猪痘病毒TK基因的缺失和表达RHDV VP60蛋白重组猪痘病毒的构建
发布时间：2021-07-31 12:34
猪痘病毒（Swinepox virus,SWPV）属于痘病毒科,是猪痘病毒属中的唯一成员,在自然情况下,只感染猪,通常呈良性经过。由于SWPV具有生物安全性和临床安全性好、较大的插入外源基因的能力及能诱导宿主产生良好的保护性免疫保护等优点,故适合作为载体用于开发重组疫苗。兔病毒性出血症（Rabbit Hemorrhagic Disease,RHD）是由兔病毒性出血症病毒（Rabbit Hemorrhagic Disease Virus,RHDV）引起兔的一种高度接触传染性致死性疾病。目前国内应用的RHD疫苗为组织灭活疫苗,然而基因工程疫苗是未来发展的方向。猪痘病毒可通过皮内接种和口服接种方式感染兔,能产生高水平的抗猪痘病毒抗体;且VP60蛋白是RHDV的主要结构蛋白,与病毒的免疫原性和致病性密切相关。为探讨猪痘病毒载体作为构建重组RHD活载体疫苗的可行性,本研究以猪痘病毒江西分离株JX-20G为亲本病毒,TK基因作为外源基因的插入位点,以EGFP/LacZ为筛选标记,通过同源重组技术,建立了重组猪痘病毒构建的技术平台。在此基础上,构建了表达RHDVVP60蛋白的重组猪痘病毒,并测定了重...
【文章来源】：江西农业大学江西省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２?ＳＷＰＶ基因组的?
图１－３?ＲＨＤＶ的基因结构［４６］??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｇｅｎｏｍｅ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＲＨＤＶ??Ｊｏａｎａ等系统阐述了?ＲＨＤＶ病毒的复制和装配过程（图１－４），ＲＨＤＶ病毒的外??壳由结构蛋白组成，病毒的非结构蛋白主要组成ＲＨＤＶ的复制酶，与基因组的ＲＮＡ??复制有关｜５７］。目前，ＲＨＤＶ的结构蛋白被认为是由主要衣壳蛋白ＶＰ６０和小结构蛋??白ＶＰ１０组成的。???＞■?Ｕｎｃｏａｔｉｎｇ?２??Ｉ?＼?，??１?ｚ?？?ｇ（ｗ＞ｍｉｃＲＷＡ?，一一■一?一一?—?—?—?—?一?ａｎｉ＾ｊｅｎｏｍＫ：ＲＮＡ??泰?１??Ｉ?３?Ｉ?６??Ｉ?Ｐ〇＾ｆ〇！？ｎ?ｉｕｆｃ￥ｅｎ〇ｆｆｔｋｉ＾Ａ??Ｉ?－?Ｉ?ＣＯｌＴ＞０＊ｉ３ｎｔ??＊?１?ｔ?９?１??Ｉ?Ｎｅ＾－ｓｔｉｙｓｔＳａ＾?（ＪｒＯｊｅｉｉＨ?／?，?，??１?／?ＳｔｒｕｃｔＵｆ＊?ｐｒ〇ｔ？－ｉｒ？??＊？＜?Ａｓｓｅｍｂｌｙ?—?ｈＢＢＢｍ??＾??图１－４ＲＨＤＶ复制示意图［５７］??Ｆｉｇ．?１－４?Ｔｈｅ?ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?ｃａｌｉｃｉｖｉｒｕｓｅｓ??ＶＰ６０蛋白是ＲＨＤＶ的主要结构蛋白，分子量大小约为６０ｋｕ，１８０个ＶＰ６０单??体共同组成病毒粒子的核衣壳。大量研究结果证明ＲＨＤＶ的衣壳蛋白与病毒的免疫??原性和致病性密切相关。Ｔｏｒｒｅｃｕａｄｒａｄａｎ等研究发现ＶＰ６０蛋白Ｎ端的第３１位酸至??第２５０位氨基酸残基是ＲＨＤＶ的主要抗原区域
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【参考文献】：
期刊论文
[1]串叶松香草高效再生体系的建立与兔出血症病毒YL株外壳蛋白基因VP60对其遗传转化[J]. 李传山,张婷婷,宋书峰,李维英,孔栋,郭蔼光. 生物技术通报. 2007(05)
[2]兔病毒性出血症基因工程疫苗的研究进展[J]. 张夏兰,王红宁,张昌菊,向菁,徐永莉,余协中. 中国预防兽医学报. 2007(10)
