC12细胞APE/ref-1cDNA的克隆和表达[J]. 谢振华,王爱民,刘长振,马春.  中国生物化学与分子生物学报. 2001(05)
[8]环境镉污染所致健康危害判定标准的研究[J]. 蔡诗文,岳麟,袁一傲,徐兆发,孔庆瑚,尚琪.  环境与健康杂志. 1994(03)

博士论文
[1]镉致大鼠神经细胞凋亡的线粒体途径及NAC的保护作用[D]. 江辰阳.扬州大学 2014
[2]镉对大鼠大脑皮质神经细胞毒性损伤的机制[D]. 袁燕.扬州大学 2012
[3]铅镉联合对新生大鼠中枢神经系统的毒性损伤及NAC保护效应的研究[D]. 路浩.扬州大学 2008
[4]GSH对氧自由基介导的细胞凋亡保护机制研究[D]. 张菁.天津医科大学 2002

硕士论文
[1]镉激活mTOR通路诱导神经细胞凋亡及NAC的保护效应[D]. 胡飞飞.扬州大学 2014



本文编号：3269798