布鲁菌OMP28蛋白iELISA检测方法的建立与试剂盒的研制

发布时间：2021-07-23 14:09

　　布鲁菌病（Brucellosis）是一种由布鲁菌引起的、全球范围内危害严重的人畜共患病。布鲁菌外膜蛋白28（Outer Membrane Protein28,OMP28）具有较强的免疫原性,存在于大多数布鲁菌的不同种和生物型中。随着现代生物技术的不断发展,国际贸易已将酶联免疫吸附试验（Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）作为布鲁菌病的指定检测方法,而我国现行规定的检测方法有虎红平板凝集实验、乳牛全乳环状实验、试管凝集实验和补体结合实验,尚未将ELISA作为指定的检测方法。本研究通过对布鲁菌OMP28基因进行原核表达并纯化,获得高纯度可溶性重组蛋白OMP28。然后将该蛋白作为包被抗原,建立布鲁菌抗体检测的间接酶联免疫吸附（indirect ELISA, iELISA）万法,并进行诊断试剂盒的研制。实验根据GenBank中登录的布鲁菌OMP28蛋白的基因序列,设计一对特异性引物,以布鲁菌全基因组DNA为模板,PCR法扩增目的片段。将目的片段连接到表达载体pET-28（+）质粒上,得到重组表达质粒pET-28（+）-OMP28。将经双酶切鉴定和测... 

【文章来源】：山西农业大学山西省

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

1VIP28基因的PCR『增结果

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
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本文编号：3299438