[3]兔出血症病毒VP60蛋白的原核表达及检测方法初步应用[J]. 刘怀然,胡迎东,陈洪岩,张龄,李昌文,关云涛,曲连东. 中国预防兽医学报. 2006(02)
[4]痘病毒载体的应用[J]. 翟新验,卢胜明. 中国生物工程杂志. 2005(12)
[5]兔出血症病毒衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的表达[J]. 严维巍,崔治中,王永坤. 生物工程学报. 2005(01)
[6]在昆虫细胞中表达能自聚成病毒样颗粒的兔出血症病毒衣壳蛋白[J]. 严维巍,崔治中,王永坤. 病毒学报. 2004(04)
[7]中国株兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因在大肠杆菌中的表达及其免疫原性鉴定[J]. 严维巍,崔治中,王永坤. 中国兽医学报. 2003(05)
[8]兔病毒性出血症（RHD）母源抗体动态与抗病毒感染关系[J]. 佟承刚,鲍国连,韦强,季全安. 中国养兔. 2001(03)
[9]兔出血症病毒对人类红细胞的血凝谱研究[J]. 王克领,郎利敏,郭秀琦,王四保,魏成斌. 中国养兔杂志. 1999(06)
[10]兔出血症病毒在细胞培养和组织中的形态发生[J]. 吉传义,龚晓明,杜念兴. 中国兽医学报. 1999(05)
博士论文
[1]表达猪链球菌2型保护性抗原重组猪痘病毒的构建、特性分析及其小鼠免疫评估[D]. 黄冬艳.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]ats1A启动子驱动的兔出血症病毒外壳蛋白VP60基因的植物表达载体构建及百脉根的转化[D]. 王涛.西北农林科技大学 2009
本文编号：3313478
【文章来源】：江西农业大学江西省
【文章页数】：76 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２?ＳＷＰＶ基因组的?
图１－３?ＲＨＤＶ的基因结构［４６］??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｇｅｎｏｍｅ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＲＨＤＶ??Ｊｏａｎａ等系统阐述了?ＲＨＤＶ病毒的复制和装配过程（图１－４），ＲＨＤＶ病毒的外??壳由结构蛋白组成，病毒的非结构蛋白主要组成ＲＨＤＶ的复制酶，与基因组的ＲＮＡ??复制有关｜５７］。目前，ＲＨＤＶ的结构蛋白被认为是由主要衣壳蛋白ＶＰ６０和小结构蛋??白ＶＰ１０组成的。???＞■?Ｕｎｃｏａｔｉｎｇ?２??Ｉ?＼?，??１?ｚ?？?ｇ（ｗ＞ｍｉｃＲＷＡ?，一一■一?一一?—?—?—?—?一?ａｎｉ＾ｊｅｎｏｍＫ：ＲＮＡ??泰?１??Ｉ?３?Ｉ?６??Ｉ?Ｐ〇＾ｆ〇！？ｎ?ｉｕｆｃ￥ｅｎ〇ｆｆｔｋｉ＾Ａ??Ｉ?－?Ｉ?ＣＯｌＴ＞０＊ｉ３ｎｔ??＊?１?ｔ?９?１??Ｉ?Ｎｅ＾－ｓｔｉｙｓｔＳａ＾?（ＪｒＯｊｅｉｉＨ?／?，?，??１?／?ＳｔｒｕｃｔＵｆ＊?ｐｒ〇ｔ？－ｉｒ？??＊？＜?Ａｓｓｅｍｂｌｙ?—?ｈＢＢＢｍ??＾??图１－４ＲＨＤＶ复制示意图［５７］??Ｆｉｇ．?１－４?Ｔｈｅ?ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?ｃａｌｉｃｉｖｉｒｕｓｅｓ??ＶＰ６０蛋白是ＲＨＤＶ的主要结构蛋白，分子量大小约为６０ｋｕ，１８０个ＶＰ６０单??体共同组成病毒粒子的核衣壳。大量研究结果证明ＲＨＤＶ的衣壳蛋白与病毒的免疫??原性和致病性密切相关。Ｔｏｒｒｅｃｕａｄｒａｄａｎ等研究发现ＶＰ６０蛋白Ｎ端的第３１位酸至??第２５０位氨基酸残基是ＲＨＤＶ的主要抗原区域
