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产半纤维素酶芽孢杆菌的筛选鉴定、发酵工艺及饲用效果研究

发布时间:2021-07-25 19:03
  传统饲料中富含抗消化粘性甘露聚糖和木聚糖,而畜禽的消化酶系中不含甘露聚糖酶,动物自身木聚糖酶很难将木聚糖完全降解,因此对这类物质的转化利用需要添加外源酶,但直接添加酶制剂又存在成本较高的问题,采用添加产酶益生菌剂的方式简便易行,可以达到提高饲料的利用率和降低养殖成本的目的。本研究采用刚果红平板变色圈法进行产木聚糖酶芽孢杆菌和产甘露糖酶芽孢杆菌的筛选,通过液体发酵测定酶活力进行复筛,并进行动物胃肠道耐受性和安全性试验,筛选出能够耐受动物胃肠道环境并且具有较高酶活力的安全性芽孢菌株。最终筛选到产木聚糖酶B-5菌株和产甘露聚糖酶NB-5菌株。其中B-5菌株和NB-5菌株在pH为2时仍保持较好的耐受性,存活率达到了90%左右,在人工肠液模拟环境中也都有很好的耐受性。通过形态特征、生理生化实验和16Sr DNA全序列分析,鉴定B-5菌株和NB-5菌株均为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),是国家农业部允许的饲喂动物安全菌株,对两菌株展开拮抗和共存性试验,证实菌株间不存在拮抗性,可以制成复合菌剂同时饲喂。对菌剂的生产工艺进行了研究。以菌株的芽孢形成率和芽孢数量为测定指标,分别对两菌... 

【文章来源】:河北农业大学河北省

【文章页数】:88 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

产半纤维素酶芽孢杆菌的筛选鉴定、发酵工艺及饲用效果研究


菌株刚果红初筛照片

照片,富集,菌株,照片


图2.1富集菌株的单菌落照片Fig2.1 Single colony photos of enriched strains芽孢杆菌筛选酶芽孢杆菌的初筛板初筛,有透明圈的 100 株。(见下图 2.2)共筛到产木聚糖酶芽数菌株形态是表面光滑,呈乳白色,边缘不规则,少数表面褶皱锯齿状,表面与中心颜色不一致。

照片,刚果红,菌株,照片


杆菌的复筛子液培养 12h,用无菌培养基调至 OD600养基培养,37℃200rpm 培养 72h,然后将上清液进行酶活力测定酶活力较高 20 株酶活力大小如下,其中 表2.4 甘露糖浓度吸光度测定结果4 concentration of xylose absorbency measurement re0.2 0.4 0.6 0.80.166 0.339 0.461 0.61图2.4菌株刚果红初筛照片ig.2.4 The congo red photo of screening strains

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]产适冷木聚糖酶菌株的筛选,酶的分离纯化、基因克隆和表达以及酶学性质研究[D]. 郭兵.山东大学 2009
[2]大丽轮枝菌拮抗细菌RS-25菌株的分离鉴定、发酵及抗菌多肽的纯化[D]. 武翠红.河北农业大学 2008
[3]β-甘露聚糖酶高产菌株筛选及酶的纯化与性质研究[D]. 成莉凤.中国农业科学院 2007
[4]木聚糖酶制剂在鸡胃肠道作用模式研究[D]. 王永花.南京农业大学 2006



本文编号:3302596

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