大肠杆菌诱导奶牛乳腺成纤维细胞的MMPs/TIMPs和uPA系统表达的研究
发布时间：2021-07-15 16:37
奶牛乳腺炎是我国奶牛养殖业的一种常见疾病,其中受到大肠杆菌（E.coli）感染而引起的奶牛乳腺炎占很大比例。大肠杆菌性奶牛乳腺炎的主要致病原理是奶牛乳腺受到损伤后,被E.coli感染入侵,导致奶牛乳腺细胞分泌过量的细胞外基质（ECM）,继而造成乳腺的持续性纤维化,病情发展到后期,奶牛乳腺还会发生硬化。本文的实验主要通过深入研究E.coli对奶牛乳腺成纤维细胞（BMFBs）的MMPs、TIMPs以及uPA系统表达的影响,进一步阐明MMPs、TIMPs以及uPA系统在调控ECM代谢中所起的作用。本实验取已患有乳腺炎的奶牛乳腺,从中分离出致病的病原菌E.coli,并制成不同浓度的热灭活菌液,设计菌液浓度分别为105 cfu/mL、106 cfu/mL、108 cfu/mL,让不同浓度的热灭活E.coli作用BMFB,在作用6 h、12 h、24 h、48 h时分别对BMFB中分泌的MMPs（包括MMP-1/MMP-2/MMP-3/MMP-9/MMP-13）、TIMPs（包括TIMP-1/TIMP-2）以及uPA系统（包括uPA/uPAR/PAI-1）进行检测,应用实时荧光定量PCR（RT-q...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制因子-1在老年肌少症大鼠中的表达及意义[J]. 朱师宇,吕安康,赵宇星,蒲蝶,廖芷吟,孙悦,陈金梁,肖谦. 南方医科大学学报. 2020(01)
[2]基质金属蛋白酶及其抑制剂在心血管疾病中的研究进展[J]. 赵婉晴,高伟勤. 微量元素与健康研究. 2020(01)
[3]大肠杆菌的研究综述[J]. 殷泽禄,万虎. 甘肃畜牧兽医. 2019(05)
[4]PAI-1促进胆道闭锁肝纤维化的机制研究[J]. 颜培宏,郑一,陈后平,侯立松,朱莉,丁美云,詹江华,董冲,高伟. 临床小儿外科杂志. 2018(10)
[5]基质金属蛋白酶的研究进展[J]. 刘明明,李爱玲,修瑞娟. 中国病理生理杂志. 2018(10)
[6]基质金属蛋白酶抑制剂类抗肿瘤药物临床研究进展[J]. 韩艳珍,薛建鹏,胡加亮,徐寒梅. 药学进展. 2018(02)
[7]浅谈奶牛乳腺炎的综合防治措施[J]. 张松武,张学芳. 中国畜牧兽医文摘. 2018(01)
[8]MMP-9、TIMP-1在肺纤维化中作用的研究进展[J]. 高娟,王添印,韩茹,李淑岷. 山东医药. 2017(26)
[9]uPA/uPAR与恶性肿瘤关系的研究进展[J]. 王学谦,林洪生. 医学研究杂志. 2016(09)
[10]大肠杆菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1和NF-κB及TLR4表达的影响[J]. 王一,吴建美,毕艳楠,丁玉林,王凤龙. 中国兽医科学. 2015(07)
博士论文
[1]金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺纤维化分子机制与PI3K/Akt信号通路在乳腺纤维化的研究[D]. 毕艳楠.内蒙古农业大学 2018
[2]奶牛乳腺炎的病原菌分离鉴定、毒力基因检测与基因治疗研究[D]. 尹召华.扬州大学 2009
硕士论文
[1]大肠杆菌对奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1、bFGF和PDGF表达的影响[D]. 王一.内蒙古农业大学 2015
[2]2型猪链球菌组氨酸三聚体家族蛋白HtpsC与宿主细胞外基质作用机理的研究[D]. 王玲.南京师范大学 2015
[3]纤溶酶原激活因子及其抑制因子与卵巢癌浸润转移的研究[D]. 覃捷.广西医科大学 2007
本文编号：3286075
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２不同浓度的￡?ｒｏ／／作用ＢＭＦＢ不同时间后ＭＭＰ－１?ｎｉＲＮＡ的转录水平??
