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WT1基因调控牛卵泡颗粒细胞和膜细胞类固醇激素生成的研究

发布时间:2021-07-14 15:32
  WT1作为含锌指结构蛋白的转录因子,不仅在肿瘤发生过程中起重要的作用,还在维持组织稳态、调控器官发育等方面也发挥重要作用。类固醇激素参与了哺乳动物卵泡发育和闭锁的生物学过程,可以影响卵泡发育和卵母细胞的质量。颗粒细胞和膜细胞作为卵泡内主要的类固醇激素分泌细胞,其分泌的雌激素、孕酮及雄激素在卵泡发育及闭锁过程中扮演着重要的角色。据报道,WT1有两种可变剪接体WT1(+KTS)和WT1(-KTS),在性腺发育过程中起到不同的作用。已有人研究,WT1的下调能够调控小鼠腔前卵泡颗粒细胞的过早分化,引起卵泡发育异常。但是目前,WT1(+KTS)和WT1(-KTS)与颗粒细胞和膜细胞类固醇激素分泌有什么关系,这两种变体在卵泡发育过程中表达模式如何?WT1在家畜方面如何影响卵巢卵泡发育还未见报道。本研究分离牛卵巢不同阶段的有腔卵泡,进行了WT1基因及类固醇生成及相关基因在颗粒细胞和膜细胞中的表达模式研究,进行了WT1基因在卵巢颗粒细胞以及卵泡膜细胞中调控类固醇激素生成的作用的研究,并且进行了PI3K/AKT信号通路和MAPK/ERK信号通路参与WT1基因调控牛卵泡颗粒细胞类固醇激素生成的过程及其作用... 

【文章来源】:西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:131 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

WT1基因调控牛卵泡颗粒细胞和膜细胞类固醇激素生成的研究


WTl在不同阶段卵泡颗粒细胞及卵泡膜中的表达A:不同直径健康卵泡颗粒细胞中WT1和其变体的mRNA的相对表达;B:健康和闭锁卵泡颗粒细胞中WT7和其变体的mRNA的相对表达;C:不同直径健康卵泡膜?

免疫荧光染色,膜细胞,颗粒细胞


3.2.3 WT1 在卵泡颗粒细胞和膜细胞中的定位分离牛健康小卵泡颗粒细胞和膜细胞,免疫荧光鉴定结果显示,WT1 蛋白在颗粒细胞和膜细胞细胞核和细胞质中均有表达,但在颗粒细胞中主要在细胞核中表达(图 3-3A),而在膜细胞中核质均匀表达(图 3-3B)。

膜细胞,免疫荧光染色,卵泡颗粒细胞,颗粒细胞


论WT1 在牛不同发育阶段卵泡颗粒细胞和膜细胞中差异表达T1 在性腺发育过程中扮演着重要的角色。在卵巢中,WT1 在卵泡颗面上皮中都有表达(Pelletier et al. 1991b; Hsu et al. 1995; Chun et al. 19究表明在小鼠卵巢中腔前卵泡颗粒细胞 WT1 的表达量要高于有腔卵量(Hsu et al. 1995; Chun et al. 1999; Gao et al. 2013),然而在牛有腔阶T1 的表达变化并不清楚,此外 WT1 是否在牛卵泡膜细胞中表达也所周知,在牛一次卵泡波中,通常仅仅有一个小腔卵泡能够发育成有腔卵泡都在小腔和中腔阶段发生闭锁。因此,本试验首先研究了在图 3-3 WT1 在卵泡颗粒细胞和膜细胞中的定位A: 颗粒细胞的 WT1 免疫荧光染色; B: 膜细胞的 WT1 免疫荧光染Fig. 3-3 Localization of WT1 in GCs and TCs.munofluorescence staining of GCs incubated with anti-WT1 antibody; B: ImmunoflTCs incubated with anti-WT1 antibody. GC: granulosa cells, TC: theca c

【参考文献】:
期刊论文
[1]Effect of vitamin D3 on production of progesterone in porcine granulosa cells by regulation of steroidogenic enzymes[J]. So-Hye Hong,Jae-Eon Lee,Hong Sung Kim,Young-Jin Jung,DaeYoun Hwang,Jae Ho Lee,Seung Yun Yang,Seung-Chul Kim,Seong-Keun Cho,Beum-Soo An.  The Journal of Biomedical Research. 2016(03)
[2]Apoptosis in Granulosa cells during follicular atresia: relationship with steroids and insulin-like growth factors[J]. Yuan Song YU, Hong Shu SUI, Zheng Bin HAN, Wei LI, Ming Jiu LUO, Jing He TAN Laboratory of Animal Reproduction and Embryology College of Animal Sciences and Veterinary Medicine, Shandong Agricultural University, Taian, Shandong 271018, China Present address: College of life science. University of Beijing, Beijing, China..  Cell Research. 2004(04)



本文编号:3284414

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