蒙古羊间充质干细胞的分离培养及体外诱导分化

发布时间：2021-07-07 21:38

　　间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是一类具有高度增殖、自我更新和多向分化潜能的细胞。对许多物种的研究证明这类干细胞在体外可分化为多种细胞表型，是未来细胞、基因治疗、组织工程的理想种子细胞之一。目前尚未见绵羊尤其是蒙古绵羊间充质干细胞的研究报道。本研究旨在建立蒙古羊骨髓间充质干细胞（Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells，BMSCs）和脂肪间充质干细胞（Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells,ADSCs）系，了解其生物学特征，并在体外进行成脂、成骨和软骨诱导分化与鉴定，为今后利用这类间充质干细胞作为疾病细胞、基因治疗的模型，以及将其作为体细胞克隆核供体的研究奠定必要的基础。本文以成年蒙古绵羊为实验对象，采集股骨骨髓和肾脏外围脂肪组织，采用密度梯度离心法和胶原酶消化法获得骨髓和脂肪间充质细胞，系统地研究了其生物学特性以及体外诱导分化能力。主要结果如下：1、分离得到的蒙古羊BMSCs和ADSCs形态均呈现长梭形，易形成细胞集落。二者生长曲线都表现为S形。经计算其细胞倍增时... 

【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

蒙古羊骨髓间充质干细胞形态

少量血细胞相混杂；48h后少量细胞贴壁，形态不规则。3d后贴壁细胞增多，4d后细胞集落形成，6d后细胞集落增多，细胞多呈长梭形及多角形，并逐渐融合成片状（图1A图2A），9d后细胞相互融合基本铺满孔底, 呈旋涡状排列可进行传代培养。传代细胞增殖迅速，呈放射状向周围拓展，逐渐与邻近集落相互汇合。P3代后的细胞形态基本一致，生长细胞为均一长梭形，6-7d细胞再次达80%汇合（图1B图2D）。

的规则的集落。2.2.2 MSCs 的倍增时间蒙古羊MSCs生长曲线呈S型（图3-4），P1、P3、P10分别为传代培养第1代、第3代及第10代。三者生长曲线形态基本一致，生长速度差异不大，均表现为：1-2d为潜伏期，生长较慢；3d后进入对数生长期，步入快速增长期；7-8d为平台

【参考文献】：
期刊论文
[1]奶山羊胎儿成纤维细胞的分离培养及脂质体法转染研究[J]. 张艳丽,许丹,庞训胜,万永杰,王子玉,孟立,宋辉,王锋.  南京农业大学学报. 2010(01)
[2]兔骨髓间充质干细胞诱导分化为软骨组织的实验研究[J]. 黄定强,梁传余,王力红,刘世喜,李胜富.  临床耳鼻咽喉科杂志. 2005(04)
[3]造血基质干细胞的研究Ⅱ.异位移植骨髓的造血重建[J]. 范洪学,刘及.  白求恩医科大学学报. 1989(02)

博士论文
[1]骨髓与脂肪间质干细胞分离与诱导分化为成骨细胞的研究[D]. 马勇江.西北农林科技大学 2004
[2]成人MSC诱导分化为骨和软骨细胞及与胎儿MSC间差异表达基因的筛选[D]. 杨莉.重庆医科大学 2001



本文编号：3270417