．５６Ｅ－０１?士８．２９Ｅ－０２，”??注：＊表示与?〇ＣＦＵ／ｍＬ?相比差异显著?＊尸＜０．０５；?“Ｐ＜０．０１；…Ｐ＜０．００１?（Ｍｅａｎ士ＳＤ）??｜??Ｉ?°＇８＂?＊＊＊?＾０?ｃｆｕ／ｍＬ??ｇ?〇６．?＊＊＊ｔ?＊＊＊?＾?■?１０５?ｃｆｕ／ｍＬ??ｇ?ｇＢ?＊＊＊?＊?国?１０６?ｃｆｕ／ｍＬ??戋?＊＊?！１ｔ?Ｉｔ＊＊＊?＾?ＥＨ?１〇８?ｃｆｕ／ｍＬ??ｓ?°－４－?ｄ?Ｉｋ??ｅ?＾，??Ｔｉｍｅ?ａｆｔｅｒ?ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ??图４不同浓度的￡．?ｒｏ／７作用ＢＭＦＢ不同时间后ＭＭＰ－２?ｍＲＮＡ的转录水平??Ｆｉｇ．４?Ｔｈｅ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ＭＭＰ－２?ｒｎＲＮＡ?ｉｎ?ＢＭＦＢ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?Ｅ．?ｃｏｌｉ?ａｔ?ｄｉｆｌｅｒｅｎｔ??ｔｉｍｅ??不同浓度的热灭活?￡?ｃｏ／／？在?６?ｈ、１２?ｈ、２４?ｈ、４８?ｌｉ?作用?ＢＭＦＢｓ?后，Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ??检测ＭＭＰ－２的蛋白表达水平结果显示（图５和表１１）?：?１０５ｃｆＷｍＬ和１０６ｃｆｕ／ｍＬ处??理组与对照组相比，在作用２４ｈ表达上调且差异极显著（／Ｋ０．００１），在作用其余时??间点表达均下调，除１０５ｃｆｉｉ／ｍＬ处理组在作用４８ｈ与对照组相比差异不显著??（芦＞０．０５），其余浓度处理组在各时间点与对照组相比均差异极显著（／？＜０．００１）；??１０８ｄ＼ｊ／ｍＬ处理组与对照组相比，在作用１２ｈ表达下调且差异极显著（／ｒｃＯ．ＯＯｌ），??在作用其余时间点表达均上调且在作用６ｈ、２４ｈ差异极
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【参考文献】：
期刊论文
[1]基质金属蛋白酶-1、金属蛋白酶组织抑制因子-1在老年肌少症大鼠中的表达及意义[J]. 朱师宇,吕安康,赵宇星,蒲蝶,廖芷吟,孙悦,陈金梁,肖谦. 南方医科大学学报. 2020(01)
[2]基质金属蛋白酶及其抑制剂在心血管疾病中的研究进展[J]. 赵婉晴,高伟勤. 微量元素与健康研究. 2020(01)
[3]大肠杆菌的研究综述[J]. 殷泽禄,万虎. 甘肃畜牧兽医. 2019(05)
[4]PAI-1促进胆道闭锁肝纤维化的机制研究[J]. 颜培宏,郑一,陈后平,侯立松,朱莉,丁美云,詹江华,董冲,高伟. 临床小儿外科杂志. 2018(10)
[5]基质金属蛋白酶的研究进展[J]. 刘明明,李爱玲,修瑞娟. 中国病理生理杂志. 2018(10)
[6]基质金属蛋白酶抑制剂类抗肿瘤药物临床研究进展[J]. 韩艳珍,薛建鹏,胡加亮,徐寒梅. 药学进展. 2018(02)
[7]浅谈奶牛乳腺炎的综合防治措施[J]. 张松武,张学芳. 中国畜牧兽医文摘. 2018(01)
[8]MMP-9、TIMP-1在肺纤维化中作用的研究进展[J]. 高娟,王添印,韩茹,李淑岷. 山东医药. 2017(26)
[9]uPA/uPAR与恶性肿瘤关系的研究进展[J]. 王学谦,林洪生. 医学研究杂志. 2016(09)
[10]大肠杆菌对体外培养的奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1和NF-κB及TLR4表达的影响[J]. 王一,吴建美,毕艳楠,丁玉林,王凤龙. 中国兽医科学. 2015(07)
博士论文
[1]金黄色葡萄球菌诱导小鼠乳腺纤维化分子机制与PI3K/Akt信号通路在乳腺纤维化的研究[D]. 毕艳楠.内蒙古农业大学 2018
[2]奶牛乳腺炎的病原菌分离鉴定、毒力基因检测与基因治疗研究[D]. 尹召华.扬州大学 2009
硕士论文
[1]大肠杆菌对奶牛乳腺成纤维细胞TGF-β1、bFGF和PDGF表达的影响[D]. 王一.内蒙古农业大学 2015
[2]2型猪链球菌组氨酸三聚体家族蛋白HtpsC与宿主细胞外基质作用机理的研究[D]. 王玲.南京师范大学 2015
[3]纤溶酶原激活因子及其抑制因子与卵巢癌浸润转移的研究[D]. 覃捷.广西医科大学 2007
本文编号：3286075
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