，?７３７￥??图１－３?ＲＨＤＶ的基因结构［４６］??Ｆｉｇ．?１－３?Ｔｈｅ?ｇｅｎｏｍｅ?ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＲＨＤＶ??Ｊｏａｎａ等系统阐述了?ＲＨＤＶ病毒的复制和装配过程（图１－４），ＲＨＤＶ病毒的外??壳由结构蛋白组成，病毒的非结构蛋白主要组成ＲＨＤＶ的复制酶，与基因组的ＲＮＡ??复制有关｜５７］。目前，ＲＨＤＶ的结构蛋白被认为是由主要衣壳蛋白ＶＰ６０和小结构蛋??白ＶＰ１０组成的。???＞■?Ｕｎｃｏａｔｉｎｇ?２??Ｉ?＼?，??１?ｚ?？?ｇ（ｗ＞ｍｉｃＲＷＡ?，一一■一?一一?—?—?—?—?一?ａｎｉ＾ｊｅｎｏｍＫ：ＲＮＡ??泰?１??Ｉ?３?Ｉ?６??Ｉ?Ｐ〇＾ｆ〇！？ｎ?ｉｕｆｃ￥ｅｎ〇ｆｆｔｋｉ＾Ａ??Ｉ?－?Ｉ?ＣＯｌＴ＞０＊ｉ３ｎｔ??＊?１?ｔ?９?１??Ｉ?Ｎｅ＾－ｓｔｉｙｓｔＳａ＾?（ＪｒＯｊｅｉｉＨ?／?，?，??１?／?ＳｔｒｕｃｔＵｆ＊?ｐｒ〇ｔ？－ｉｒ？??＊？＜?Ａｓｓｅｍｂｌｙ?—?ｈＢＢＢｍ??＾??图１－４ＲＨＤＶ复制示意图［５７］??Ｆｉｇ．?１－４?Ｔｈｅ?ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｃｙｃｌｅ?ｏｆ?ｃａｌｉｃｉｖｉｒｕｓｅｓ??ＶＰ６０蛋白是ＲＨＤＶ的主要结构蛋白
【参考文献】：
期刊论文
[1]串叶松香草高效再生体系的建立与兔出血症病毒YL株外壳蛋白基因VP60对其遗传转化[J]. 李传山,张婷婷,宋书峰,李维英,孔栋,郭蔼光. 生物技术通报. 2007(05)
[2]兔病毒性出血症基因工程疫苗的研究进展[J]. 张夏兰,王红宁,张昌菊,向菁,徐永莉,余协中. 中国预防兽医学报. 2007(10)
[3]兔出血症病毒VP60蛋白的原核表达及检测方法初步应用[J]. 刘怀然,胡迎东,陈洪岩,张龄,李昌文,关云涛,曲连东. 中国预防兽医学报. 2006(02)
[4]痘病毒载体的应用[J]. 翟新验,卢胜明. 中国生物工程杂志. 2005(12)
[5]兔出血症病毒衣壳蛋白基因在毕赤酵母中的表达[J]. 严维巍,崔治中,王永坤. 生物工程学报. 2005(01)
[6]在昆虫细胞中表达能自聚成病毒样颗粒的兔出血症病毒衣壳蛋白[J]. 严维巍,崔治中,王永坤. 病毒学报. 2004(04)
[7]中国株兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因在大肠杆菌中的表达及其免疫原性鉴定[J]. 严维巍,崔治中,王永坤. 中国兽医学报. 2003(05)
[8]兔病毒性出血症（RHD）母源抗体动态与抗病毒感染关系[J]. 佟承刚,鲍国连,韦强,季全安. 中国养兔. 2001(03)
[9]兔出血症病毒对人类红细胞的血凝谱研究[J]. 王克领,郎利敏,郭秀琦,王四保,魏成斌. 中国养兔杂志. 1999(06)
[10]兔出血症病毒在细胞培养和组织中的形态发生[J]. 吉传义,龚晓明,杜念兴. 中国兽医学报. 1999(05)
博士论文
[1]表达猪链球菌2型保护性抗原重组猪痘病毒的构建、特性分析及其小鼠免疫评估[D]. 黄冬艳.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]ats1A启动子驱动的兔出血症病毒外壳蛋白VP60基因的植物表达载体构建及百脉根的转化[D]. 王涛.西北农林科技大学 2009
本文编号：3313478
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