新疆南疆某规模牛场BVDV流行病学调查
发布时间：2021-07-22 19:08
牛病毒性腹泻病（bovine viral diarrhea,BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diarrhea virus,BVDV）感染动物机体引起的腹泻、黏膜脱落、母牛繁殖障碍、呼吸道疾病等多症状、多宿主为特征的一种急性、热性传染病。牛病毒性腹泻病毒是黄病毒科（Flaviviridae）瘟病毒属（Pestivirus）的代表种,在世界范围内广泛传播。近年来,在我国新疆地区也呈现蔓延趋势,严重影响了新疆养牛业的发展并造成了巨大的经济损失。因此,本研究通过血清学流行病学调查和分子生物学流行病学调查,以期掌握本地区BVDV的流行情况以及毒株型,能够为该规模牛场的防控和净化提出策略和方案。1.2018年12月2019年3月对新疆南疆某规模牛场进行全群采血,共采集2 358份血清样本,进行牛病毒性腹泻病毒抗体ELISA检测,结果有1 958份牛病毒性腹泻病毒抗体阳性样本,阳性率为83%（1 958/2 358）;其中成年牛阳性样品1 875份,抗体阳性率为84.16%（1 875/2 228）,占总数的79.52%（1 875/2 358）,犊牛阳...
【文章来源】：塔里木大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BVDV5’-UTR基因RT-PCR扩增结果
塔里木大学硕士学位论文第4章新疆南疆某规模牛场BVDV分子生物学检测23行RT-PCR扩增，凝胶成像，结果得到11条大小为292bp的片段，与预期片段大小相符（图4-1）。0M123456M789101112泳道M：DNAmarkerD2000；泳道0：空白对照；泳道1-12：RT-PCR扩增片段图4-1BVDV5’-UTR基因RT-PCR扩增结果Fig.4-1BVDV5’-UTRgeneRT-PCRexpandsincreasetheresults4.3.2BVDVN基因扩增结果以N基因特异性引物（BVDVB1/BVDVB2），进行RT-PCR扩增，凝胶成像，结果得到4条大小为736bp的片段，与预期片段大小相符（图4-2）。1M2345泳道M：DNAmarkerD2000；泳道1：空白对照；泳道2~5：RT-PCR扩增片段图4-2BVDVN基因RT-PCR扩增结果Fig.4-2BVDVNgeneRT-PCRexpandsincreasetheresults4.3.3PI牛RT-PCR鉴定经过对第一次血清学抗原检测的9份阳性血清牛进行复检，得到的1份阳性血清，以5’-UTR基因特异性引物（BVDVA1/BVDVA2）、N基因特异性引物（BVDVB1/BVDVB2）和5"-UTR+N基因特异性引物（BVDVA1/BVDVB2），进行RT-PCR扩增，电泳成像，均扩增出目的片段，片段大小为292bp、736bp以及1028bp，与预期片段大小2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp292bp736bp
塔里木大学硕士学位论文第4章新疆南疆某规模牛场BVDV分子生物学检测24相符（图4-3）。1M234图4-3PI牛RT-PCR扩增结果Fig.4-3persistentinfectioncattleRT-PCRexpandsincreasetheresults4.4RT-PCR检测结果4.4.1BVDV5’-UTR基因检测结果以2019年1月ELISA检测出的9份BVDV抗原阳性的血清和3份疑似阳性的血清作为样本，共计12份，经过检测，得出11份BVDV核酸阳性样品，即5T-2-1、5T-2-2、5T-2-3、5T-2-4、5T-2-6、5T-2-7、5T-2-8、5T-2-9、5T-2-10、5T-2-11、5T-2-12。4.4.2BVDVN基因检测结果以同上12份血清作为样本，经过检测，得出4份阳性结果，即5T-2-1、5T-2-4、5T-2-8、5T-2-9。4.4.3PI牛鉴定结果对复检得到的1份阳性血清进行5’-UTR基因、N基因和5"-UTR+N基因的RT-PCR扩增，扩增出的片段，与预期片段大小相同，证明为阳性牛。因血清学检测结果为阳性，且为21d后的复检，确定为PI牛。4.5同源性比较4.5.1BVDV5’-UTR核苷酸同源性比较将测序结果进行同源性比较，结果如下图（4-5）所示。检测出的11份阳性样品的2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp1028bp736bp292bp
【参考文献】：
期刊论文
