内毒素引起奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能降低的表观遗传学机制研究
发布时间：2021-07-28 12:55
为了满足高产奶牛营养需求而饲喂高精料日粮往往容易造成亚急性瘤胃酸中毒（SARA）,使瘤胃pH下降,引起内毒素（脂多糖,Lipopolysaccharide,LPS）释放增加,并导致奶牛泌乳性能下降。表观遗传学是研究在DNA序列不变的情况下,DNA或染色质形态发生改变引起基因表达发生变化的一门科学。本研究探讨了LPS对奶牛乳腺上皮细胞DNA甲基化和组蛋白乙酰化的影响,为从表观遗传学角度研究LPS导致的奶牛乳腺细胞泌乳能力降低的机制提供参考。试验一:采用DNA条形码技术、免疫组化分析和细胞生长活性测定试验对奶牛乳腺上皮细胞系MAC-T细胞进行细胞物种、类型和活性鉴定。鉴定结果显示,根据牛线粒体特异基因设计的引物进行扩增,产物在NCBI数据库中以BLAST比对的唯一物种为牛;细胞免疫荧光试验能检测到角蛋白18和β-酪蛋白的存在,说明该细胞类型为上皮型和乳腺细胞;细胞生长曲线呈S型。结果表明,该细胞为牛乳腺上皮细胞,且生长活性良好,符合试验研究要求。试验二:MAC-T细胞经0,1,10,100及1000 EU/mL的LPS处理48小时后,分别采用甲基化DNA免疫共沉淀测序技术（MeDIP-Se...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
内毒素对奶牛泌乳的影响（引自董国忠等，2015）
图 2-2 染色质、核小体、组蛋白、DNA 之间的关系Figure 2-2 The relationship between chromatin, nucleosome, histone and DNA发现由 LPS 诱导炎症基因染色质结构变化的证据是 1999 年的小鼠现由于 LPS 的刺激，巨噬细胞 IL-12 基因启动子区域发生快速的核而改变了染色质形态，导致 IL-12 的释放增加[48]。组蛋白去甲基化酶
图 2-4 MeDIP-Seq 检测 DNA 甲基化的流程ure 2-4 MeDIP-Seq detection of DNAmethylation pro盐直接测序法后测序（Bisulfite sequencing PCR, BSP）是 F甲基化的一种方法[67]。其主要原理是利用亚硫
【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA条形码在肉制品掺伪中非定向筛查技术的研究[J]. 钟文涛,王芳妹,李白玉,蒋伟,颜亨梅. 食品安全质量检测学报. 2017(05)
[2]内毒素对猪的危害及其控制[J]. 汪志,董国忠,吴剑波. 动物营养学报. 2017(02)
[3]质谱技术在DNA甲基化研究中的应用[J]. 黄新凤,叶金波,刘建军. 生物技术通报. 2015(11)
[4]DNA甲基化数据分析方法和软件应用[J]. 付利娟,夏映曦,何俊琳,刘学庆,陈雪梅,王应雄,丁裕斌. 重庆医学. 2012(17)
[5]热应激对奶牛血液中内毒素含量和抗氧化指标的影响[J]. 吴秀群,王立志. 四川畜牧兽医. 2011(01)
[6]DNA条形码在鉴定物种中的应用[J]. 杜启艳,常重杰. 生物学教学. 2010(12)
[7]奶牛产后子宫内细菌内毒素与子宫内膜炎的关系[J]. 姜彦雨,赵树臣,侯振中. 现代畜牧兽医. 2007(11)
[8]奶牛繁殖杀手——内毒素[J]. 施振旦,李孝伟,田允波,王翀. 中国奶牛. 2007(03)
[9]DNA甲基化研究方法的回顾与评价[J]. 顾婷婷,张忠明,郑鹏生. 中国妇幼健康研究. 2006(06)
[10]DNA甲基化方法研究现状[J]. 沈佳尧,侯鹏,祭美菊,李松,陆祖宏,何农跃. 生命的化学. 2003(02)
博士论文
[1]热应激对奶牛、奶山羊体内内毒素含量的影响及缓解热应激的营养技术研究[D]. 王立志.四川农业大学 2010
硕士论文
[1]内毒素对奶牛乳腺组织免疫活化状态及乳脂肪和乳蛋白合成的影响及其控制[D]. 原利荣.西南大学 2015
[2]不同日粮模式对奶牛瘤胃内毒素释放和乳腺免疫活化状态的影响[D]. 周俊.西南大学 2013
本文编号：3307958
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
内毒素对奶牛泌乳的影响（引自董国忠等，2015）
图 2-2 染色质、核小体、组蛋白、DNA 之间的关系Figure 2-2 The relationship between chromatin, nucleosome, histone and DNA发现由 LPS 诱导炎症基因染色质结构变化的证据是 1999 年的小鼠现由于 LPS 的刺激，巨噬细胞 IL-12 基因启动子区域发生快速的核而改变了染色质形态，导致 IL-12 的释放增加[48]。组蛋白去甲基化酶
图 2-4 MeDIP-Seq 检测 DNA 甲基化的流程ure 2-4 MeDIP-Seq detection of DNAmethylation pro盐直接测序法后测序（Bisulfite sequencing PCR, BSP）是 F甲基化的一种方法[67]。其主要原理是利用亚硫
【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA条形码在肉制品掺伪中非定向筛查技术的研究[J]. 钟文涛,王芳妹,李白玉,蒋伟,颜亨梅. 食品安全质量检测学报. 2017(05)
[2]内毒素对猪的危害及其控制[J]. 汪志,董国忠,吴剑波. 动物营养学报. 2017(02)
[3]质谱技术在DNA甲基化研究中的应用[J]. 黄新凤,叶金波,刘建军. 生物技术通报. 2015(11)
[4]DNA甲基化数据分析方法和软件应用[J]. 付利娟,夏映曦,何俊琳,刘学庆,陈雪梅,王应雄,丁裕斌. 重庆医学. 2012(17)
[5]热应激对奶牛血液中内毒素含量和抗氧化指标的影响[J]. 吴秀群,王立志. 四川畜牧兽医. 2011(01)
[6]DNA条形码在鉴定物种中的应用[J]. 杜启艳,常重杰. 生物学教学. 2010(12)
[7]奶牛产后子宫内细菌内毒素与子宫内膜炎的关系[J]. 姜彦雨,赵树臣,侯振中. 现代畜牧兽医. 2007(11)
[8]奶牛繁殖杀手——内毒素[J]. 施振旦,李孝伟,田允波,王翀. 中国奶牛. 2007(03)
[9]DNA甲基化研究方法的回顾与评价[J]. 顾婷婷,张忠明,郑鹏生. 中国妇幼健康研究. 2006(06)
[10]DNA甲基化方法研究现状[J]. 沈佳尧,侯鹏,祭美菊,李松,陆祖宏,何农跃. 生命的化学. 2003(02)
博士论文
[1]热应激对奶牛、奶山羊体内内毒素含量的影响及缓解热应激的营养技术研究[D]. 王立志.四川农业大学 2010
硕士论文
[1]内毒素对奶牛乳腺组织免疫活化状态及乳脂肪和乳蛋白合成的影响及其控制[D]. 原利荣.西南大学 2015
[2]不同日粮模式对奶牛瘤胃内毒素释放和乳腺免疫活化状态的影响[D]. 周俊.西南大学 2013
本文编号：3307958
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