O型口蹄疫病毒血清抗体竞争ELISA检测方法的建立及验证

发布时间：2021-07-13 02:12

　　目的建立O型口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus,FMDV）血清抗体的竞争ELISA检测方法,并进行验证。方法采用O型FMDV病毒样颗粒（virus-like particle,VLP）作为包被抗原,建立用于检测FMDV血清抗体的竞争ELISA方法。对方法的抗原包被浓度（0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7、0. 8、0. 9、1. 0μg/mL）、抗原包被温度及时间（4℃过夜、37℃1 h、37℃1.5 h、37℃2 h、37℃2. 5 h、37℃3 h）、血清稀释度（1∶2、1∶4、1∶8、1∶16稀释）、HRP-IgG稀释度（1∶10 000～1∶20 000稀释）、封闭液种类（不封闭、1%BSA封闭、2%BSA封闭、5%脱脂乳封闭）、封闭液作用时间（30、60、90、120 min）、血清与HRP-IgG作用时间（30、60、90、120、150 min）、底物TMB作用时间（10、15、20、25、30 min）进行优化。同时验证方法的交叉反应、特异性及敏感性、精密性。采用建立的方法及O型FMDV抗体液相阻断EL... 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020,33(04)CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

O型FMDV VLP的SDS-PAGE分析

O型FMDV VLP蛋白的Western blot鉴定

21份不同猪病的阳性血清中，除3份O型FMD阳性血清的抑制率>50%，为阳性外，其他血清样品抑制率均<50%，为阴性，该方法无交叉反应。2.4.2 特异性和敏感性

【参考文献】：
期刊论文
[1]ELISA在口蹄疫监测中的应用进展[J]. 厍大亮,陈前锋,武革利,厉少汉.  中国兽药杂志. 2014(01)
[2]口蹄疫病毒分子生物学检测方法研究进展[J]. 孙芳芳,董英,薛强,邹明强.  中国畜牧兽医. 2013(06)
[3]口蹄疫诊断技术的研究进展[J]. 刘明,徐娜,李志勇,柳纪省.  生物技术通报. 2010(05)



本文编号：3281124