[1]吉林某牛场牛病毒性腹泻流行病学调查及分析[J]. 刘泽余,李健友,刘占悝,李智杰,王超,郭利. 中国畜牧兽医. 2019(01)
[2]牛病毒性腹泻病毒致病机制研究进展[J]. 李新培,周伟光,关平原,程世鹏,温永俊. 中国畜牧兽医. 2018(08)
[3]玉树部分地区牦牛病毒性腹泻血清学检测报告[J]. 贺顺忠,牛永娟,张青兰,尕么江永,宋仁德,李家奎. 中国牛业科学. 2015(04)
[4]新疆规模化奶牛场繁殖障碍类疫病的血清学调查[J]. 殷涛,李岩,翟新验,范伟兴,剡根强,李静,张鲁安,苏贵成,原霖,屈勇刚,罗玉江. 当代畜牧. 2014(14)
[5]牛病毒性腹泻/黏膜病的诊断流行病学调查及防控[J]. 王淑娟,王华,宋晓晖,孙成友,徐天刚,刘春菊,张永强,赵永刚,刘海生,王志亮. 中国兽医杂志. 2014(03)
[6]新疆部分规模化奶牛场5种疫病的血清学调查[J]. 李静,李岩,范伟兴,袁立岗,齐亚银,蒲敬伟. 动物医学进展. 2013(11)
[7]牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测[J]. 王文,张娟,员丽娟,季新成. 动物医学进展. 2011(09)
[8]牛病毒性腹泻-黏膜病诊断方法研究进展[J]. 张宁,秦建华,赵博伟,张富梅,胡晓悦,赵月兰. 动物医学进展. 2008(02)
[9]牛病毒性腹泻-粘膜病的最新研究进展[J]. 孔繁德,陆承平. 福建畜牧兽医. 2005(03)
[10]牛病毒性腹泻病毒蛋白特性的研究进展[J]. 崔保安,朱沙,陈圣先. 中国畜牧兽医. 2003(02)
博士论文
[1]牛病毒性腹泻病毒抗原检测、流行病学研究及分离株E2基因的克隆表达[D]. 钟发刚.四川农业大学 2008
硕士论文
[1]新疆南疆部分规模奶牛场BVD流行病学调查及分析[D]. 王青青.塔里木大学 2017
[2]规模化牛场的牛病毒性腹泻净化评估与病原分析[D]. 李嘉.东北农业大学 2017
[3]新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛病毒性腹泻相关病原的调查研究[D]. 张坤.石河子大学 2016
[4]新疆部分地区牛病毒性腹泻病的流行病学调查及其病原的分离与鉴定[D]. 王龙.新疆农业大学 2015
[5]北疆部分规模化牛场奶牛BVD，IBR，BPI和Brucellosis的流行病学调查[D]. 罗玉江.石河子大学 2015
[6]新疆地区牛病毒性腹泻/黏膜病病毒的分离鉴定[D]. 蔡元庆.新疆农业大学 2015
[7]牛病毒性腹泻病毒新疆流行株的分离鉴定及E2基因遗传变异研究[D]. 王国超.石河子大学 2014
[8]牛病毒性腹泻/黏膜病的血清学调查及病原分离[D]. 郭芙莉.新疆农业大学 2014
[9]新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查[D]. 郭燕.石河子大学 2007
[10]基因2型牛病毒性腹泻病毒的分离、鉴定[D]. 任敏.新疆农业大学 2007
本文编号：3297725
【文章来源】：塔里木大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BVDV5’-UTR基因RT-PCR扩增结果
塔里木大学硕士学位论文第4章新疆南疆某规模牛场BVDV分子生物学检测23行RT-PCR扩增，凝胶成像，结果得到11条大小为292bp的片段，与预期片段大小相符（图4-1）。0M123456M789101112泳道M：DNAmarkerD2000；泳道0：空白对照；泳道1-12：RT-PCR扩增片段图4-1BVDV5’-UTR基因RT-PCR扩增结果Fig.4-1BVDV5’-UTRgeneRT-PCRexpandsincreasetheresults4.3.2BVDVN基因扩增结果以N基因特异性引物（BVDVB1/BVDVB2），进行RT-PCR扩增，凝胶成像，结果得到4条大小为736bp的片段，与预期片段大小相符（图4-2）。1M2345泳道M：DNAmarkerD2000；泳道1：空白对照；泳道2~5：RT-PCR扩增片段图4-2BVDVN基因RT-PCR扩增结果Fig.4-2BVDVNgeneRT-PCRexpandsincreasetheresults4.3.3PI牛RT-PCR鉴定经过对第一次血清学抗原检测的9份阳性血清牛进行复检，得到的1份阳性血清，以5’-UTR基因特异性引物（BVDVA1/BVDVA2）、N基因特异性引物（BVDVB1/BVDVB2）和5"-UTR+N基因特异性引物（BVDVA1/BVDVB2），进行RT-PCR扩增，电泳成像，均扩增出目的片段，片段大小为292bp、736bp以及1028bp，与预期片段大小2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp292bp736bp
