CXCL10/CXCR3在感染PRRSV猪肺组织和巨噬细胞中的表达
发布时间：2021-07-20 12:17
趋化因子10（CXCL10）是介导炎症反应的趋化因子,与其唯一的受体趋化因子受体3（CXCR3）结合后,不仅可以调节细胞迁移、生长,分化和死亡等多种细胞功能,还可调节病毒感染、炎症反应、肿瘤、损伤修复、自身免疫性疾等多种病理功能。CXCL10/CXCR3轴在多种由病毒感染的肺损伤中具有重要作用,PRRSV感染猪肺组织后造成肺损伤是导致死亡的主要原因,而关于CXCL10/CXCR3轴参与肺损伤过程的机制还尚未清楚。本研究检测PRRSV人工感染和临床感染的猪肺组织中CXCL10、CXCR3的mRNA和蛋白质的表达变化,进一步建立细胞模型,从组织和细胞水平分别检测了趋化因子CXCL10、趋化因子受体CXCR3在PRRSV感染的肺损伤中的表达。研究内容包括以下几个方面:1.感染PRRSV猪肺组织中CXCL10和CXCR3的表达变化检测利用实时荧光定量PCR（qPCR）的方法,分别检测了人工感染PRRSV和临床感染PRRSV猪肺组织中CXCL10和CXCR3 mRNA的表达量。人工感染的肺组织CXCL10和CXCR3 mRNA呈现高表达;临床感染组中CXCL10 mRNA呈高表达,而CXCR3 ...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略表（Abbreviation）
1.前言
1.1 趋化因子CXCL10和其受体CXCR3的研究进展
1.1.1 趋化因子CXCL10的特性
1.1.3 趋化因子受体CXCR3的特性
1.1.4 CXCL10/CXCR3介导Th1型炎症反应
1.1.5 CXCL10/CXCR3在肺损伤中的作用
1.2 PRRS的国内外研究现状
1.2.1 PRRS简介
1.2.2 PRRSV的特性
1.2.3 PRRS的防治
1.3 CXCL10/CXCR3在感染PRRSV猪肺损伤中的作用
1.4 研究目的
2.试验材料和方法
2.1 试验材料
2.1.1 动物材料
2.1.2 细胞系
2.1.3 主要仪器和试剂
2.1.4 主要试剂
2.1.5 主要溶液的配制
2.1.6 引物序列
2.2 试验方法
2.2.1 采样
2.2.2 攻毒实验
2.2.3 总RNA提取方法
2.2.4 电泳检测RNA
2.2.5 RNA的逆转录
2.2.6 总蛋白提取方法
2.2.7 总蛋白浓度的测定方法
2.2.8 聚合酶链式反应（PCR）
2.2.9 实时荧光定量PCR（Real time-qPCR）
2.2.10 PCR产物的电泳检测
2.2.11 免疫印迹试验（Western blot）
2.2.12 免疫印迹膜再生
2.2.13 MTT药物实验
2.3 统计学方法
3.结果与分析
3.1 猪肺组织和巨噬细胞总RNA提取结果
3.2 趋化因子CXCL10和受体CXCR3在组织中表达
3.2.1 趋化因子CXCL10在猪肺组织中mRNA的表达水平变化
3.2.2 CXCL10受体CXCR3在猪肺组织中mRNA的表达水平变化
3.2.3 CXCL10受体CXCR3在猪肺组织中蛋白的表达水平变化
3.3 趋化因子CXCL10 mRNA在细胞中表达水平变化
3.4 趋化因子受体CXCR3在细胞中表达水平变化
3.4.1 趋化因子受体CXCR3 mRNA在细胞中表达水平变化
3.4.2 趋化因子受体CXCR3蛋白在细胞中表达水平变化
3.5 活细胞分析方法（MTT法）检测细胞的活性
4.讨论
4.1 PRRSV影响CXCL10、CXCR3在猪肺组织中表达
4.2 不同刺激物影响CXCL10、CXCR3在巨噬细胞中的表达
5.结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]Construction of infectious cDNA clones of PRRSV:Separation of coding regions for nonstructural and structural proteins[J]. YUAN ShiShan & WEI ZuZhang Department of Animal Infectious Diseases, Key Laboratory of Animal Parasitology Chinese Ministry of Agriculture, Shanghai Vet- erinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200232, China. Science in China（Series C:Life Sciences）. 2008(03)
[2]Chemokines and Chemokine Receptors:Their Manifold Roles in Homeostasis and Disease[J]. Pablo Iribarren. Cellular & Molecular Immunology. 2004(02)
本文编号：3292808
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
中英文缩略表（Abbreviation）
1.前言
1.1 趋化因子CXCL10和其受体CXCR3的研究进展
1.1.1 趋化因子CXCL10的特性
1.1.3 趋化因子受体CXCR3的特性
1.1.4 CXCL10/CXCR3介导Th1型炎症反应
1.1.5 CXCL10/CXCR3在肺损伤中的作用
1.2 PRRS的国内外研究现状
1.2.1 PRRS简介
1.2.2 PRRSV的特性
1.2.3 PRRS的防治
1.3 CXCL10/CXCR3在感染PRRSV猪肺损伤中的作用
1.4 研究目的
2.试验材料和方法
2.1 试验材料
2.1.1 动物材料
2.1.2 细胞系
2.1.3 主要仪器和试剂
2.1.4 主要试剂
2.1.5 主要溶液的配制
2.1.6 引物序列
2.2 试验方法
2.2.1 采样
2.2.2 攻毒实验
2.2.3 总RNA提取方法
2.2.4 电泳检测RNA
2.2.5 RNA的逆转录
2.2.6 总蛋白提取方法
2.2.7 总蛋白浓度的测定方法
2.2.8 聚合酶链式反应（PCR）
2.2.9 实时荧光定量PCR（Real time-qPCR）
2.2.10 PCR产物的电泳检测
2.2.11 免疫印迹试验（Western blot）
2.2.12 免疫印迹膜再生
2.2.13 MTT药物实验
2.3 统计学方法
3.结果与分析
3.1 猪肺组织和巨噬细胞总RNA提取结果
3.2 趋化因子CXCL10和受体CXCR3在组织中表达
3.2.1 趋化因子CXCL10在猪肺组织中mRNA的表达水平变化
3.2.2 CXCL10受体CXCR3在猪肺组织中mRNA的表达水平变化
3.2.3 CXCL10受体CXCR3在猪肺组织中蛋白的表达水平变化
3.3 趋化因子CXCL10 mRNA在细胞中表达水平变化
3.4 趋化因子受体CXCR3在细胞中表达水平变化
3.4.1 趋化因子受体CXCR3 mRNA在细胞中表达水平变化
3.4.2 趋化因子受体CXCR3蛋白在细胞中表达水平变化
3.5 活细胞分析方法（MTT法）检测细胞的活性
4.讨论
4.1 PRRSV影响CXCL10、CXCR3在猪肺组织中表达
4.2 不同刺激物影响CXCL10、CXCR3在巨噬细胞中的表达
5.结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]Construction of infectious cDNA clones of PRRSV:Separation of coding regions for nonstructural and structural proteins[J]. YUAN ShiShan & WEI ZuZhang Department of Animal Infectious Diseases, Key Laboratory of Animal Parasitology Chinese Ministry of Agriculture, Shanghai Vet- erinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200232, China. Science in China（Series C:Life Sciences）. 2008(03)
[2]Chemokines and Chemokine Receptors:Their Manifold Roles in Homeostasis and Disease[J]. Pablo Iribarren. Cellular & Molecular Immunology. 2004(02)
本文编号：3292808
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3292808.html