塔里木大学硕士学位论文第4章新疆南疆某规模牛场BVDV分子生物学检测24相符（图4-3）。1M234图4-3PI牛RT-PCR扩增结果Fig.4-3persistentinfectioncattleRT-PCRexpandsincreasetheresults4.4RT-PCR检测结果4.4.1BVDV5’-UTR基因检测结果以2019年1月ELISA检测出的9份BVDV抗原阳性的血清和3份疑似阳性的血清作为样本，共计12份，经过检测，得出11份BVDV核酸阳性样品，即5T-2-1、5T-2-2、5T-2-3、5T-2-4、5T-2-6、5T-2-7、5T-2-8、5T-2-9、5T-2-10、5T-2-11、5T-2-12。4.4.2BVDVN基因检测结果以同上12份血清作为样本，经过检测，得出4份阳性结果，即5T-2-1、5T-2-4、5T-2-8、5T-2-9。4.4.3PI牛鉴定结果对复检得到的1份阳性血清进行5’-UTR基因、N基因和5"-UTR+N基因的RT-PCR扩增，扩增出的片段，与预期片段大小相同，证明为阳性牛。因血清学检测结果为阳性，且为21d后的复检，确定为PI牛。4.5同源性比较4.5.1BVDV5’-UTR核苷酸同源性比较将测序结果进行同源性比较，结果如下图（4-5）所示。检测出的11份阳性样品的2000bp1000bp750bp500bp250bp100bp1028bp736bp292bp
【参考文献】：
期刊论文
[1]吉林某牛场牛病毒性腹泻流行病学调查及分析[J]. 刘泽余,李健友,刘占悝,李智杰,王超,郭利. 中国畜牧兽医. 2019(01)
[2]牛病毒性腹泻病毒致病机制研究进展[J]. 李新培,周伟光,关平原,程世鹏,温永俊. 中国畜牧兽医. 2018(08)
[3]玉树部分地区牦牛病毒性腹泻血清学检测报告[J]. 贺顺忠,牛永娟,张青兰,尕么江永,宋仁德,李家奎. 中国牛业科学. 2015(04)
[4]新疆规模化奶牛场繁殖障碍类疫病的血清学调查[J]. 殷涛,李岩,翟新验,范伟兴,剡根强,李静,张鲁安,苏贵成,原霖,屈勇刚,罗玉江. 当代畜牧. 2014(14)
[5]牛病毒性腹泻/黏膜病的诊断流行病学调查及防控[J]. 王淑娟,王华,宋晓晖,孙成友,徐天刚,刘春菊,张永强,赵永刚,刘海生,王志亮. 中国兽医杂志. 2014(03)
[6]新疆部分规模化奶牛场5种疫病的血清学调查[J]. 李静,李岩,范伟兴,袁立岗,齐亚银,蒲敬伟. 动物医学进展. 2013(11)
[7]牛病毒性腹泻病毒血清抗体检测[J]. 王文,张娟,员丽娟,季新成. 动物医学进展. 2011(09)
[8]牛病毒性腹泻-黏膜病诊断方法研究进展[J]. 张宁,秦建华,赵博伟,张富梅,胡晓悦,赵月兰. 动物医学进展. 2008(02)
[9]牛病毒性腹泻-粘膜病的最新研究进展[J]. 孔繁德,陆承平. 福建畜牧兽医. 2005(03)
[10]牛病毒性腹泻病毒蛋白特性的研究进展[J]. 崔保安,朱沙,陈圣先. 中国畜牧兽医. 2003(02)
博士论文
[1]牛病毒性腹泻病毒抗原检测、流行病学研究及分离株E2基因的克隆表达[D]. 钟发刚.四川农业大学 2008
硕士论文
[1]新疆南疆部分规模奶牛场BVD流行病学调查及分析[D]. 王青青.塔里木大学 2017
[2]规模化牛场的牛病毒性腹泻净化评估与病原分析[D]. 李嘉.东北农业大学 2017
[3]新疆北疆地区规模化奶牛场犊牛病毒性腹泻相关病原的调查研究[D]. 张坤.石河子大学 2016
[4]新疆部分地区牛病毒性腹泻病的流行病学调查及其病原的分离与鉴定[D]. 王龙.新疆农业大学 2015
[5]北疆部分规模化牛场奶牛BVD，IBR，BPI和Brucellosis的流行病学调查[D]. 罗玉江.石河子大学 2015
[6]新疆地区牛病毒性腹泻/黏膜病病毒的分离鉴定[D]. 蔡元庆.新疆农业大学 2015
[7]牛病毒性腹泻病毒新疆流行株的分离鉴定及E2基因遗传变异研究[D]. 王国超.石河子大学 2014
[8]牛病毒性腹泻/黏膜病的血清学调查及病原分离[D]. 郭芙莉.新疆农业大学 2014
[9]新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查[D]. 郭燕.石河子大学 2007
[10]基因2型牛病毒性腹泻病毒的分离、鉴定[D]. 任敏.新疆农业大学 2007
本文编号：3297725
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3297725.html
